動物病原微生物實驗室生物安全管理探討

范亞楠 王維 陳靜 周迎春 鄭舉 王立

（安徽省動物疫病預(yù)防與控制中心，安徽合肥 230091）

動物病原微生物實驗室包括畜牧獸醫(yī)系統(tǒng)、高等院校、科研院所、海關(guān)、林草、獸用生物制品生產(chǎn)企業(yè)、大型養(yǎng)殖企業(yè)、動物診療機(jī)構(gòu)等單位相關(guān)實驗室。其實驗活動涉及動物病原微生物科學(xué)研究、動物疫病檢測與監(jiān)測、疫苗研發(fā)、疫病診斷等。動物病原微生物實驗室及其實驗活動的生物安全監(jiān)督工作由國務(wù)院獸醫(yī)主管部門主管，其生物安全管理的關(guān)鍵是做好病原微生物控制，從而避免實驗室獲得性感染及環(huán)境污染。

2003 年SARS 病毒實驗室外泄致人感染事件及2011 年東北農(nóng)業(yè)大學(xué)在解剖學(xué)實驗課上剖殺未檢疫羊?qū)е?8 名師生感染布魯氏菌事件等生物安全事故的發(fā)生，足以表明加強(qiáng)動物病原微生物實驗室生物安全管理，對動物疫病防控及人畜共患病防控至關(guān)重要[1]。2021 年9 月，中共中央政治局就我國生物安全建設(shè)進(jìn)行第三十三次集體學(xué)習(xí)，習(xí)近平總書記強(qiáng)調(diào)要加強(qiáng)生物安全風(fēng)險防控，提高國家生物安全治理體系和治理能力，在政治層面上提高了對生物安全的重視。此外，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部高度重視動物病原微生物實驗室生物安全管理，自2016 年起開始組織開展全國動物病原微生物實驗室生物安全專項檢查。法律制度層面，2021 年《中華人民共和國生物安全法》 及《中華人民共和國動物防疫法》 的實施修訂，從法律法規(guī)上提高了對動物病原微生物管理的重視。國家全方位重視病原微生物實驗室生物安全，在動物病原微生物實驗室生物安全管理中善于發(fā)現(xiàn)問題，細(xì)化各項管理措施，落實各項管理制度，提升相關(guān)人員生物安全政治意識和法律意識，可以有效防范化解實驗室生物安全風(fēng)險。

1 目前動物病原微生物實驗室生物安全管理存在的問題

我國生物安全實驗室建設(shè)起步較晚，20 世紀(jì)中國生物安全實驗室沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，生物安全實驗活動也沒有統(tǒng)一的管理。自2004 年發(fā)布國家生物安全實驗室建設(shè)規(guī)劃，2008 年發(fā)布并施行《動物病原微生物實驗活動生物安全要求細(xì)則》，動物病原微生物安全實驗室建設(shè)穩(wěn)步推進(jìn)，但仍存在些許問題[2-4]。在生物安全管理制度體系方面：生物安全管理體系不完善，更新不及時，對一些新標(biāo)準(zhǔn)、新規(guī)范、新要求未及時納入生物安全管理體系文件中，管理制度不能覆蓋實驗室各方面和環(huán)節(jié)，有的實驗室沒有制定生物安全應(yīng)急預(yù)案等。生物安全警示標(biāo)識不完整、不規(guī)范，缺少儀器設(shè)備定期檢測與維護(hù)記錄等。在生物安全活動管理和從業(yè)人員管理方面：存在新錄用人員培訓(xùn)不足，實驗室生物安全意識不足，實驗技術(shù)人員對相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、操作規(guī)范不夠熟悉，缺乏定期培訓(xùn)，生物安全應(yīng)急演練不足等。實驗室廢棄物處理不規(guī)范，記錄不完整等。多種問題的存在對我國動物病原微生物實驗室生物安全管理提出更大的挑戰(zhàn)，需要更加細(xì)致規(guī)范的管理要求。

2 健全動物病原微生物實驗室管理制度

2.1 確立實驗室生物安全管理責(zé)任制

實驗室應(yīng)建立層級管理責(zé)任制，做到任務(wù)清、責(zé)任明。明確實驗室生物安全管理第一責(zé)任人，對實驗室生物安全負(fù)主要責(zé)任。各個崗位應(yīng)配有生物安全管理負(fù)責(zé)人，統(tǒng)籌制定實驗室生物安全管理制度，做好日常實驗儀器設(shè)備檢查維護(hù)及實驗活動安全監(jiān)督。定期安排實驗室生物安全自查，發(fā)現(xiàn)或發(fā)生任何異常情況，立即通知生物安全負(fù)責(zé)人，采取有效的應(yīng)急措施。

