蛙心灌流實(shí)驗(yàn)流程的優(yōu)化及應(yīng)用

左 琳，李 圓，郭永強(qiáng)，孫 騰，曹濟(jì)民

(1山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系，細(xì)胞生理學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，太原 030001； 2山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)中心)

蛙心灌流實(shí)驗(yàn)是醫(yī)學(xué)生理學(xué)的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)之一，第一個(gè)神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的發(fā)現(xiàn)就是通過蛙心灌流實(shí)驗(yàn)來進(jìn)行驗(yàn)證的[1]。奧地利科學(xué)家奧托·勒維是該實(shí)驗(yàn)的操作者，他分別分離了兩只青蛙的心臟，一只保留了迷走神經(jīng)，而另一只去除了迷走神經(jīng)。當(dāng)刺激迷走神經(jīng)時(shí)，與之相連的心臟跳動(dòng)明顯減弱；將該心臟的“任氏液”灌流另一只切斷迷走神經(jīng)的青蛙心臟時(shí)，其跳動(dòng)也明顯受到抑制。這一結(jié)果提示：切斷迷走神經(jīng)的青蛙心臟受到的抑制效應(yīng)，應(yīng)該是來自灌流溶液中的某種化學(xué)物質(zhì)。奧托·勒維推測(cè)這種化學(xué)物質(zhì)可能是迷走神經(jīng)末梢釋放的。這個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)論支持了迷走神經(jīng)不是通過“電傳遞”，而是通過“化學(xué)傳遞”影響心臟功能的觀點(diǎn)。這一結(jié)論奠定了神經(jīng)興奮化學(xué)傳遞學(xué)說的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，奧托·勒維因此也獲得了1936年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。因此，該方法在生理學(xué)的發(fā)展史上有著里程碑的意義。

目前，許多醫(yī)學(xué)類高校的本科生培養(yǎng)中都采用了蛙心灌流實(shí)驗(yàn)，利用該實(shí)驗(yàn)可以觀察一些理化因素對(duì)于離體蛙心功能活動(dòng)的影響，在生理學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中有著不可替代的作用。但多年的一線教學(xué)讓我們發(fā)現(xiàn)，蛙心灌流實(shí)驗(yàn)的操作流程仍存在一些問題，有待于進(jìn)一步改進(jìn)：①學(xué)生在結(jié)扎入心的靜脈時(shí)，常因搞不清白線的位置而將靜脈竇誤扎，這一操作的直接后果將導(dǎo)致心跳驟停，實(shí)驗(yàn)宣告失敗。……