微小RNA調(diào)控膠質(zhì)瘤化學(xué)治療耐藥的研究進(jìn)展*

曾昭穆，李琳，郭巖松，祁惠秀，劉永，閆晴宇，鄭克彬

(1.河北大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，保定 071000；2.河北大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，保定 071000)

神經(jīng)膠質(zhì)瘤占原發(fā)性腦腫瘤的70%以上，復(fù)發(fā)率及死亡率極高[1]。多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblastoma，GBM)屬于4級高度侵襲性腫瘤。盡管手術(shù)聯(lián)合放射治療(放療)和化學(xué)治療(化療)方案已顯著改善GBM患者的生活質(zhì)量，但中位數(shù)生存期依然較短，為12～15個月，5年生存率僅4.7%[2-3]。當(dāng)前，由于腫瘤細(xì)胞的內(nèi)源性和獲得性耐藥的存在，化療藥物對惡性膠質(zhì)瘤患者的臨床益處依舊有限。隨著新一代測序技術(shù)和生物信息學(xué)分析的發(fā)展，非編碼RNA的相關(guān)研究取得明顯進(jìn)展。越來越多的證據(jù)表明，微小RNA(microRNA，miRNA)不僅是膠質(zhì)瘤增殖、侵襲、凋亡、自噬、免疫應(yīng)答的生物標(biāo)志物，同時也是參與膠質(zhì)瘤耐藥的調(diào)節(jié)因子[4-5]。miRNA已成為膠質(zhì)瘤耐藥過程中至關(guān)重要的明星分子，而靶向調(diào)控miRNA也可能成為逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥的一種新型治療策略。因此，筆者系統(tǒng)總結(jié)miRNA在多種抗腫瘤藥物中的調(diào)控功能及耐藥機(jī)制，同時對基于納米載體轉(zhuǎn)運(yùn)的核酸治療進(jìn)行了相關(guān)展望。旨在進(jìn)一步分析miRNA作為新的治療靶點(diǎn)在膠質(zhì)瘤化療耐藥逆轉(zhuǎn)過程中的潛在意義。

1 miRNA參與多種抗腫瘤藥物耐藥

化療耐藥一直是膠質(zhì)瘤臨床治療的主要障礙。惡性膠質(zhì)瘤患者血腦屏障常常有不同程度的破壞，膠質(zhì)瘤本身對抗癌藥物的耐受是導(dǎo)致化療失敗的最本質(zhì)原因。更為重要的是，這些原發(fā)性或繼發(fā)性耐藥的腫瘤細(xì)胞常常表現(xiàn)出多重耐藥(multiple drug resistance，MDR)的特征，其表型主要特點(diǎn)是癌細(xì)胞對一種藥物產(chǎn)生耐藥的同時，對其他結(jié)構(gòu)和機(jī)制不同的藥物也具有交叉耐藥性。事實(shí)上，膠質(zhì)瘤的臨床MDR由許多因素所引起，這些因素可分為宿主因素、腫瘤因素和腫瘤-宿主相互作用因素，具體包括宿主遺傳變異、藥物相互作用；藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)、DNA修復(fù)、上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、膠質(zhì)瘤干細(xì)胞表型和自噬；腫瘤微環(huán)境、細(xì)胞間轉(zhuǎn)移等[2]。因此，為了減少或消除化療耐藥，揭示其耐藥機(jī)制就顯得至關(guān)重要。

1.1miRNA參與替莫唑胺耐藥 替莫唑胺細(xì)胞毒性作用的主要機(jī)制是破壞膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的DNA結(jié)構(gòu)，阻止DNA修復(fù)，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。在腫瘤耐藥研究中，一些致癌性miRNA可以調(diào)控凋亡相關(guān)信號通路，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞逃避凋亡，從而導(dǎo)致膠質(zhì)瘤對替莫唑胺產(chǎn)生耐藥性。

