王晶晶，周雨萌，周曉琪，于佳圻，李銘，楊威，徐闖，張冰冰*

（1．黑龍江八一農墾大學生命科學技術學院，黑龍江大慶 163319；2．黑龍江八一農墾大學動物科技學院，黑龍江大慶 163319）

肝臟是生物體的中心器官，可調節哺乳動物碳水化合物、脂肪和蛋白質的代謝平衡。肝臟除具有代謝和解毒作用外，也是一個重要的免疫器官，含有大量的免疫細胞[1-2]。肝臟的高度血管化特性，加之其有孔毛細血管樣血管（稱為竇狀管）中的血流減少，構成了一個獨特的環境，可使免疫細胞最大限度地暴露于血源性和腸道源性病原體[3]。肝臟的免疫監測涉及傳統的CD4+T細胞和CD8+T細胞，其中CD4+T細胞的數量低于CD8+T細胞[4-5]，主要參與機體的細胞免疫，控制和清除感染，是機體抵抗感染疾病的重要屏障。文章主要簡述了肝臟疾病與肝臟微環境中CD4+T細胞亞群之間的聯系。

1 CD4+T細胞的分類及功能

1.1 CD4+T細胞的分類

CD4+T細胞的亞群分為輔助性T細胞（Th）和調節性T細胞（Tregs）。其中Th細胞又被分類為輔助性T細胞1（Th1）、輔助性T細胞2（Th2）和輔助性T細胞17（Th17）細胞亞群。

1.2 CD4+T細胞的功能

細胞免疫由T淋巴細胞介導宿主防御，是一種防御細胞內吞噬微生物的機制。T淋巴細胞分為CD4+T細胞亞群和CD8+T細胞亞群；CD4+T細胞是機體免疫系統的指揮中心，負責消除和控制各種感染并對抗入侵的病菌[6]。CD4+T細胞發生反應時，涉及淋巴器官中細胞的初始激活，以產生效應細胞和記憶細胞；效應細胞遷移至感染部位，消除感染性病原體。

Th細胞是適應性免疫反應和炎癥性疾病的重要調節細胞。被專門的抗原呈遞細胞（APC）激活后，CD4+T細胞亞群是細胞因子分泌和免疫調節功能的基礎。已有關于分化為不同細胞譜系Th細胞的研究結果表明，Th細胞譜系由細胞因子環境決定，活化APC產生的白細胞介素-12（IL-12）在Th1細胞分化中起到關鍵作用[7]，活化T細胞或先天免疫細胞可產生白細胞介素-4（IL-4），驅動Th2細胞分化[8]。Th17細胞的發育和功能受白細胞介素-23（IL-23）調控，Treg細胞的分化則在轉化生長因子-β（TGF-β）和白細胞介素-2（IL-2）的誘導下完成。

Th1細胞是構成Th細胞的一個亞群。與免疫反應的許多其他特征一樣，Th1極化受樹突狀細胞（DC）調節。在穩定狀態下，未激活的DC向T細胞呈遞自身抗原，導致耐受性。一旦被激活，載有抗原的DC即可啟動抗原特異性免疫，導致T細胞增殖并分化為輔助細胞和效應細胞。Th1細胞產生干擾素-γ（IFN-γ），在細胞介導免疫細胞內病原體中發揮重要作用。

Th2細胞產生的IL-4、白細胞介素-5（IL-5）和白細胞介素-13（IL-13）可參與體液免疫和過敏反應。Th2細胞通過白細胞介素-25（IL-25）、白細胞介素-33（IL-33）和胸腺基質淋巴生成素（TSLP）細胞因子調控，在癌癥的治療中發揮重要作用。當CD4+T淋巴細胞存在于Th2型腫瘤微環境時，可通過調節TAMs的腫瘤特性促進轉移，而非通過參與細胞毒性機制根除惡性細胞。上述療法中和了腫瘤微環境中適應性和固有免疫細胞的腫瘤特性，與增強抗腫瘤免疫的細胞毒性藥物聯合使用時，能夠延長晚期癌患者的生存時間。來自CD4+T細胞的Th2細胞因子對腫瘤發展和進展的影響可能受器官微環境或腫瘤微環境中IL-4或IL-13受體狀態的調節。

