口蹄疫免疫抗體檢測及分析

米日古力·依布拉音

（喇嘛昭鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)（畜牧業(yè)）發(fā)展服務(wù)中心，新疆塔城 834600）

0 引言

雖然我國是一個(gè)農(nóng)業(yè)大國，但是由于我國的人口優(yōu)勢，我國對(duì)于肉制品以及肉類產(chǎn)品的需求量很大，這為很多家禽家畜業(yè)的發(fā)展提供了契機(jī)。但是家禽家畜業(yè)的發(fā)展也面臨著有些威脅，譬如口蹄疫[1]。口蹄疫因?yàn)樗膫魅舅俣戎臁l(fā)病率之多、死亡率之高而被列為一類傳染病。這種疾病不僅在我國不被忽視，而且在世界范圍內(nèi)也得到了相對(duì)程度上的重視。世界衛(wèi)生組織將口蹄疫命名為烈性傳染病之一。

1 基本材料

1.1 病理危害

口蹄疫是一種發(fā)病率非常高的疾病，雖然口蹄疫的死亡率并不是特別高，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，口蹄疫的死亡率不超過3%，但是會(huì)嚴(yán)重影響動(dòng)物的生長，尤其是在一些規(guī)模化的養(yǎng)殖場中，如果有一頭豬得了口蹄疫，那么很快就會(huì)傳染給其他豬[2]。被感染的豬剛開始會(huì)長出一些比較小的白色水泡，并不容易被發(fā)現(xiàn)，直到口蹄疫感染的后期，會(huì)出現(xiàn)豬蹄腐爛，很容易被誤解為是皮膚疾病，容易導(dǎo)致誤診，誤診可能會(huì)影響最佳救治時(shí)間。口蹄疫的痊愈期一般為三周左右，會(huì)嚴(yán)重影響豬的出欄時(shí)間，從而影響?zhàn)B殖場的經(jīng)濟(jì)收益。

1.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

我國食用肉產(chǎn)品以及加工的肉類產(chǎn)品的主要來源是豬肉，而口蹄疫也主要發(fā)生在豬的身上，口蹄疫的發(fā)病率非常高，而且周期短。從發(fā)病到死亡之間的時(shí)間非常短。這種來勢洶洶而且死亡率非常之高的病毒已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織列為最危險(xiǎn)的傳染病之一。口蹄疫的發(fā)生給畜牧業(yè)的經(jīng)濟(jì)帶來巨大的損失，而且口蹄疫一旦在一頭豬身上發(fā)生，很快便可以席卷整個(gè)養(yǎng)豬場，豬的大量死亡會(huì)造成肉價(jià)飛漲，不利于社會(huì)穩(wěn)定和人民生活水平的提高[3]。因此為了預(yù)防和治療這種疾病，自從2017年開始，我國的很多地區(qū)便開始對(duì)口蹄疫進(jìn)行針對(duì)性的檢測和相應(yīng)的疫苗的研發(fā)。

2017年的上半年，我國把對(duì)口蹄疫的檢測提上了日程。我國的衛(wèi)生組織把口蹄疫的檢測點(diǎn)設(shè)立在我國的河北地區(qū)。因?yàn)楹颖钡貐^(qū)是一個(gè)相對(duì)重要的豬肉產(chǎn)品加工和檢測地區(qū)，尤其是在河北省的張家口市，養(yǎng)豬已經(jīng)形成了一定的規(guī)模和專業(yè)化的生產(chǎn)方向。因此我國政府對(duì)于該省該市的口蹄疫檢測和防疫具有很高的重視度。

1.3 實(shí)驗(yàn)途徑

針對(duì)豬身上發(fā)生的口蹄疫傳染病，我國大部分地區(qū)所認(rèn)定的相對(duì)權(quán)威的實(shí)驗(yàn)試劑是產(chǎn)自蘭州生物藥廠的O型合成肽疫苗。這種疫苗已經(jīng)得到了國家相關(guān)部門以及醫(yī)學(xué)上的認(rèn)可，是一種具有很高的權(quán)威性以及在當(dāng)前市場上流通度很高的一種藥劑。除了這種藥劑之外，還有另外一種配合使用的疫苗是產(chǎn)自洛陽萊普生信息科技的一種藥劑。只有這兩種藥劑產(chǎn)品比對(duì)使用，才能達(dá)到比較好的抑制和免疫效果。但是在對(duì)這兩種藥劑的比對(duì)使用的過程中，對(duì)于兩種藥劑的使用比例和使用方法仍然有待考證和進(jìn)行進(jìn)一步的精確化的分析。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 血清采樣