2.2 實驗室安全準(zhǔn)入

在動物病原微生物實驗室開展的實驗，除面臨常規(guī)的實驗室危險因素外，還要面對看不見、摸不著的生物安全風(fēng)險，更要強(qiáng)化實驗室安全準(zhǔn)入制度的執(zhí)行，將有關(guān)要求落地、落實、落細(xì)，確保動物病原微生物實驗室生物安全[5]。動物病原微生物實驗室為生物安全嚴(yán)格控制區(qū)域，實驗室應(yīng)設(shè)有門禁系統(tǒng)，嚴(yán)禁外來人員、動物進(jìn)入，實驗室工作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守實驗室進(jìn)出程序，必須配備個體防護(hù)用品（防護(hù)帽、護(hù)目鏡、口罩、工作服、手套等）。高等級動物病原微生物實驗室嚴(yán)格控制進(jìn)入實驗室人員數(shù)量，嚴(yán)禁將門禁密碼透露給他人。在實驗室內(nèi)檢測時不應(yīng)受到無關(guān)人員打擾。

2.3 做好儀器設(shè)備和生物材料保存管理

實驗室儀器設(shè)備、容器、耗材、試劑等應(yīng)粘貼有相應(yīng)的生物安全標(biāo)識，實驗室應(yīng)具備專用和有警示標(biāo)識的危險廢棄物容器，有存放針頭等尖銳廢棄物的利器盒。實驗室儀器設(shè)備應(yīng)粘貼操作步驟，如在運行中出現(xiàn)異常狀況，應(yīng)立即停止使用，并及時向儀器設(shè)備保管員匯報，盡快聯(lián)系維修。實驗儀器設(shè)備應(yīng)做好用后消毒及使用登記，定期做好儀器設(shè)備檢查維護(hù)。

動物樣本中攜帶的病原微生物具有生物安全風(fēng)險，動物病原微生物相關(guān)材料的管理和儲存至關(guān)重要，其存放容器或包裝材料應(yīng)具備密封性、防水性、耐磨損、耐高(低) 溫、耐高壓等特點。實驗室應(yīng)具備相應(yīng)的檔案記錄本或者登記系統(tǒng)，并由專人負(fù)責(zé)，做好樣本接收、登記和存放，實驗室應(yīng)具備低溫、冷凍樣品儲存設(shè)備，定期對存儲的菌（毒）種和樣本進(jìn)行整理和檢查，確保存儲安全。

2.4 做好個人防護(hù)

動物病原微生物實驗室人員防護(hù)要根據(jù)生物安全級別進(jìn)行，穿著相應(yīng)工作服、佩戴合適的手套、口罩等，危險級別高的佩戴相應(yīng)的護(hù)目鏡和面罩等。選擇和使用合適的個人防護(hù)設(shè)備是避免動物病原微生物感染的關(guān)鍵。手套摘除前要先消毒，工作結(jié)束后要洗手，嚴(yán)禁將工作服帶出實驗區(qū)，在實驗工作區(qū)禁止飲食、吸煙、化妝、處理隱形眼鏡等。

2.5 做好實驗室風(fēng)險評估

風(fēng)險評估是評估風(fēng)險大小及風(fēng)險是否可以接受的全過程，包括風(fēng)險識別、風(fēng)險分析和風(fēng)險控制[6]。動物病原微生物實驗室需要對實驗室所有的實驗活動進(jìn)行風(fēng)險識別和分析評估，盡可能全面地找出影響實驗室安全目標(biāo)實現(xiàn)的因素，評估影響因素的危害范圍、原因及后果，從而更好地確保實驗過程的生物安全。動物病原微生物實驗室生物安全風(fēng)險來源大致分為實驗操作程序（操作步驟中潛在的暴露風(fēng)險）、生物因子（實驗活動中生物材料的危險級別、感染途徑、傳播模式、穩(wěn)定性及預(yù)防控制措施等）、防護(hù)屏障（實驗室設(shè)施結(jié)構(gòu)屏障、防護(hù)設(shè)備、人員防護(hù)裝備等）、人員管理（實驗室生物安全意識、實驗技能等）、運輸管理（樣品的接送與包裝儲存）、信息管理（樣品保存、實驗研究數(shù)據(jù)安全等）等。風(fēng)險評估的基本流程包括明確情況、明確風(fēng)險、描述風(fēng)險、評估風(fēng)險、規(guī)避風(fēng)險5 個步驟，即明確實驗活動內(nèi)容及實驗室工作中哪些地方可能出現(xiàn)風(fēng)險，描述風(fēng)險發(fā)生的可能性和可能引發(fā)的后果，進(jìn)行生物安全評估，確定風(fēng)險是否可以接受，對不可接受的風(fēng)險實施風(fēng)險緩解措施，以盡可能確保所有實驗風(fēng)險可以接受[6-7]。