Th17細胞產生的白細胞介素-17（IL-17）、白細胞介素-17F（IL-17F）和白細胞介素-22（IL-22）可促進組織炎癥。IL-23可促進腫瘤生長并防止免疫監視，為Th17細胞發育后期必需，且具有擴增Th17細胞并促進其功能的作用，故在Th17細胞內大量表達。IL-17可通過調節趨化因子表達發揮促炎的作用[9]，誘導成纖維細胞和上皮細胞等產生白細胞介素-6（IL-6）、粒細胞集落刺激因子（G-CSF）和幾種趨化因子。Th17細胞在維持慢性炎癥和塑造腫瘤發展所必需的微環境方面發揮關鍵作用。雖然已有針對Th17細胞的研究，但Th17細胞與肝臟疾病的關系及其在免疫中的作用仍待進一步探討。

Treg細胞在控制體內自身免疫反應性及其他細胞的免疫應答、幫助維持機體的免疫平衡和預防自身免疫病等方面發揮重要作用。Treg細胞作為構成CD4+T細胞的一個亞群，包括CD4+CD25+亞群等[10]。已有研究表明，CD4+CD25+Treg細胞的叉狀核轉錄因子3（FoxP3）及其細胞表面的細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4（CTLA-4）表達水平發生變化時，Treg細胞功能的發揮受到影響，進而影響機體的免疫調節功能。Foxp3被確定為對Treg的功能特性至關重要的譜系特異性因子[11-12]，其穩定性和連續基因表達對維持Treg的功能至關重要。胸腺中Treg的發育過程涉及一個活躍、漸進的去甲基化過程，自Foxp3誘導開始，于進入外周組織后完成。

2 CD4+T細胞亞群與肝臟疾病

奶牛脂肪肝是一種能量代謝性疾病，多發生于圍產期，極大地危害奶牛的健康。產犢后，奶牛的采食量減少，泌乳量增加，此時體內乳糖的消耗導致奶牛糖供應不足，促進肝臟脂肪動員，非酯化脂肪酸顯著增加，奶牛易患脂肪肝[13]。脂肪肝可破壞圍產期奶牛的免疫系統，導致生育時間推遲，提高感染乳腺炎、子宮內膜炎的概率。

奶牛脂肪肝是揭示非酒精性脂肪肝（NAFLD）發病機制的良好動物模型。肝臟脂質積累通過改變肝臟合成和降解，參與免疫反應的化合物的能力，進而直接影響免疫反應，還可通過改變具有免疫功能的代謝物間接降低免疫反應[14]。目前，奶牛泌乳期脂肪肝的防治一般采用產前減少精料飼喂量。CD4+T細胞在維持慢性炎癥和形成腫瘤發展所必需的微環境方面具有關鍵功能，但CD4+T細胞亞群在奶牛肝臟免疫相關疾病中的相關報道甚少，主要聚焦于小鼠模型和人體。

2.1 CD4+T細胞亞群與非酒精性脂肪性肝炎

NAFLD是由除酒精外的其他因素造成的肝臟脂肪性病變，表現為脂質代謝紊亂，肝實質細胞聚集甘油三酯和膽固醇引起的脂肪肝變性，產生胰島素抵抗，導致血清中游離脂肪酸的含量增加，肝臟吸取血液中的游離脂肪酸進行脂質合成或直接代謝。當脂質合成與脂質氧化長期不平衡時，脂質長期累積導致脂質變性甚至脂毒性[15]。免疫系統是NAFLD進展的主要驅動因素之一，肝臟的免疫微環境遭到破壞[14]。在患有NAFLD的小鼠模型中，由于亞油酸積累引起脂質代謝失調，導致CD4+T淋巴細胞死亡，從而改變了肝臟內的免疫系統平衡并促進肝損傷[16]。NAFLD的肝臟脂肪變性導致釋放到肝臟中的游離脂肪酸顯著增加，誘導氧化應激和內質網應激，引起肝細胞損傷并激活肝巨噬細胞。Th17細胞在NAFLD發病機制中起到關鍵作用[17]，Th17細胞數與非酒精性脂肪性肝炎（NASH）發病呈正相關。研究發現，益生菌能夠明顯緩解小鼠的NAFLD癥狀，降低肝臟中甘油三酯的含量，緩解脂肪變性[18]。白及寡糖由甘露糖和葡萄糖組成，代謝組學分析發現，白及寡糖可顯著調節高脂飲食（HFD）喂養小鼠的脂肪酸、花生四烯酸和其他相關代謝物的肝臟代謝，同時減少肝臟組織中的脂質積累和纖維化，表明白及寡糖具有作為功能性食品治療NAFLD的巨大潛力[19]。