1.1.1細(xì)胞凋亡 缺氧誘導(dǎo)因子(hypoxia inducible factor，HIF)-1α介導(dǎo)的miR-26a是一種缺氧敏感性miRNA，在缺氧條件下的GBM細(xì)胞中表達(dá)水平明顯上調(diào)，并且miR-26a的上調(diào)可直接誘導(dǎo)線粒體的保護(hù)反應(yīng)，增強(qiáng)體內(nèi)外替莫唑胺的耐藥性。另外，研究證明miR-26a還可抑制Bax和Bad的表達(dá)，以此減弱替莫唑胺誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[6]。同樣，在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞系中顯著表達(dá)的miR-299-5p可以通過靶向作用GOLPH3調(diào)控絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)/細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶-(extracellular signal-regulated kinase，ERK)信號軸來抑制細(xì)胞凋亡，從而增強(qiáng)膠質(zhì)瘤對替莫唑胺的化療耐藥[7]。此外，miR-497可以通過IGF1R /IRS1途徑上調(diào)mTOR和Bcl-2蛋白的表達(dá)來誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的替莫唑胺凋亡抵抗[8]。

1.1.2膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(glioma stem cells，GSCs) GSCs通過多種復(fù)雜交錯的信號網(wǎng)絡(luò)在膠質(zhì)瘤化療過程中發(fā)揮重要作用。越來越多的證據(jù)表明，miRNA與GSCs驅(qū)動的膠質(zhì)瘤耐藥性之間存在相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn)，miR-30b-3p在缺氧GSCs衍生外泌體中的表達(dá)顯著提高，并可伴隨外泌體跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)至受體GBM細(xì)胞內(nèi)，直接靶向結(jié)合BRHOB，以促進(jìn)替莫唑胺化療抵抗[9]。此外，外源性miR-26a和miR-223的高表達(dá)都可通過促進(jìn)GSCs的增殖能力和球形形成，進(jìn)而誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞化療耐藥。研究表明，miR-26a可以通過與AP-2α的3'-UTR靶向結(jié)合來誘導(dǎo)GSCs增殖，從而促進(jìn)膠質(zhì)瘤對替莫唑胺的耐藥性[10]。miR-223在GBM細(xì)胞中的表達(dá)顯著增加，可以直接結(jié)合PAX6發(fā)生負(fù)向調(diào)控，并通過調(diào)節(jié)磷酯酰肌醇3 激酶( phosphoinositide-3-kinase，PI3K)/絲氨酸蘇氨酸激酶 (serine-threonine kinase，AKT)信號通路來促進(jìn)膠GSCs增殖分化，從而降低替莫唑胺的敏感性及生長抑制[11]。

1.1.3DNA損傷修復(fù) 相比之下，miRNA還可以作為腫瘤抑制因子，逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤的替莫唑胺耐藥。例如，O-6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(O-6-methylguanine-DNA methyltransferase，MGMT)是早期發(fā)現(xiàn)可造成腫瘤化療耐藥的一種DNA修復(fù)酶，它的基本功能是通過將鳥嘌呤O-6位點(diǎn)的甲基轉(zhuǎn)移至半胱氨酸殘基來修復(fù)受損的鳥嘌呤核苷酸，從而避免烷化劑藥物引起的基因突變和細(xì)胞死亡。研究發(fā)現(xiàn)，MGMT表達(dá)量下調(diào)與miR-648和miR-125b的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)[12]。另一研究報(bào)道，將miRNA模擬物遞送至膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，高表達(dá)的miRNA-181d可以通過靶向結(jié)合MGMT來逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對替莫唑胺的耐藥性。并且一種基于全基因組微陣列分析方法指出，miR-181d-5p是一個始終只與MGMT發(fā)生靶向結(jié)合的miRNA，這種特異性對于替莫唑胺耐藥性預(yù)測具有重要價值[13]。此外，miR-198也可降低膠質(zhì)瘤細(xì)胞中MGMT的表達(dá)，從而增強(qiáng)替莫唑胺的細(xì)胞毒性。然而，生長轉(zhuǎn)化因子β1(transforming growth factor β1，TGF-β1)的過表達(dá)可通過抑制人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞中的KH-type剪切調(diào)控蛋白來阻礙miR-198剪切成熟，從而促進(jìn)MGMT去甲基化和膠質(zhì)瘤耐藥[14]。