把要作為實(shí)驗(yàn)樣本進(jìn)行分析的豬進(jìn)行血清采樣，并對(duì)其血清進(jìn)行離心分離，從而分離出血清中所含有的病毒樣本。因?yàn)槿绻梢噪x心出病毒樣本，那么可以了解到病毒的分子結(jié)構(gòu)，更好的提出相對(duì)性的措施來抑制病毒，除此之外，相對(duì)于直接在豬的身上進(jìn)行疫苗測試的方法，通過血清樣本來測試的方法不僅節(jié)約資源，而且比較容易實(shí)施，受自然的干擾比較小，分析的結(jié)果具有更高的科學(xué)性和精準(zhǔn)度，有利于提出更具有針對(duì)性的措施。因此對(duì)豬的血清進(jìn)行采樣來進(jìn)行對(duì)免疫抗體的檢測對(duì)口蹄疫的檢測及免疫具有主要價(jià)值和意義[4]。

2.2 檢測結(jié)果分析

實(shí)驗(yàn)通過對(duì)七種不同血清的提取，在進(jìn)行一系列的實(shí)驗(yàn)之后，通過對(duì)科學(xué)顯微鏡一下抗原所表現(xiàn)出不同狀態(tài)的觀察分析可得，不同的血型受口蹄疫病毒的影響不同，有的血型瘦口蹄疫病毒的影響比較小，但相對(duì)的這種血型受抗原的影響也比較少，有的血型受口蹄疫病毒影響比較大，很容易被這種病毒所感染，但是受抗原的影響也比較大。通過對(duì)多種血型受口蹄疫病毒的影響及受抗原影響的比較，分析之后發(fā)現(xiàn)，最容易受到口蹄疫病毒感染的是O型血。O型血，因?yàn)檠偷奶厥庑裕驗(yàn)镺型血和A型血或者是B型血都可以相容，它的相容性是比較強(qiáng)的，因此，當(dāng)O型血受到病毒干擾之后，會(huì)和病毒相結(jié)合，變異，從而產(chǎn)生新的毒株，這為戰(zhàn)勝病毒，研發(fā)出新的抗原帶來了巨大的挑戰(zhàn)。

O型血在和口蹄疫的病毒結(jié)合之后，產(chǎn)生了新的毒株，由于這種新的毒株是基于原始口蹄疫病毒而分化而來，因此這種新的毒株被命名為泛亞株，這種毒株的抗原研發(fā)比傳統(tǒng)的口蹄疫病毒的抗原研發(fā)更困難，而且這種新的毒株更難從血清中提取出來，它的分子結(jié)構(gòu)也更難離析。這種毒株的傳播速度和發(fā)病率比傳統(tǒng)的口蹄疫病毒更高，也更難控制。

2.3 對(duì)口蹄疫病毒病理綜述

口蹄疫病毒的原理歸屬上屬于小RNA病毒，它的類潛伏期很長，而且不容易被發(fā)現(xiàn)，口蹄疫病毒的患病初期表象與其他病理病癥在表象上具有交叉之處，到目前為止，口蹄疫病毒已經(jīng)發(fā)展、衍化出七十多種病毒類型，而且這種病毒的生命力頑強(qiáng)，對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)力很強(qiáng)，很容易與不同的血清類型結(jié)合，從而衍生出新的病毒類型。據(jù)研究表示，口蹄疫病毒的結(jié)構(gòu)主要是5UTR、3UTR和ORF，在這三個(gè)主要結(jié)構(gòu)中又含有其他的小分支，在ORF結(jié)構(gòu)中含有與VP1一樣的解構(gòu)，不僅如此，還含有VP2、VP3等與VP1結(jié)構(gòu)不一樣的結(jié)構(gòu)基因，除此之外，這三個(gè)結(jié)構(gòu)的起始密碼號(hào)以及終止密碼子都各不相同。病毒的主要抗原點(diǎn)是VP1。口蹄疫病毒在外形上與人體白細(xì)胞有相似之處，都是圓形，而且口蹄疫病毒的主要組成部分也是蛋白質(zhì)，其蛋白質(zhì)含量高達(dá)70%，剩余的30%則是病毒的RNA單鏈。

當(dāng)動(dòng)物感染口蹄疫病毒之后，最初表現(xiàn)是會(huì)在皮膚上長出一些白色的小泡，損傷皮膚，使皮膚腐爛，隨之逐漸的損傷呼吸道和消化道的粘膜，然后病毒逐漸深入到血液中，伴隨著血液的流通，導(dǎo)致造成心肌出血和內(nèi)臟出血，最終造成心肌病變，臨床醫(yī)學(xué)表明，口蹄疫病毒造成的心肌病變后的心臟橫切面上有淡黃色斑點(diǎn)。

3 對(duì)口蹄疫的抗體檢測及分析

3.1 對(duì)于人工異變化毒株的培養(yǎng)

