胸腔積液的細胞學檢查進展

蘇梅芬

欽州市第二人民醫院 廣西 欽州 535000

胸腔積液是臨床相關疾病常見癥狀，如炎癥性疾病、結締組織病、良、惡性腫瘤等，主要指以胸膜腔內病理性液積聚為特征的一種常見臨床癥候，臨床癥狀主要表現為胸悶、呼吸困難等，臨床按照其發生機制可分為漏出性胸腔積液及滲出性胸腔積液[1]。正常人的胸膜內會含有3～15ml液體，主要在呼吸時起到潤滑作用，液體的濾出與吸收之間呈現動態平衡，患病后可使液體濾出與吸收失衡，病理性液體量增加，最終形成胸腔積液[2]。分析臨床研究報道發現[3]，目前臨床的胸腔積液患者中約有20%由腫瘤發展造成。而隨著近幾年來多種惡性腫瘤及結核性疾病發病率的增加，胸腔積液在疾病診斷、鑒別及疾病治療、預后等多方面具有重要診斷價值，而臨床可應用于胸腔積液檢查中的方式較為廣泛，主要包含了細胞學、生化學及分子生物學等，其中臨床認為細胞學為胸腔積液的診斷金標準，包括蘇木精-伊紅染色法、沉渣涂片細胞化學染色、熒光染色、核仁組成區嗜銀蛋白染色等染色方法。本文現針對胸腔積液的細胞學檢查進展進行分析，主要綜述內容如下。

1．胸腔積液的發生機制

胸膜腔是指由臟、壁兩層胸膜在左右兩肺周圍圍成的一個完全封閉的潛在性腔隙，腔內含有少量漿液，正常含量為3～15ml，主要在呼吸運動時起到潤滑作用，正常人每24h可形成及吸收約500～1000ml的液體，胸膜腔內液體自毛細血管的靜脈端再吸收，其余液體自淋巴系統回收至血液，液體的濾過及吸收處于動態平衡狀態，此時若機產生全身或局部病變，病理變化可破壞液體濾過及吸收之間的動態平衡狀態，從而使胸膜腔內液體出現形成過快或吸收過緩，最終形成胸腔積液[4]。

2．細胞學檢查的概述及原理

細胞學檢查是臨床應用較為廣泛的一種檢查方式，具有取材方便、創傷小、操作快捷的優點，是目前臨床檢測胸腔積液腫瘤細胞分析方法的首要選擇，通過收集脫落的細胞，將細胞經離心收集沉淀后制片等一系列操作后，在顯微鏡下觀察細胞形態，從而進行疾病的診斷工作[5]。當患者胸腔內器官和胸膜發生炎癥、腫瘤等病理變化時，胸膜腔液的分泌增多形成胸腔積液，同時胸膜間皮細胞大量脫落，當腫瘤穿破臟器表面間皮直接暴露在胸膜腔內后，惡性腫瘤細胞可脫水落在胸腔積液中，因此通過采用細胞學檢查對胸腔積液進行分析可獲得特異性結果。臨床研究表明[6]，胸腔積液細胞學檢查的靈敏度在40%～87%之間。

3．細胞學檢查不同染色方式的應用效果

3.1 蘇木精-伊紅染色法

蘇木精-伊紅染色法主要用于對細胞組織進行染色，簡稱HE染色，其檢驗原理為細胞中的細胞核主要組成成分為酸性物質，與堿性染料如蘇木精之間具有較強的親和力，而細胞漿則與細胞核相反，細胞漿中所含的堿性物質與酸性染料如伊紅之間具有較強親和力，因此細胞或組織切片經蘇木精-伊紅染色液染色后，可通過觀察細胞核和細胞質的染色變化和細微結構來分析是否可能為瘤細胞[7]。臨床研究表明[8]，采用蘇木精-伊紅染色法瘤細胞檢出率為39%。目前臨床學者針對蘇木精-伊紅染色液在惡性細胞檢出中的應用方式不斷進行研究，使瘤細胞檢出率不斷增長。臨床學者采用腦脊液細胞玻片離心沉淀器收集器對患者胸腔積液內細胞進行收集[9]，結果顯示細胞收集率高達80%，檢出率可高達93%。同時另一位學者將積液送檢量增加至250ml，取新鮮下層積液離心涂片染色，可使瘤細胞首次檢出率提高至83%，而三次以上檢出率可高達100%[10]。