1.1.4上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT) EMT是惡性腫瘤的標(biāo)志，其生物學(xué)進(jìn)程在腦膠質(zhì)瘤惡性表型及臨床治療評估中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。研究表明，miRNA同樣可以調(diào)節(jié)EMT過程，從而逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤對替莫唑胺的耐藥性。例如，miR-26b過表達(dá)通過靶向結(jié)合Wee1逆轉(zhuǎn)耐藥膠質(zhì)瘤細(xì)胞的EMT，從而增加耐藥細(xì)胞的替莫唑胺敏感性[15]。組織蛋白酶B被證實(shí)是miR-140的直接標(biāo)靶，miR-140可通過降低組織蛋白酶B的表達(dá)來抑制腫瘤細(xì)胞EMT并增強(qiáng)替莫唑胺的細(xì)胞毒性[16]。另一研究中證實(shí)，miR-128-3p在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞系中表達(dá)下調(diào)，而過表達(dá)miR-128-3p可下調(diào)EMT轉(zhuǎn)化蛋白C-Met、PDGFRα、Notch1和Slug的表達(dá)水平，以此增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對替莫唑胺的敏感性[17]。

1.1.5自噬 自噬是一種基于溶酶體降解細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行周轉(zhuǎn)的過程，在膠質(zhì)瘤的多個方面扮演著重要角色，尤其是在藥物應(yīng)激上，miRNA介導(dǎo)的自噬對膠質(zhì)瘤耐藥性起著關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用。在缺氧條件下，HIF-1α可以通過負(fù)向調(diào)節(jié)miR-224-3p的表達(dá)來影響腫瘤細(xì)胞的化療耐藥。ATG5是miR- 224-3p的直接作用標(biāo)靶，高表達(dá)miR-224-3p可以通過抑制ATG5介導(dǎo)的缺氧自噬來逆轉(zhuǎn)LN229細(xì)胞和U251細(xì)胞的化學(xué)耐藥性[18]。此外，高表達(dá)miR-519a可提高膠質(zhì)瘤細(xì)胞對替莫唑胺化療的敏感性，而這種化療增敏正是通過miR-519a抑制STAT3/Bcl-2/ Beclin-1途徑調(diào)控自噬和凋亡來實(shí)現(xiàn)[19]。

1.1.6跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 藥物轉(zhuǎn)運(yùn)與替莫唑胺耐藥之間有著一張龐大復(fù)雜的互作網(wǎng)絡(luò)，通過miRNA介導(dǎo)的相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白來逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤對替莫唑胺的耐藥已被廣泛研究。例如，miR-302c上調(diào)后通過靶向抑制膠質(zhì)瘤耐藥細(xì)胞中轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白P-糖蛋白(P-gp)來增強(qiáng)替莫唑胺的細(xì)胞毒性[20]。另一類似的研究報(bào)道，ABCC1在耐藥腫瘤細(xì)胞中表達(dá)發(fā)生上調(diào)，而miR-1268a的過表達(dá)可以逆轉(zhuǎn)這種上調(diào)，抑制ABCC1翻譯，從而增強(qiáng)耐藥細(xì)胞對替莫唑胺的化療敏感[21]。Wnt5a是miR-129-5p的關(guān)鍵靶點(diǎn)，過表達(dá)miR-129-5p可以通過抑制Wnt5a來阻斷PKC/ERK/ NF-κB和JNK信號通路的激活，從而逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對替莫唑胺耐藥[22](表1)。

表1 MiRNAs參與替莫唑胺耐藥

1.2miRNA參與順鉑耐藥 順鉑作為復(fù)發(fā)性膠質(zhì)瘤挽救治療中最常用的化療藥物。其主要作用靶點(diǎn)是DNA，可以共價結(jié)合鳥嘌呤和腺嘌呤的嘌呤堿基，形成鏈內(nèi)加合物以抑制DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，造成DNA損傷[23]。