針對(duì)口蹄疫的抗體研發(fā)，弱毒疫苗的研發(fā)在很長一段時(shí)間內(nèi)被視為羅馬福音一樣的存在。弱毒疫苗是人工培植的一種抗體，其研發(fā)原理是，提取口蹄疫病毒的毒株，經(jīng)過人工培植之后，對(duì)其進(jìn)行“鼠化”處理，促使其原本的分子結(jié)構(gòu)異變，異變后的口蹄疫分子結(jié)構(gòu)對(duì)原始的口蹄疫病毒能夠形成一定程度的抑制作用，但是被人工異變后的口蹄疫病毒毒株仍然帶有原始毒株的分子結(jié)構(gòu)特性，很容易形成“易返”效果，即：人工異變后的口蹄疫病毒恢復(fù)其原始結(jié)構(gòu)。這種方法的成本和造價(jià)比較低，但是使用這種方法具有一定的局限性，首先是對(duì)于病毒的醫(yī)療效果不夠突出，盡管給動(dòng)物注射完這種疫苗之后，可能會(huì)在短期內(nèi)獲得一定的收效，但是受到病毒的影響可能會(huì)反彈；其次是這種抗原的制作方法會(huì)受到運(yùn)輸?shù)纫蛩氐挠绊懀焕谕茝V和普及；最后是給被口蹄疫病毒感染后的動(dòng)物注射完這種疫苗之后，可能會(huì)使被注射弱毒疫苗的動(dòng)物產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)，造成更嚴(yán)重的后果。

3.2 滅活疫苗

除了弱毒疫苗之外，還有另外一種疫苗的研發(fā)在很大程度上彌補(bǔ)了弱毒疫苗的缺陷和不足。滅活疫苗是上世紀(jì)20年代歐洲研發(fā)的，這種疫苗在弱毒疫苗功能的基礎(chǔ)上，添加了抗氧化鋁制劑，這使得滅活疫苗的功能比弱毒疫苗的功能更穩(wěn)定，功效也更為突出。對(duì)口蹄疫病毒具有針對(duì)性的抑制和消滅作用的一種抗原[5]。這種抗原在給感染口蹄疫病毒的動(dòng)物注射之后，并不會(huì)產(chǎn)生反彈效果，而且對(duì)于口蹄疫病毒的抑制作用具有明顯的功效，這種疫苗是我國目前使用最廣泛的抵抗口蹄疫病毒的疫苗。

3.3 基因重組疫苗

基因重組疫苗所采用的基因重組技術(shù)與弱毒疫苗研發(fā)的技術(shù)具有相似之處，都是在血清中提取病毒毒株，然后通過基因改組技術(shù)對(duì)疫苗的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行改組。但是基因重組疫苗與弱毒疫苗直接仍然有不同之處，前者的技術(shù)研發(fā)來源是來自于在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)的口蹄疫病毒毒株，由于毒株的70%是由蛋白質(zhì)構(gòu)成，通過使用蛋白質(zhì)對(duì)毒株進(jìn)行誘導(dǎo)，從而刺激被感染的動(dòng)物在體內(nèi)產(chǎn)生抗體，然后使用蛋白分離技術(shù)，在動(dòng)物體內(nèi)提取出亞單位疫苗，然后對(duì)被感染的動(dòng)物進(jìn)行注射，以此達(dá)到對(duì)口蹄疫病毒的抑制作用。這種對(duì)動(dòng)物進(jìn)行間接接種疫苗的方法，使動(dòng)物自身產(chǎn)生抗體，這種方法的發(fā)現(xiàn)，是我國當(dāng)前基因技術(shù)工程的一個(gè)重大突破。

3.4 接種口蹄疫免疫抗體的注意事項(xiàng)

對(duì)于口蹄疫免疫抗體的接種，首先應(yīng)該注意的是在接種時(shí)要嚴(yán)格按照疫苗生產(chǎn)廠家所規(guī)定的要求進(jìn)行接種，要注意感染口蹄疫病毒的動(dòng)物的感染時(shí)間，發(fā)病的具體情況，以及被感染的動(dòng)物的年齡，根據(jù)具體的情況具體分析應(yīng)該接種疫苗的量。

在對(duì)動(dòng)物進(jìn)行疫苗接種時(shí)，工作人員要保持嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度，對(duì)疫苗的接種過程要嚴(yán)格遵守規(guī)定。對(duì)于接種環(huán)境也具有嚴(yán)格的要求，在進(jìn)行接種時(shí)，要確保接種的針頭清潔干凈，接種的環(huán)境合適。對(duì)動(dòng)物進(jìn)行接種，多半是進(jìn)行肌肉注射的方式，在接種時(shí)要注意注射的位置正確。

4 結(jié)語

口蹄疫是一種傳染性非常強(qiáng)的病毒，而且口蹄疫在最初感染時(shí)不容易被察覺，這一點(diǎn)給口蹄疫的傳播提供了契機(jī)。一段口蹄疫病毒爆發(fā)，那么將會(huì)給動(dòng)物生存密集的地方，譬如養(yǎng)殖場帶來巨大不利影響，而且口蹄疫會(huì)通過空氣等方式進(jìn)行傳播，很可能會(huì)傳播給人類，給人類的生存生活帶來不必要的災(zāi)難。因此，口蹄疫的預(yù)防工作，對(duì)于畜牧業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)都是是一項(xiàng)重要的工作。