2.6 制定動物病原微生物實驗室應(yīng)急預(yù)案

動物病原微生物實驗室應(yīng)急預(yù)案的編制應(yīng)堅持預(yù)防為主，并具備科學(xué)合理性、針對性和時效性，每年定時開展應(yīng)急預(yù)警演練。日常實驗工作中要對各種可能發(fā)生的實驗室生物安全事件進(jìn)行風(fēng)險分析，對容易發(fā)生和可以預(yù)測的實驗室生物安全風(fēng)險點進(jìn)行預(yù)警，并制定針對性科學(xué)可行的解決方案，加強(qiáng)日常應(yīng)急準(zhǔn)備，做好應(yīng)急預(yù)警演練。預(yù)警信息包括實驗室生物安全風(fēng)險點的類別、預(yù)警級別、警示事項、可能發(fā)生時間、影響范圍、可行的應(yīng)對措施等。發(fā)生病原微生物感染、污染等事件時，應(yīng)及時采取封鎖隔離、流調(diào)分析、消毒滅源、觀察治療等控制措施。

3 加強(qiáng)實驗活動管理

3.1 規(guī)范實驗操作

實驗工作應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)規(guī)章制度和標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，避免操作過程中造成污染，并做好實驗記錄和實驗材料的存放。

3.2 實驗室廢棄物分類及處理

實驗室廢棄物分類：實驗工作中會產(chǎn)生大量廢棄物，大概可歸類為感染性廢棄物、病理性廢棄物、損傷性廢棄物和化學(xué)或藥物性廢棄物。感染性廢棄物包括接觸過或潛在接觸過的實驗動物、實驗標(biāo)本和樣本，用過的一次性實驗用品及實驗器械等攜帶或可能攜病原微生物的實驗廢棄物；病理性廢棄物包括細(xì)胞、單克隆抗體、質(zhì)粒、臨床組織樣本、動物組織及尸體；損傷性廢棄物包括針頭、解剖及手術(shù)器械，實驗相關(guān)玻璃器具等能刺傷或割傷人體的廢棄的實驗利（銳）器；化學(xué)或藥物性廢棄物包括過期、淘汰、變質(zhì)或者被污染的診斷試劑、疫苗和血液制品等。

實驗室廢棄物處理：實驗活動結(jié)束后及時分類收集實驗廢棄物，廢棄物放置于防滲專用包裝容器（袋）或者利器盒內(nèi)。感染性實驗廢棄物應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌或放入消毒劑中浸泡24h，不同類型的廢棄物高壓滅菌程度不同，選擇的高壓滅菌程序也不一樣，高壓滅菌前要裝入專用的高壓滅菌袋，扎口但不密封，有研究表明，高壓袋的密封會影響高壓滅菌的效果[8]。高壓滅菌效果檢驗合格后，方可交由當(dāng)?shù)赜匈Y質(zhì)的醫(yī)療廢物處理公司處理。實驗室無法處理的廢棄物，按照規(guī)定交由特定的處理部門進(jìn)行處理。

4 提升實驗室從業(yè)人員生物安全意識和技能

4.1 做好實驗室人員培訓(xùn)

動物病原微生物實驗室人員應(yīng)做好崗前培訓(xùn)及日常培訓(xùn)，采取理論與實踐相結(jié)合的培訓(xùn)方式，做到熟悉生物安全相關(guān)法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)及本實驗室生物安全管理制度，掌握實驗室安全原理、生物安全操作和防護(hù)技能，熟悉掌握專業(yè)相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)，掌握實驗室裝備、技術(shù)參數(shù)和操作規(guī)范，了解應(yīng)急事件的處置流程、熟悉本實驗室的危險源，采取正確應(yīng)對措施[5]。

4.2 強(qiáng)化動物病原微生物實驗室監(jiān)督檢查和備案管理

強(qiáng)化實驗室監(jiān)督檢查，旨在從管理層面提升實驗室工作者的生物安全意識和實驗室能力建設(shè)。動物病原微生物實驗室應(yīng)開展生物安全自查與外部檢查相結(jié)合，對實驗室日常運行情況進(jìn)行監(jiān)督檢查，從實驗室軟件、硬件、人員管理、廢棄物處理、應(yīng)急預(yù)案演練情況等進(jìn)行全面監(jiān)督檢查，促進(jìn)實驗室規(guī)范管理，防止生物安全事故發(fā)生。

完善實驗室備案管理工作：各地要依照相關(guān)法律法規(guī)要求，做好新建、改建或者擴(kuò)建一級、二級實驗室和通過實驗室國家認(rèn)可的三級、四級實驗室在內(nèi)的動物病原微生物實驗室的備案管理。各地結(jié)合實際情況，探索實驗室備案管理網(wǎng)絡(luò)模式，使實驗室備案信息系統(tǒng)化、規(guī)范化。

5 小結(jié)

目前新發(fā)動物疫病、境外輸入動物疫病時有出現(xiàn)，對動物疫病科研、監(jiān)測、流行病學(xué)調(diào)查等要求更高、任務(wù)更重，做好動物病原微生物實驗室生物安全工作至關(guān)重要，需要上下級通力合作，完善各項法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、文件，強(qiáng)化生物安全政治意識和法律意識，建立健全科學(xué)規(guī)范的管理措施，落實管理責(zé)任。