1.2.1膠質(zhì)瘤干細(xì)胞 GSCs是一群具有自我更新能力的細(xì)胞，GSCs相關(guān)的miRNA是膠質(zhì)瘤化療耐藥的關(guān)鍵介質(zhì)。miR-186被證實(shí)在膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)顯著降低。YY1作為GSCs的分子標(biāo)志物，過表達(dá)miR-186可以通過靶向結(jié)合YY1來抑制GSCs表型的形成，進(jìn)而逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤的順鉑耐藥[24]。另外，研究發(fā)現(xiàn)，CD133陽性的GSCs對順鉑治療表現(xiàn)出更強(qiáng)的抵抗力，而過表達(dá)的miR-29a可以改善CD133介導(dǎo)的化學(xué)抗性，提高膠質(zhì)瘤對順鉑的敏感性[25]。

1.2.2細(xì)胞凋亡 一些抑癌基因能夠逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤的順鉑耐藥，主要是通過調(diào)控細(xì)胞凋亡來實(shí)現(xiàn)。研究發(fā)現(xiàn)，外源性miR-22模擬物可以通過與SNAIL1發(fā)生靶向結(jié)合來誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞周期停滯，從而增強(qiáng)U87MG細(xì)胞對順鉑的敏感性[26]。另一研究表明，miR-107在膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)水平降低，而mTOR表達(dá)水平則顯著增高。與U251親本細(xì)胞比較，U251耐藥株中miR-107和mTOR的表達(dá)水平也有著類似趨勢。體外研究證明，過表達(dá)miR-107可以通過抑制mTOR和Survivin的表達(dá)來促進(jìn)耐藥細(xì)胞發(fā)生凋亡，進(jìn)而顯著增強(qiáng)順鉑介導(dǎo)的細(xì)胞毒性[27]。同樣，miR-501-3p可以靶向結(jié)合MYCN的3'-UTR來促進(jìn)順鉑誘導(dǎo)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞調(diào)亡和增殖阻滯。需要注意的是，MYCN表達(dá)的恢復(fù)可逆轉(zhuǎn)miR-501-3p這種促進(jìn)效應(yīng)[28]。另外，在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞系中低表達(dá)的miR-128也可以逆轉(zhuǎn)順鉑耐藥。其潛在機(jī)制是，恢復(fù)miR-128的表達(dá)可以靶向結(jié)合JAG1分子位點(diǎn)使Bax表達(dá)增高及Bcl-2表達(dá)降低，從而通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡和S期阻滯來增強(qiáng)順鉑介導(dǎo)的細(xì)胞毒性[29](表2)。