NAFLD是世界上最常見的慢性肝病，并可能演變為NASH。NASH存在炎癥變化和肝細胞損傷，代表了一種更嚴重的疾病。除了脂質介導的應激和肝細胞死亡，NASH期間的肝臟環境也會導致患者和小鼠模型的氧化應激[20-21]。炎癥在上述過程中的重要作用表明，富含免疫細胞的肝臟環境可調節NASH的發作和嚴重程度。肝臟免疫細胞庫在NASH期間被重塑，并參與促進肝損傷和肝纖維化不受控制的炎癥環境，進一步加重疾病的程度。傳統的CD4+Th細胞與特定DC子集和細胞因子環境的相互作用決定細胞極化為不同的Th細胞[22-23]。

在NASH小鼠模型中，缺乏Th1細胞分泌的細胞因子IFN-γ的小鼠可顯著防止肝損傷和肝纖維化[24]。IFN-γ誘導的趨化因子CXCL10也參與了NASH發病機制，CXCL10缺失或抗體介導的CXCL10可中和限制小鼠脂肪變性、肝損傷和纖維化[25]；CXCR3缺乏同時也影響了小鼠NASH發病機制[26]。因此，CXCL10-CXCR3信號減弱可以部分解釋IFN-γ缺乏對NASH的影響。

Th17細胞具有加劇病原體引起炎癥性疾病的功能[27]。有研究發現，采用黃芩湯干預的NASH大鼠血脂、肝功能和炎性因子水平均得到改善，肝組織的脂肪變性和炎性浸潤亦得到改善，表明黃芩湯對NASH大鼠具有明確的治療作用[28]。牛初乳對多種慢性感染均具有治療作用，如口服超免疫初乳制劑可以緩解與NASH相關的慢性炎癥、肝損傷以及胰島素抵抗[29]。

2.2 CD4+T細胞亞群與慢性丙型肝炎

慢性丙型肝炎（CHC）是一種進行性疾病，可導致肝硬化或肝細胞癌[30]。丙型肝炎病毒（HCV）感染與脂質代謝異常存在非常強的相關性，HCV感染中的脂代謝異常是丙型肝炎致病機制之一。肝臟微環境極其復雜，具有大量的免疫細胞群，可在病毒消除方面發揮核心作用[31]。在HCV感染的過程中，細胞毒性T淋巴細胞（CTL）是控制HCV感染的重要效應因子，通過釋放細胞毒性顆粒和表達誘導細胞死亡受體的配體，參與感染細胞的清除。Th細胞通過增強CTL反應和抗原特異性B淋巴細胞作為適應性免疫反應的中樞調節細胞，改變了病毒功能，同時還降低了增殖活性。此外，體外研究表明，Th細胞的分化階段不確定，是對微環境變化的靈活反應[32]。免疫反應具有雙重作用，可評價CHC中病毒和肝臟免疫微環境間潛在的相互作用。臨床研究表明，茵陳蒿湯加減在改善濕熱蘊結型病毒性肝炎方面卓有成效[33]。在茵陳蒿湯的基礎上加茯苓、豬苓、柴胡及虎杖等藥物制得加味利膽退黃湯，在治療慢性丙型肝炎方面效果顯著，且不良反應較少[34]。

3 結論

在肝臟微環境的綜合研究中，考慮肝臟內細胞因子和淋巴細胞群體之間的相互作用非常重要。免疫與肝臟疾病間的聯系愈發緊密，肝臟受到不同損傷時，其微環境中免疫細胞的種類與數量不盡相同。目前，利用肝臟微環境中免疫細胞作為治療手段尚不常見，關于利用肝臟微環境中免疫細胞的變化治療肝臟疾病仍待更深入的研究。