3.2 沉渣涂片細胞化學染色

沉渣涂片細胞化學染色是基于細胞學及化學相結合的一種檢查方法，以細胞形態學為基礎，運用化學的原理對胸腔積液內的細胞進行定性、定位及半定量分析，常見方法包括過氧化物酶染色、蘇丹黑B染色、糖原染色、堿性磷酸酶染色、特異性脂酶染色、非特異性脂酶染色及酸性磷酸酶染色等[11]。采用沉渣涂片細胞化學染色法進行胸腔積液檢查時，若積液存在惡性瘤細胞，檢查結果可顯示為過氧化物酶染色及蘇丹黑B染色結果為陰性，而糖原染色、堿性磷酸酶染色、特異性脂酶染色、非特異性脂酶染色及酸性磷酸酶染色等結果為陽性[12]。

3.3 熒光染色

熒光染色是臨床較為常見的一種抗酸染色方法，以熒光染料為初染液，鹽酸乙醇為脫色劑，高錳酸鉀為復染液，染色后采用熒光顯微鏡進行觀察，若細胞漿及核仁內含有大量的RNA，染色后細胞顏色為桔紅或火焰色熒光，若細胞核中含有大量的DNA則為黃綠色熒光[13]。臨床研究報道顯示[14]，采用熒光染色進行檢查惡性胸腔積液，陽性率為78%，假陽性率為14%。

3.4 核仁組成區嗜銀蛋白染色

核仁組成區是染色體上的一個編碼核糖體RNA片段，存在于DNA特異性環上，圖像核仁，而核仁組成區嗜銀蛋白染色法可確定組織切片上的核仁組成區，顯示與核仁組成區有關的酸性蛋白，具有操作簡便、批量染色的優點[15]。臨床學者采用核仁組成區嗜銀蛋白染色法進行良惡性胸腔積液鑒別[16]，結果顯示，良性胸腔積液中淋巴細胞、間皮細胞及非典型增生間皮細胞中的銀染色NOR相關蛋白核顆粒小于1.98個，其中87%為規則小圓形；惡性胸腔積液中瘤細胞銀染色NOR相關蛋白核顆粒大于4.98個，其中82%為不規則及彌散分布型顆粒。另一學者經過研究發現[17]，在惡性胸腔積液檢查中，采用核仁組成區嗜銀染色診斷敏感性為75%，特異性為87%。

4．細胞學在胸腔積液檢查中的優缺點

優點：①細胞學能夠根據細胞大小、形態，細胞核大小、形態、核染色質及細胞漿內所含內容物，細胞排列形式等特點進行診斷，因此在胸腔積液檢查中應用細胞學進行診斷可有效提高臨床診斷準確率，對良惡性腫瘤鑒別具有重要價值。②具有操作簡單、患者接受度高、安全無創或微創、可重復進行檢查的優點。③由于操作簡單，因此便于臨床進行大規模人口健康篩查，同時具有較為廣泛的取材范圍，因此在早期腫瘤診斷中具有較高的準確率。缺點：①取材較少可導致一定程度的假陰性；②對組織學結構觀察不滿意，無法準確對腫瘤進行分類與分型；③無法準確的判定腫瘤的原發病灶和浸潤情況[18]。

5．小結

細胞學檢查是臨床公認的胸腔積液診斷金標準，通過對胸腔積液內惡性細胞進行檢查，從而進行相關疾病的診斷及鑒別，并在疾病的治療及預后方面具有重要價值。目前臨床常見的染色方法包括蘇木精-伊紅染色法、沉渣涂片細胞化學染色、熒光染色、核仁組成區嗜銀蛋白染色等，在胸腔積液的細胞學檢查中均具有較高價值。同時隨著醫療技術的不斷進步，臨床學者也針對上述染色方法不斷進行完善及優化，因此，細胞學檢查在胸腔積液中具有良好的應用價值，且隨著醫療技術不斷發展，其染色方式逐漸多樣化，診斷準確率也不斷提高。