分散固相萃取法與固相萃取法在氣相色譜質譜聯用法測定多組分農殘中的比較＊

閆 玉，宋 姝，袁 寧，張月輝，劉家陽，趙 飛，于 晨，田 甜，李彥博

（遼寧省檢驗檢測認證中心，遼寧 沈陽 110000）

現代農藥技術為滿足農作物多種病害蟲害的防治要求，實現少次噴灑多種預防的效果，生產的農藥基本為混合型農藥，以多種復雜有機化合物復配而成[1-3]。因此對蔬菜水果中農藥殘留的檢測方法要求很高，而且農藥很多化合物組分結構復雜且相近，多存在同分異構現象[4]，所以在食品檢測中多采用氣相色譜聯用質譜法進行組分分析。氣相色譜串聯質譜儀（GC-MS/MS）檢測具有靈敏度高、抗干擾能力強、選擇性好等優點，正好滿足農藥多殘留分析的需求[5-8]。

同時農藥中很多化合物易分解且具有易揮發遷移等特性[9-11]，而且不同蔬菜水果特性不同，在進行上機測定時，帶來的干擾和影響也大不相同[12-14]。在實驗中還有多次進樣帶來進樣口、離子源的污染，導致農藥中某些化合物的檢測靈敏度逐漸下降，從而影響檢測結果[15-17]。雖然可以通過更換襯管、割柱頭以及清洗離子源等操作對儀器進行維護，但這無疑增加了檢測的成本與時間。因此，對樣品的凈化成為提高方法耐用性的關鍵，所以前處理方法的選擇也尤為重要，也是影響結果精確度和準確性的重要前提[18-19]。

本實驗選取含有葉綠素成分較高的菠菜為作為空白基質[20]，分別采用分散固相萃取（QuEChERS）和固相萃取2 種方法進行比較，通過加標回收實驗，考察2 種前處理方法之間對有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯、氨基甲酸酯等多種農藥化合物的回收率和準確度的差異。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

島津GCMS-TQ8050 氣相色譜-串聯質譜儀（日本島津公司）。

TTL-DCⅡ型氮吹儀（余姚市長江溫度儀表廠）。

HeraeusMultifu.geX1R 離心機（賽默飛世爾科技有限公司）。

T25 高速勻漿機（德國ⅠKA 公司）。

乙腈、丙酮（色譜純，Fisher 公司）。

提取鹽包：4 g 硫酸鎂、1 g 氯化鈉、1 g 檸檬酸鈉、0.5 g 檸檬酸氫二鈉（迪馬公司）。

凈化管：900 mg 硫酸鎂、150 mg 乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠及150 mg 十八烷基硅烷鍵合硅膠（迪馬公司）。

凈化柱：石墨化碳黑-氨基復合柱。

0.22 μm 尼龍濾膜（上海安譜公司）。

實驗室用水為Milli-Q 超純水。

1.2 標準溶液配制

1.2.1 混合標準中間液（1.0 μg/mL）

準確吸取農殘混合標準溶液0.50 mL 置于5 mL 容量瓶中，用丙酮溶解并稀釋至刻度，配制成質量濃度為1.0 μg/mL 的農殘混合標準中間液。

1.2.2 內標溶液的配制

環氧七氯標準貯備液（1.0 mg/mL）：準確稱取環氧七氯10.00 mg 標準品置于10 mL 容量瓶中，用丙酮溶解并稀釋至刻度，配制成質量濃度為1.0 mg/mL 的環氧七氯標準貯備液。

環氧七氯標準中間液（5.0 μg/mL）：準確移取上述環氧七氯標準貯備液（1.0 mg/mL）0.050 mL于10 mL容量瓶中，用丙酮稀釋至刻度，配制成質量濃度為5.0 μg/mL 的環氧七氯標準中間液。

1.2.3 混合標準曲線溶液的制備

分別準確移取1.0 μg/mL 農殘混合標準中間液0.05 mL、0.1 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL 于 5 mL容量瓶，用丙酮定容至刻度，配成混合標準系列工作液，質量濃度分別為5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL。準確移取以上各濃度標準系列工作液1 mL 分別添加至經提取、凈化步驟處理的5份空白樣品處理吹干后的殘渣中，最后加入質量濃度為5.0 μg/mL 的環氧七氯標準中間液20 μL，渦旋混合均勻，制得質量濃度分別為5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL 的系列基質標準溶液。

