帶狀皰疹患者血清CX3CR1、CCR2表達與帶狀皰疹后遺神經痛的相關性

魏冉，盧懿，彭麗，石振峰，李素榮

帶狀皰疹(herpes zoster，HZ)是由水痘—帶狀皰疹病毒(varicella-zoster virus，VZV)感染所致，主要通過藥物治療，但治療后有5%～30%會并發HZ后遺神經痛(postherpetic neuralgia，PHN)[1]。PHN呈刀割樣、電擊樣長時間的持續性疼痛，對患者食欲、睡眠質量造成了嚴重的影響[2]。因此，尋找有效預測PHN的生物標志物是目前的重難點。研究顯示，趨化因子及其受體在神經病理性疼痛、炎性疼痛等慢性疼痛中有重要作用[3-4]。其中，CX3C趨化因子受體1(CX3C chemokine receptor 1，CX3CR1)屬于G蛋白偶聯受體超家族，其基因定位于3p21-3pter。CC趨化因子受體2(CC chemokine receptor 2，CCR2)通過與其高親和配體結合后引起靶細胞效應，參與機體的多種生理過程[5]。目前尚未見血清CX3CR1和CCR2水平與HZ患者并發PHN關系的報道。因此，現分析HZ患者血清CX3CR1、CCR2表達及與并發PHN的關系，為預測PHN的發生提供新的思路，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2020年7月—2022年2月在邢臺市人民醫院內分泌科和疼痛科就診的HZ患者93例作為研究對象(HZ組)，其中男44例，女49例，年齡23～77(50.39±9.94)歲。選擇同期醫院健康體檢者40例為健康對照組，男21例，女19例，年齡22～74(50.53±9.92)歲。HZ組和健康對照組性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)。治療后通過電話、微信或門診進行3個月隨訪，以患者是否出現PHN分為PHN亞組32例(出現PHN)和非PHN亞組(未出現PHN)61例。PHN亞組和非PHN亞組患者性別、發病部位、吸煙史、糖尿病、高血壓、家族史比例比較差異無統計學意義(P>0.05)，PHN亞組患者年齡≥50歲比例、病程、發熱比例、HZ分型出血型或壞疽型比例高于非PHN組，應用糖皮質激素治療比例低于非PHN組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。本研究經醫院倫理委員會審核批準(2020-LX-034)，受試者及家屬均知情同意并簽署知情同意書。

表1 非PHN亞組和PHN亞組臨床資料比較

1.2 病例選擇標準 (1)納入標準：①患者符合HZ的診斷標準[6]；②PHN亞組患者符合PHN的診斷標準[7]；③HZ患者發病時間≤7 d；④病例資料齊全者。(2)排除標準：①患有自身免疫疾病者；②妊娠期及哺乳期患者；③合并心、肝、腎等器官嚴重疾病。

1.3 觀測指標與方法

1.3.1 視覺模擬評分(VAS)[7]：采用VAS評分評估HZ患者的疼痛程度，評分范圍0～10分，分數越高代表疼痛程度越強。

1.3.2 血清CX3CR1、CCR2水平檢測：HZ患者入院后治療前、健康體檢者體檢當日采集空腹肘靜脈血5 ml，離心留取血清于新的EP管中，于-70℃低溫保存待測。利用酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測血清CX3CR1、CCR2水平，嚴格遵守試劑盒(均購自泉州市九邦生物科技有限公司)說明書操作，于酶標儀(型號Feyond-A700，購自北京龍躍生物科技發展有限公司)450 nm處讀取吸光值，并繪制標準曲線。

2 結 果

2.1 健康對照組和HZ組血清CX3CR1、CCR2水平比較 HZ組血清CX3CR1、CCR2水平均高于健康對照組(P<0.01)，見表2。

表2 健康對照組和HZ組血清CX3CR1、CCR2水平比較

2.2 PHN亞組與非PHN亞組VAS評分比較 PHN亞組VAS評分為(8.27±2.86)分，高于非PHN亞組的(5.66±1.34)分，差異有統計學意義(t=6.001，P<0.001)。

2.3 PHN亞組與非PHN亞組血清CX3CR1、CCR2水平比較 PHN亞組血清CX3CR1、CCR2水平均高于非PHN亞組(P<0.01)，見表3。

表3 PHN亞組與非PHN亞組血清CX3CR1、CCR2水平比較

2.4 HZ患者血清CX3CR1與CCR2的相關性分析 Pearson相關性分析結果顯示，HZ患者血清CX3CR1與CCR2呈正相關(r=0.442，P<0.001)。

2.5 血清CX3CR1、CCR2預測HZ患者發生PHN的臨床價值 繪制ROC曲線結果顯示，血清CX3CR1、CCR2及二者聯合預測HZ患者發生PHN的AUC分別為0.859、0.863、0.908，但二者聯合預測與血清CX3CR1、CCR2各自預測AUC比較差異無統計學意義(Z/P=1.117/0.264、0.974/0.330)，見表4、圖1。

表4 ROC曲線分析血清CX3CR1、CCR2預測HZ患者發生PHN的臨床價值

圖1 血清CX3CR1、CCR2預測HZ患者發生PHN的ROC曲線

2.6 多因素Logistic回歸分析HZ患者發生PHN的獨立危險因素 以年齡(≥50歲=1、<50歲=0)、病程(連續變量)、發熱(發熱=1、未發熱=0)、HZ分型(出血型或壞疽型=2、大皰型=1、頓挫型或普通型=0)、應用糖皮質激素治療(否=1，是=0)、VAS評分(連續變量)、CX3CR1(連續變量)、CCR2(連續變量)為自變量，以HZ患者是否發生PHN為因變量(發生=1，未發生=0)，經Logistic回歸分析顯示，VAS評分高及血清CX3CR1水平高、CCR2水平高均是影響HZ患者發生PHN的獨立危險因素(P<0.01)，見表5。