表2 MiRNAs參與順鉑耐藥

1.3miRNA參與植物源性抗腫瘤藥耐藥 近年來，植物提取物對抗腦膠質(zhì)瘤倍受醫(yī)學(xué)研究人員的關(guān)注[30]。臨床研究表明，很多天然提取物不僅具有抗瘤活性，還可以緩解放療、化療不良反應(yīng)，提高患者生活質(zhì)量，降低腫瘤復(fù)發(fā)率[31]。此外，一些致癌性miRNA的表達(dá)可以直接影響天然抗癌藥物的化療功效。例如，miR-374a在惡性膠質(zhì)瘤中表達(dá)顯著增高，當(dāng)敲低miR-374a時可以直接增加膠質(zhì)瘤細(xì)胞中FOXO1的表達(dá)，進(jìn)而增強(qiáng)依托泊苷對腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性[32]。miR-218為一種抑癌基因，而miR-218-2在膠質(zhì)瘤組織和膠質(zhì)瘤細(xì)胞中卻高表達(dá)，并與膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長、侵襲、遷移和β-拉帕醌化療耐藥呈正相關(guān)。從機(jī)制上講，miR-218-2可以通過降低CDC27基因的表達(dá)來促進(jìn)U87MG和U251細(xì)胞對β-拉帕醌的化療耐藥[33]。YIN等[34]首次證明miR-326的過表達(dá)可以提高惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞對抗癌藥物姜黃素的化學(xué)敏感性。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明高表達(dá)miR-326可以通過抑制SHH/GLI1信號途徑來降低腫瘤細(xì)胞的活力，進(jìn)而增強(qiáng)姜黃素對U87MG和U251的細(xì)胞毒性。程序性死亡因子配體1(programmed death ligand 1，PD-1)在紫杉醇耐藥U87MG中的表達(dá)顯著增加，通過直接作用PD-L1的3'-UTR，miR-34a可以抑制腫瘤細(xì)胞的進(jìn)展和化療耐藥[35]。此外，雷帕霉素的應(yīng)用可以給膠質(zhì)瘤細(xì)胞創(chuàng)造一種饑餓狀態(tài)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬發(fā)生[36]。研究報(bào)道，miR-7-1-3p的高表達(dá)可以通過分別抑制GBM細(xì)胞中PKCa和iNOS的表達(dá)來增強(qiáng)木犀草素和水飛薊賓協(xié)同用藥的抗腫瘤活性，更重要的是，還可以通過抑制雷帕霉素誘導(dǎo)的自噬來促進(jìn)細(xì)胞凋亡[37](表3)。

表3 MiRNAs參與植物源性抗癌藥耐藥

1.4miRNA參與分子靶向藥耐藥 分子靶向治療與傳統(tǒng)藥物比較，其毒性小，只針對腫瘤細(xì)胞起抑制作用；作用機(jī)制上，分子靶向藥物可以精準(zhǔn)調(diào)控腫瘤細(xì)胞上的特定受體、關(guān)鍵基因和控制分子。然而，關(guān)于膠質(zhì)瘤對分子靶向藥物的抵抗機(jī)制目前尚不清楚，但已發(fā)現(xiàn)一些miRNA可以直接參與調(diào)節(jié)分子靶向藥物的細(xì)胞毒作用[38]。舒尼替尼作為一種抗血管生成的絡(luò)氨酸酶抑制藥，通過直接作用P-gp和Bcrp的3'-UTR，miR-145模擬物轉(zhuǎn)染可以促進(jìn)舒尼替尼在GBM中的細(xì)胞毒性效應(yīng)[39]。同樣，miR-302a和miR-520b模擬物也可以直接靶向結(jié)合AKT1、PIK3CA 和SOS1的3'-UTR，通過抑制U87MG細(xì)胞中受體酪氨酸激酶介質(zhì)AKT1、PIK3CA 和SOS1的表達(dá)，提高腫瘤細(xì)胞對舒尼替尼的敏感性和細(xì)胞凋亡。遺憾的是，miR-302a和miR-520b的這種調(diào)節(jié)效應(yīng)在替莫唑胺中卻未能顯現(xiàn)[40]。

生長因子受體是惡性膠質(zhì)瘤信號網(wǎng)絡(luò)中的重要調(diào)節(jié)蛋白。表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)和血小板源性生長因子受體新型藥物耐藥性一直是實(shí)驗(yàn)研究的熱點(diǎn)。miR-106a是參與耐藥的重要分子，除了可以促進(jìn)MDR1和MRP1的表達(dá)來增強(qiáng)U87MG耐藥細(xì)胞的藥物外排能力和抗凋亡能力外，還可以正向調(diào)節(jié)GST-π的表達(dá)來增強(qiáng)U87MG耐藥細(xì)胞的藥物解毒能力，協(xié)同通過上述多種調(diào)控機(jī)制來增加膠質(zhì)瘤細(xì)胞對吉非替尼的耐藥抗性[41]。與正常膠質(zhì)細(xì)胞比較，GBM中miR-450a表達(dá)顯著降低，miR-450a高表達(dá)可以通過抑制EGFR的翻譯來調(diào)控PI3K/AKT/mTOR信號通路，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和自噬以增強(qiáng)吉非替尼在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的敏感性。另外，miR-450a誘導(dǎo)的上述反應(yīng)可以被WIPI1敲低所逆轉(zhuǎn)[42]。在尼妥珠單抗的研究中證實(shí)，通過抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞細(xì)胞系中高表達(dá)的miR-566可以負(fù)向調(diào)節(jié)VHL，進(jìn)而提高腫瘤細(xì)胞對尼妥珠單抗的敏感性[43]。此外，在伊馬替尼耐藥GBM細(xì)胞中可以發(fā)現(xiàn)SNAI2表達(dá)增高，而沉默SNAI2可直接抑制腫瘤細(xì)胞EMT進(jìn)程和耐藥性。研究還發(fā)現(xiàn)，miR-203模擬物可以通過與耐藥細(xì)胞中的SNAI2發(fā)生靶向結(jié)合來提高腫瘤細(xì)胞對伊馬替尼的敏感性[44](表4)。

