靈芝乙醇提取物對(duì)宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)行為和JAK1/STAT3信號(hào)通路的影響

任 璐, 曹芹雪, 楊少琴

（河南大學(xué)淮河醫(yī)院婦產(chǎn)科, 河南 開封 475000）

宮頸癌是臨床常見的婦科生殖道惡性腫瘤之一, 多發(fā)生于子宮陰道部和宮頸管中[1］。我國(guó)宮頸癌發(fā)病率僅次于乳腺癌, 約占全球?qū)m頸癌的30%, 病死率也處于較高水平[2］。臨床中常聯(lián)合多項(xiàng)治療手段提高療效, 但治療過程中仍存在較多不良反應(yīng)[3］。考慮宮頸癌患者的發(fā)病年齡趨向年輕化, 亟需尋找新的更加安全有效的治療藥物。靈芝乙醇提取物（ganoderma lucidum ethanol extract, GLEE）是擔(dān)子菌綱多孔菌科靈芝屬靈芝的有效活性成分, 具有抗菌、抗病毒和廣泛的抗腫瘤活性, 在鼻咽癌、胰腺癌和胃癌等疾病中均有抑瘤作用[4-5］。研究[6-7］顯示：其抗腫瘤活性主要通過影響細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等途徑發(fā)揮作用, 但其對(duì)宮頸癌的抑瘤作用途徑尚不清楚。本研究檢測(cè)不同濃度GLEE對(duì)宮頸癌HeLa 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響, 探討其可能作用機(jī)制, 為臨床治療宮頸癌提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞、主要試劑和儀器人宮頸癌HeLa 細(xì)胞（中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所）。GLEE（純度70%, 成都榮保生物科技開發(fā)有限公司）, 兔抗β-actin 多 克 隆 抗 體、 兔 抗Janus 激 酶1 （Janus kinase 1, JAK1）、 磷 酸 化JAK1 （phophorylated JAK1, p-JAK1） 信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transduction and transcription activator 3, STAT3）、磷酸化STAT3（phophorylated STAT3, p-STAT3）、細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白3（suppressor of cytokine signaling 3, SOCS3）、活化STAT 蛋 白 抑 制 因 子 1 （protein inhibitor of activated STAT1, PIAS1） 多克隆抗體和山羊抗兔二抗IgG （北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）, RPMI-1640 細(xì)胞培養(yǎng)基、胎牛血清、胰蛋白酶（美國(guó)Hyclone 公司）, 1% 青-鏈霉素混合液（貨號(hào)：ZY90307, 上海澤葉生物科技有限公司）。Bio-Tek Elx800 型全自動(dòng)酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio-Tek 公司）, CFX Connect 型實(shí)時(shí)熒光定量PCR （real-time fluorescence quantitative PCR, RT-qPCR） 儀（美國(guó)Bio-Rad 公司）。……