表5 多因素Logistic回歸分析HZ患者發生PHN的獨立危險因素

3 討 論

VZV具有嗜神經特性，可長期潛伏在人體中，當機體受到外界刺激后病毒會重新激活，從而感染造成HZ皮膚病[8]。臨床上主要表現為聚集性紅斑水泡，治療主要以抗病毒、營養神經為主，大部分患者經過治療會在1個月內痊愈，但也有一部分患者并不能得到完全有效的治療，繼而并發PHN。目前PHN的發病機制尚不清楚，但有研究認為與周圍神經炎性反應、中樞神經系統傳導異常有關[9]。臨床上PHN患者數月甚至常年伴有疼痛，身體健康和生活質量受到影響[10]。因此，探究PHN的危險因素，早期預測PHN的發生，并制定有效方案對該疾病的治療有重大意義。

趨化因子及其受體在調節神經可塑性、炎性反應等方面發揮著重要作用[11]。CX3CR1是趨化因子受體中一員，由1 065個核苷酸、355個氨基酸組成的功能蛋白，其主要在單核細胞、NK細胞和T細胞上表達[12-13]。CX3CR1配體是CX3C趨化因子家族唯一成員，CX3CR1可以通過脊髓中的神經元—神經膠質信號調節神經性疼痛中的神經炎性反應，直接參與免疫炎性反應和病理性疼痛發生發展[14]。臨床研究證實，牙周炎患者血清CX3CR1水平顯著高于健康人，且與牙周參數和炎性因子呈正相關，并發現CX3CR1可能通過調節炎性反應或牙周病的發病機制發揮作用[15]。本研究結果顯示，HZ患者血清CX3CR1水平高于健康者，且HZ后PHN患者血清CX3CR1水平高于非PHN患者，說明血清CX3CR1水平升高與HZ后PHN發生發展密切相關，可能是由于CX3CR1參與調控神經性炎性反應，隨著CX3CR1表達上調能夠激活炎性相關通路，導致更多炎性細胞因子分泌增加，加重神經炎性反應。本研究結果還顯示，CX3CR1水平高是HZ患者發生PHN的獨立危險因素，證實CX3CR1在HZ疾病向PHN病變過程中有重要作用，考慮CX3CR1水平越高HZ患者的神經炎性反應越嚴重，加重病情，導致預后不良，并發PHN，故臨床監測CX3CR1水平變化能夠診斷PHN。已有報道稱，單核細胞CX3CR1可能是潛在的對經皮冠狀動脈介入治療后支架內再狹窄的輔助診斷指標和遠期再狹窄的陰性預測指標[16]。本研究ROC曲線分析顯示，血清CX3CR1預測HZ患者發生PHN效能較好，表明其可作為HZ患者治療后發生PHN的預測標志物，但其敏感度較低，容易導致漏診，需要與其他指標聯合以提高診斷準確率。

CCR2作為一種參與單核細胞動員的趨化因子受體，在炎性細胞趨化過程中有重要作用，是具有7個跨膜結構的G蛋白偶聯受體，具有5種配體，包括CC趨化因子配體(CCL)2、CCL7、CCL8、CCL12、CCL13，其中CCL2是CCR2的最主要配體[17-18]。CCL2與急、慢性神經炎性反應密切相關，但CCL2生物學功能需要通過受體CCR2結合，二者相互作用，才能將免疫細胞遷移至損傷部位引發神經炎性反應[19]。動物實驗發現，治療后腦缺血再灌注損傷大鼠模型的神經炎性反應降低，其機制可能與腦組織CCR2及CCL2表達水平降低有關[20]。陳永昌等[21]研究指出，CX3CR1和CCR2通過對單核細胞進行介導作用而參與免疫反應及人類免疫缺陷病毒-1相關疾病的發生、發展。本研究結果顯示，HZ患者血清CCR2水平高于健康者，且PHN患者血清CCR2水平高于非PHN患者，提示血清CCR2參與HZ的發生發展，隨病情加重，CCR2水平升高，其通過與CCL2結合導致神經炎性反應加重，從而引發PHN，應對該指標異常的患者加強監測。本研究發現，血清CCR2水平高是HZ患者發生PHN的獨立危險因素之一，提示CCR2參與HZ后PHN發生發展過程，是PHN的潛在生物學標志物，檢測其血清水平變化能夠為臨床診斷提供參考。ROC曲線分析結果顯示，血清CCR2預測HZ患者發生PHN具有一定價值，表明血清CCR2可作為臨床上HZ患者發生PHN的潛在標志物。將CCR2與CX3CR1聯合檢測能夠提高AUC及敏感度，可準確反映HZ病情進展，為臨床HZ預后分析提供可靠支持。此外，本研究相關性分析結果顯示，HZ患者血清CX3CR1與CCR2呈正相關，表明血清CX3CR1與CCR2可能共同參與PHN發生過程。

綜上所述，血清CX3CR1、CCR2在HZ患者中異常升高，并對患者發生PHN有一定的預測價值。但是仍需要大量樣本來證實本研究結論。且CX3CR1、CCR2參與PHN的具體調控機制尚不清楚，仍需后續細胞實驗等證實，從而為探究PHN的發病機制和治療提供可靠的理論依據。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明

魏冉：設計研究方案，實施研究過程，論文撰寫；盧懿：提出研究思路，分析試驗數據，論文審核；彭麗：實施研究過程，資料搜集整理，論文修改；石振峰、李素榮：進行統計學分析，課題設計