表4 MiRNAs參與分子靶向藥耐藥

隨著生物工程技術(shù)的不斷發(fā)展，已有科研工作者利用基因編輯技術(shù)將復(fù)制能力強(qiáng)的病毒改造成溶瘤病毒，各類溶瘤腺病毒可以促使膠質(zhì)瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡而對正常細(xì)胞毒性較低，具備很高特異性和選擇性。YAO等[49]為了提高溶瘤腺病毒的細(xì)胞毒性和特異性，將4種膠質(zhì)瘤抑制性miRNAs(miR-124、miR-128、miR-146b和miR-218)反應(yīng)元件(MRE)與溶瘤腺病毒進(jìn)行組合構(gòu)建了重組溶瘤腺病毒 (OA-4MREs)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證明，MRE可以通過靶向結(jié)合E1A來調(diào)控病毒的復(fù)制能力，并且與增殖性腺病毒比較，OA-4MREs對膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒作用。令人振奮的是，研究人員還發(fā)現(xiàn)OA-4MREs對正常組織和細(xì)胞均沒有明顯的細(xì)胞毒性，僅表現(xiàn)有限數(shù)量的病毒后代。因此，OA-4MREs具有很高的安全性，為進(jìn)一步測試臨床應(yīng)用提供了可能(表5)。

表5 MiRNAs參與免疫治療藥耐藥

2 展望

近年來，RNA-Seq技術(shù)迅速發(fā)展，由于其具有高通量、高準(zhǔn)確性和高靈敏度等特點(diǎn)，進(jìn)一步揭開了非編碼RNA與多種癌癥表觀遺傳之間的“神秘面紗”，為非編碼RNA研究走向臨床打開了大門。相關(guān)研究顯示，許多蛋白質(zhì)標(biāo)靶因?yàn)槿狈线m的蛋白結(jié)構(gòu)或轉(zhuǎn)錄因子，無法與藥物分子相互作用，所以不可成藥[50]。令人振奮的是，與廣泛應(yīng)用于膠質(zhì)瘤治療靶點(diǎn)的蛋白質(zhì)編碼基因比較，非編碼RNA賦有與生俱來的應(yīng)用潛質(zhì)，其分子片段占整個人類基因組約98%，可以為膠質(zhì)瘤化療提供充足的靶點(diǎn)選擇[4]。另外，幾乎所有用于膠質(zhì)瘤化療的傳統(tǒng)藥物都面臨耐藥性的挑戰(zhàn)，但是目前還未出現(xiàn)關(guān)于非編碼RNA藥物耐藥的報(bào)道。并且非編碼RNA藥物還可以添加一系列的化學(xué)修飾，使得其在體內(nèi)循環(huán)的半衰期比小分子或抗體藥物的半衰期更長。