1.3 前處理方法

1.3.1 分散固相萃取法（QuEChERS 法）

稱取5.00 g 粉碎后的試樣（精確至0.01 g）于50 mL塑料離心管中，加入10 mL 乙腈、4 g 硫酸鎂、1 g 氯化鈉、1 g 檸檬酸鈉、0.5 g 檸檬酸氫二鈉及1 顆陶瓷均質子，蓋上離心管蓋，劇烈震蕩1 min 后4 200 r/min離心5 min。吸取6 mL 上清液加到內含900 mg 硫酸鎂及150 mg PSA 的15 mL 塑料離心管中。渦旋混勻1 min，4 200 r/min 離心5 min，準確吸取1 mL 上清液于10 mL 試管中，40 ℃水浴中氮氣吹至近干。加入質量濃度為5 μg/mL 的環氧七氯內標溶液20 μL，加入1 mL 丙酮復溶，渦旋混勻，過微孔濾膜，用于測定。

1.3.2 固相萃取

稱取5.00 g 粉碎后的試樣（精確至0.01 g）于50 mL塑料離心管中，加入10 mL 水渦旋混勻，靜置30 min，加入20 mL 乙腈，15 000 r/min 高速勻漿2 min，加入5 g 氯化鈉劇烈振蕩，5 000 r/min 離心5 min，準確吸取5 mL 上清液，40 ℃水浴旋蒸至1 mL，氮氣吹至近干，待凈化。用5 mL 乙腈-甲苯溶液（3+1）預洗石墨化碳黑-氨基復合柱，棄去流出液。下續150 mL 雞心瓶，放入固定架上。將上述待凈化試樣用3 mL 乙腈-甲苯溶液（3+1）洗滌至固相萃取柱中，再用2 mL 乙腈-甲苯溶液（3+1）洗滌，并將洗滌液移入柱中，重復2 次。用25 mL 乙腈-甲苯溶液（3+1）淋洗固相萃取柱，收集上述所有流出液于150 mL 雞心瓶中，40 ℃水浴中旋轉濃縮至近干。加入5.0 μg/mL 環氧七氯內標溶液20 μL，加入1.0 mL 丙酮復溶，過微孔濾膜，用于測定。

1.4 儀器條件

1.4.1 色譜條件

色譜柱：SH-Rtx-1701（30 m×0.25 mm（內徑）×0.25 μm（膜厚））。

柱溫：40 ℃保持1 min，以40 ℃/min 的速率升溫至120 ℃，保持0 min，以5 ℃/min 的速率升溫至240 ℃，保持 0 min，以 12 ℃/min 的速率升溫至 300 ℃，保持10 min。

進樣口溫度：280 ℃。

載氣（高純氦氣）線速：36.1 cm/s 恒線速。

進樣量：1 μL。

1.4.2 質譜條件

接口溫度：280 ℃。

離子源：電子轟擊源（EⅠ源）。

離子源溫度：230 ℃。

掃描方式MRM。

農殘化合物質譜條件如表1 所示。

表1 農殘化合物質譜條件

表1（續）

2 結果與討論

2.1 分散固相萃取法

標準曲線、線性相關性、加標回收率及RSD 值如表2 所示。

表2 分散固相萃取法所得曲線方程、線性相關性、加標回收率及RSD 值

表2（續）

加標回收實驗方法：準確稱取5.000 g 樣品6 份，分別加入農殘混合標準中間液（1.0 μg/mL）0.10 mL，提取、凈化過程同樣品處理，進樣，測定回收率，計算 RSD 值。

2.2 固相萃取法

標準曲線、線性相關性、加標回收率及RSD 值如表3 所示。

表3 固相萃取法所得曲線方程、線性相關性、加標回收率及RSD 值

表3（續）

加標回收實驗方法同2.1。

2.3 分析討論

從結果可以看出該儀器條件下，標準曲線線性相關性均滿足一般實驗對結果的要求，35 種農藥成分的線性相關性均在0.995 以上。

從RSD 值來看，分散固相萃取法和固相萃取法的平均標準偏差均小于10，數據重現性較好，2 種前處理方法均可滿足實驗要求。

通過對比每個組分的加標回收率可以發現，部分組分農藥采用分散固相萃取前處理方法的加標回收率優于采用固相萃取。這是由于固相萃取法中使用的氨基炭黑復合柱中吸附結構致密緊實，吸附性強，而很多農藥的分子結構多為長鏈性和平面片層結構，被吸附后不易洗脫，造成回收率較低；雖然分散固相萃取組分也含有吸附能力的物質，但由于結構松散，農藥組分回溶較為容易，所以回收率反而較高。

3 結論

通過對比這2 組實驗結果可以看出，分散固相萃取法可以很好地實現多組分農殘的檢測，部分組分的回收率優于固相萃取法。分散固相萃取法相較于固相萃取法減少了凈化和洗脫環節，有效節省了有機試劑的使用量，縮短了前處理時間，且分散固相萃取管的價格遠低于固相萃取柱，在保證實驗快捷、高效、結果準確性的前提下，還有效降低了實驗成本。