小反芻獸疫診斷技術及防治

牟國月

（青海省海西州都蘭縣畜牧獸醫站 816199）

小反芻獸疫是小反芻動物疾病病毒引起的，其主要特征為急性、發熱、傳染性。而且該類疫病的發病率在90%左右，死亡率高達80%。由于該疫病與牛瘟的臨床癥狀較為相似，因此也被稱為偽牛瘟。發病時，動物出現體溫異常升高，眼睛、鼻腔、口腔分泌物增多，腹瀉、肺炎、口腔糜爛等癥狀，對養羊業造成極大危害。

1 小反芻獸疫概述

1.1 臨床癥狀

一般情況下，小反芻獸疫具有一定的潛伏期，即3～5d 的時間，最長不超過21d。往往突然發病，體溫急劇升高，其體溫連續5d 維持在41℃，而且在此期間食欲下降，進食量較少，甚至停止進食，受到感染的動物被毛較亂，口鼻干燥，而且分泌物逐漸由流水樣轉為黏液物質，難以呼吸，呼吸氣體較為惡臭；感染動物空腔內黏膜出現充血癥狀，兩頰黏膜出現大面積的破損，而且流出很多涎液，并且出現糜爛、出血癥狀，甚至發生壞死性病灶，轉而對下唇、小齒齦產生感染[1]。發病后期會出現血水樣腹瀉、脫水、消瘦等癥狀，體溫開始下降；發生伴發性肺炎、咳嗽。一般情況下幼小動物發病率較高，而且該獸疫類型的死亡率相對較高。

1.2 病理變化

在檢剖過程中發現感染動物出現結膜炎、壞死性口炎、鼻腔黏膜腐爛；網胃、瘤胃出現潰瘍病變，盲腸、結腸出現條狀出血，肺壞死，淋巴結腫大，脾壞死。

1.3 流行病學特性

感染源主要是綿陽和山羊，癥狀出現7d 后，動物體液、糞便中能檢測出很多病毒，傳染性較強；主要通過直接接觸傳染，呼吸系統是主要感染途徑，還可以通過精液、胚胎、哺乳進行傳播；山羊和綿陽是主要的易感動物，牛、豬是亞臨床感染，不具備傳播性[2]。

2 小反芻獸疫診斷技術

一般情況下，對小反芻獸疫的診斷包含常規診斷和實驗室診斷兩種。常規診斷主要是結合發病動物的臨床癥狀、病理變化、流行病學特點等對其實施初步判斷，然后開展實驗室診斷。其中實驗室診斷技術主要包含以下幾種方式。

2.1 病原學診斷

（1）AGID，該種診斷技術主要是在高免綿陽身上獲得抗血清，并通過病體的腸黏膜、淋巴結等組織結構，制作標準性的PPRV 抗原。在瓊脂凝膠催化作用下，并創建合適的溫度環境，促進可溶性PPR 抗原與抗體的充分反應，如果出現沉淀線，并與陽性對照抗原一致，可以對其進行陽性判斷[3]。PPR抗原較為溫和，含毒性較少，難以對病毒進行精準檢測。

（2）捕獲酶聯免疫吸附試驗，該種技術主要通過不同類型的抗N 蛋白單克隆抗體，可以對PPRV 在短時間內進行鑒別診斷。部分專家學者研發了雙抗體夾心ELISA 檢測方法，可以直接處理羊糞便，優化檢測流程，該種方式具有特異性、敏感性等優勢，并能快速獲得檢測結果，但檢測費用較高。

（3）CIEP，該技術可以以最快的速度對病毒抗原進行檢測，其主要檢測設備為水平電泳槽，并在其內放置凝膠，添加0.1mol/L 的醋酸巴比妥緩沖液，在凝膠每對孔作用下實現正極加血清，負極加抗原，電泳60min 后可以創建強光環境，對每對孔進行觀察，如果其出現2、3 條沉淀線，可以判斷其為陽性反應，該種技術方法敏感性更強，且檢測速度更快，但對PPRV 與牛瘟難以有效甄別[4]。

（4）病毒分離，該種技術主要是通過在田間獲得試驗樣品，并展開快速診斷的方法。PPRV 能使用羔羊原代腎細胞開展分離操作，并利用可疑病科接種單層細胞培養物，動態觀察細胞病變，如果樣品中存在PPRV，在5d 內就會出現細胞病變現象，主要表現為細胞逐漸圓化，并開始聚集，逐漸匯聚成核環形排列、鐘盤外形的合胞體。

（5）反轉錄聚合酶鏈式反應。該種方式也是分子生物學檢測方法之一，是小反芻獸疫診斷技術最常用的方法。很多專家學者對其進行研究，獲得較好的檢測結果。該種技術方法特異性較好，且具有較強的靈敏性，檢測速度較快，但容易出現漏檢。

2.2 血清學診斷

（1）中和試驗。該種方式在國家上較為通用，主要是利用羔羊原代腎細胞或者是Vero 細胞，并將其放置在轉管內開展試驗操作。在此過程中，需要對滅活待檢血清進行倍比稀釋，并加入103TCID50/ml 病毒懸液，創設37℃的溫度環境，對其持續孵育60min，在各個梯度內提取0.2ml 混合物，并將其放置在轉子里面，并在箱內添加1ml 的Vero 細胞懸液，將其倒放，持續3d 時間，如果培養管中出現CPE，要對其進行剔除，并更換維持液，持續旋轉培養7d[5]。如果檢測結果中出現1/8的稀釋血清抗體，可以將其判斷為陽性。

（2）ELISA，該種方式主要包含競爭ELISA、間接ELISA。在實際應用中，檢測快速，質量較高。在PPR 流行病學檢測中得到廣泛應用，同時該種方式還可以用于免疫效果評估等。

3 小反芻獸疫防治措施

3.1 強化飼養管理

強化檢疫管理，嚴禁從疫區進口易感染動物，避免從該區域進口動物胚胎、蛋類等動物制品，對引入的動物進行有效隔離，采取科學的消毒措施。要進一步提升飼養管理質量，保障養殖場的安全性，在獸疫指導下，制定完善的防疫機制，強化防疫管理效果。對養殖場相關設施設備進行清洗消毒，避免交叉感染。提升動物飼養營養水平，保障飼養環境溫度、濕度和通風條件適宜。對動物生存場所進行定期消毒。

3.2 加強免疫管理

該種疾病危害性較大，難以控制，死亡率較高，造成極大的經濟損失。因此，要強化對免疫接種的重視，嚴格按照相關規定對動物接種相關疫苗，提升小反芻動物疫病的預防能力。當前我國主要使用小反芻獸疫弱毒疫苗，具有較好的安全性，保護時間較長，適用性強，可以對孕期母羊、幼齡羔羊進行接種[6]。近年來加強對同源疫苗的研究，并獲得良好的免疫效果。四環素、磺胺類藥物對該疫病具有較好的預防和治療效果。如果發生該類疫病，或相鄰地區發生疫情，需對羊群實施強制免疫，并設立隔離帶；針對發病動物，按照規定對其進行撲殺；加強防疫技術人員的綜合素養，保障免疫工作的有效落實。

4 結語

綜上所述，小反芻獸疫具有較大的危害性，一旦發病會對養殖業造成極大的經濟損失，不利于養殖業的健康穩定發展。因此，要強化對小反芻獸疫診斷技術的深度研究，掌握其臨床癥狀，并對具體的診斷技術進行分析，尤其要強化對實驗室診斷技術的深度研究，提升診斷效果，實現對該疫病的快速高效控制，減少其危害性，并為防治措施的科學設計提供依據。