綜上所述，miRNA在膠質(zhì)瘤化學(xué)抗性中起關(guān)鍵調(diào)控作用，通過使用miRNA拮抗劑或模擬物靶向糾正耐藥形成過程中內(nèi)源性miRNA的失調(diào)表達(dá)，可能是逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤化學(xué)耐藥一種有效的治療策略。作為最早開始研究的非編碼RNA，研究者已開發(fā)出多種基于miRNA的核酸工具，如anti-miR、antagomiR、sponge inhibitor、mimics、agomir和Pre-miR等，這些具有獨(dú)特序列的核酸工具，可以直接抑制或增強(qiáng)內(nèi)源性miRNA在腫瘤細(xì)胞中的作用，未來或許可以在此基礎(chǔ)進(jìn)一步發(fā)展精深疾病早期診斷工具、早期診斷策略及更有效的藥物治療方法。與此同時，針對miRNA各類核酸藥物的研究開發(fā)也從未停止過。MRX34是一種由脂質(zhì)體納米顆粒包裹的miR-34a mimic，其作為第一個進(jìn)入臨床試驗(yàn)的核酸單藥，在腎細(xì)胞癌、肢端黑色素瘤和肝細(xì)胞癌的治療過程中表現(xiàn)出令人滿意的臨床結(jié)果。但該研究因?yàn)榛颊叱霈F(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)而停止[51]。Cobomarsen是一種基于鎖核酸修飾的anti-miR-155，以患者體內(nèi)的致癌性miR-155為靶點(diǎn)來調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和分化。在一項(xiàng)針對淋巴瘤和白血病II期臨床試驗(yàn)中，患者對全身和瘤內(nèi)給藥的Cobomarsen均有著良好的耐受性。關(guān)于GBM治療，Regulus Therapeutics Inc公司研發(fā)了一種anti-miR-10b的新候選藥物RGLS5579，但是目前還處于臨床前階段[52]。

盡管miRNA治療前景廣闊，但要從眾多候選者中挑選關(guān)鍵目標(biāo)miRNA以及選擇適宜的遞送系統(tǒng)仍然是一個巨大的挑戰(zhàn)。一方面，由于miRNA可以同時靶向調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中多個功能基因，使得目的miRNA可對靶基因以外的其他基因發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致脫靶效應(yīng)，產(chǎn)生非特異性調(diào)控。因此，需要綜合考慮miRNA藥物在人體內(nèi)的整體反應(yīng)，按照嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)來挑選目的miRNA。另一方面，在維持治療性miRNA高效遞送效率的同時，還需要考慮載體本身對人體器官所帶來的傷害。病毒載體和陽離子納米顆粒是當(dāng)前miRNA治療中最常用的載體系統(tǒng)，它們不僅存在一定的毒性，還可以誘導(dǎo)免疫原性反應(yīng)。并且過量的陽離子成分還會使載體顆粒在腎小球基底膜處易于分解，從而導(dǎo)致miRNA的腎臟清除[53]。因此，開發(fā)出高效無毒的載體系統(tǒng)是膠質(zhì)瘤miRNA治療成功的關(guān)鍵。此外，隨著近年來液體活檢、分泌物檢查等臨床技術(shù)的發(fā)展，miRNA作為藥物敏感性早期篩選指標(biāo)是另一個具有潛力的研究方向。miRNA和化療藥物聯(lián)合用于膠質(zhì)瘤增敏治療似乎也很有前景，值得進(jìn)一步轉(zhuǎn)化研究和臨床試驗(yàn)。

本綜述重點(diǎn)闡述了miRNA在多種抗腫瘤藥耐藥中的功能和機(jī)制，并闡明miRNA介導(dǎo)的精確治療將是克服膠質(zhì)瘤化療耐藥一種理想的治療策略。總之，miRNA療法在臨床實(shí)踐中的全面應(yīng)用還有很長的路要走，亟需進(jìn)一步探索。同時，為了開發(fā)基于miRNA的藥物來改善膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后，也迫切需要進(jìn)行更多的科學(xué)研究和臨床試驗(yàn)。因此，miRNA療法將會是傳統(tǒng)療法的有效補(bǔ)充，有望在未來克服腫瘤細(xì)胞化療耐藥。