牦牛電刺激采精技術及操作規程

李小偉 王燕文 何小強 譚雄 羅志昊

（四川省龍日種畜場 624401）

人工授精是現代生物技術的重要手段之一。由于它能最大限度地發揮優秀公畜種用價值[1]，防止近親繁殖，加快繁育與生產應用進程，提高種業水平，常被用于動物育種生產實踐中，愈來愈受到世界各國的普遍重視。目前動物采精常用方法主要有假陰道法和筒握法，并在牛、羊、豬等家畜上普遍應用。但對于一些野性強、馴化難、性情暴烈、膽小易驚的動物，采用這些方法采精比較困難，不易成功。電刺激采精法獲得成功后，彌補了常規方法的局限，被廣泛用于其他野生和經濟動物的人工采精中，對野生動物遺傳資源的保護和利用具有重要意義。

1 電刺激采精技術的原理

電刺激采精是利用低電壓小電流交流電刺激動物薦椎部低級神經中樞，引起動物性興奮并不自覺的射精來達到采精目的。

2 電刺激采精技術的優點

電刺激采精技術在假陰道采精技術基礎上又具有更多方面的優越性[2]。一是牦牛為季節性發情動物，假陰道采精法僅能在牦牛發情季節 （一般為6～9月）采精，而電刺激采精法不受牦牛季節性發情的影響，不需要臺牛 （發情母牛），可實現全年采精。二是假陰道采精必須對牦牛進行調教，由于牦牛野性強，調教牦牛耗時、費力，同時易對調教人員造成傷害，而電刺激采精不需要調教牦牛，省時、省力。三是假陰道采精時公牛未被保定，而電刺激采精時公牛被保定，不易對采精人員造成傷害。

3 采精前的準備

3.1 場地準備

牦牛電刺激采精一般在巷道圈或配種架進行，以便保定公牛，要求場地寬敞、平坦、清潔、遮陽、通電。

3.2 公牛準備

挑選優質、健康、無遺傳疾病、無生殖缺陷的成年公牛，年齡一般4～9歲。將公牛保定在巷道圈或采精平臺，用繩索將牦牛的頭和兩后腿腳踝拴牢保定在固定鋼管柱欄上，用牛毛剪剪掉牦牛的腹毛，并用蒸餾水清洗干凈公牛的陰囊及其周圍，同時清洗干凈陰囊內部，擦干水。

3.3 器材準備

主要有電刺激采精器1臺 （包括電刺激器和刺激電極棒兩個部分，儀器供電：交流220V，電刺激輸出電流：≤2A），車載恒溫冰箱1臺，500ml optidyl稀釋液1瓶，蒸餾水，接精杯20個，50ml螺口尖底離心管30個，洗瓶2個，100ml量筒1個，凡士林1瓶，牛毛剪1把，250ml螺口玻璃試劑瓶1個，酒精溫度計2支等。

3.4 其他準備

清洗：用蒸餾水將量筒、試劑瓶、離心管清洗3遍，并甩干水分，有條件的可用烘箱將水分烘干。配置精液稀釋液：用量筒量取100ml optidyl稀釋液注入試劑瓶，再用量筒量取150mL蒸餾水注入試劑瓶內，搖勻后放入34℃的水浴鍋中或恒溫箱中加熱恒溫15min左右，用溫度計測量稀釋液溫度，使之達到 34～36℃。

4 電刺激采精操作流程

（1）將電源線一端插入儀器面板插座上，另一端接220V交流電源，將刺激電極棒連線兩插頭插入 “輸出”孔。

（2）在開啟 “電源”開關前，應先將右下角控制開關處于中間 “關閉”狀態，模式選擇為 “手動”，電壓檔位選擇“50V”。

（3）通過電壓調節旋鈕將起始電壓調至10V。

（4）將涂抹有凡士林或肥皂水的刺激電極棒通過牦牛肛門插入直腸后，打開 “電源輸入”開關，撥動 “點動”開關，以刺激牦牛薦椎神經。

（5）通過撥動 “點動”開關控制電刺激時間，旋轉 “電壓調節”按鈕控制輸出電壓，同時密切觀察牦牛身體反應。一般電壓升高幅度為2V，在每檔電壓下持續輸出6～8s，停留4s左右，重復此過程2次，再逐步升高電壓。一般當刺激電極棒插入直腸40～45cm，電壓在24～30V即可采出牦牛精液。

5 精液品質檢查

5.1 外觀檢查

采精后先觀察精液顏色、體積，正常精液為乳白色液體。公牦牛正常射精量為4～8ml。

5.2 密度與活力檢查

精子密度也稱為精子濃度，指單位容積 （1ml）所含有的精子數目。精子活力指直線前進運動精子占總精子數的百分率。在顯微鏡下觀察，原精中精子活力≥65%，密度≥6×108個/ml，畸形率小于≤15%時，采集出的新鮮精液才能被制成細管凍精。

6 精液稀釋與平衡

6.1 精液稀釋

將配置好的稀釋液沿杯壁緩慢注入接精杯內，根據原精密度，讓稀釋后的混合液與原精成一定比例，確保精液稀釋后精子密度保持在適宜水平。一般牦牛精液稀釋倍數為4～8倍。

6.2 精液平衡

將稀釋后的精液沿螺口尖底離心管壁，緩慢注入離心管內。擰緊蓋子，豎立放入塑料桶內，蓋上毛巾和桶蓋，避光室溫靜置平衡15～30min后，放入4℃車載冰箱內。

7 注意事項

（1）采精時必須密切觀察牦牛的射精動作，有的牦牛在電壓12V左右就能射精，但也有電壓在40V左右才射精。電壓不宜超過46V，刺激頻率也不宜過快，否則會對牦牛造成身體傷害。

（2）采精頻率一般每周不超過2次，最好每周1次。采精前可對牦牛適當補飼精料、微量元素等。

（3）接精時注意觀察牦牛陰莖排出的液體，一般最開始會排出一些前列腺液，應棄之，當排出的液體為乳白色時即為精液。

（4）牦牛電刺激采精時會表現出性情暴躁、身體抖動，在接精時精液容易受污染，造成精液品質下降，因此，要防止這種情況發生。