細(xì)胞角質(zhì)蛋白19片段抗原21-1、神經(jīng)元特異性烯醇化酶和鱗狀細(xì)胞癌抗原在非小細(xì)胞肺癌合并惡性胸腔積液患者中的表達(dá)及臨床意義

趙明娟，刑雙麗，高宇

焦作煤業(yè)（集團(tuán)）有限責(zé)任公司中央醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)二區(qū)，河南 焦作 454000

非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是肺癌常見的病理類型，占全部肺癌的85%以上，嚴(yán)重威脅患者的生命健康[1]。研究發(fā)現(xiàn)，惡性胸腔積液多是由于胸膜受到惡性腫瘤的侵犯所致，而NSCLC常累及胸膜，易引發(fā)大量胸腔積液，不僅會(huì)影響患者的呼吸、循環(huán)功能，還會(huì)危及患者的生命安全[2]。因此，如何及時(shí)有效地檢查NSCLC患者是否合并惡性胸腔積液，提高患者的診療效果，改善患者預(yù)后是目前研究的熱點(diǎn)。細(xì)胞角質(zhì)蛋白19片段抗原21-1（cyto-keratin 19 fragment antigen 21-1，CYFRA21-1）主要分布于支氣管、肺泡等上皮細(xì)胞中，在良性疾病患者中呈低表達(dá)，而在鱗狀細(xì)胞癌、腺癌等上皮細(xì)胞腫瘤中表達(dá)水平明顯升高[3]。研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）是糖酵解的關(guān)鍵酶，由于NSCLC是神經(jīng)內(nèi)分泌起源的腫瘤，因此NSE診斷NSCLC具有較高的敏感性[4]。鱗狀細(xì)胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCC-Ag）是臨床中常用的腫瘤標(biāo)志物，研究指出，SCC-Ag對(duì)鱗狀上皮細(xì)胞癌具有重要的診斷價(jià)值[5]。本研究分析CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag在NSCLC合并惡性胸腔積液患者中的表達(dá)及臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年3月至2020年3月焦作煤業(yè)（集團(tuán)）有限責(zé)任公司中央醫(yī)院收治的NSCLC患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理檢查確診為NSCLC[6]；②接受影像學(xué)檢查，經(jīng)胸腔穿刺明確是否有胸腔積液；③年齡﹥20歲，無(wú)意識(shí)障礙。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤；②合并肝腎等重要器官功能障礙；③臨床資料不全。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入107例NSCLC患者作為研究組。其中，男56例，女51例；平均年齡為（65.53±6.32）歲；平均體重指數(shù)為（23.21±2.34）kg/m2；合并疾病：高血壓27例，糖尿病30例；肺癌類型：腺癌84例，鱗狀細(xì)胞癌23例；臨床分期：Ⅰ期48例，Ⅱ期37例，Ⅲ期22例。根據(jù)是否合并惡性胸腔積液將107例NSCLC患者分為合并組和未合并組。另選取同期進(jìn)行健康體檢者130例作為對(duì)照組。其中，男68例，女62例；平均年齡為（65.13±6.06）歲；平均體重指數(shù)為（24.06±3.14）kg/m2；合并疾病：高血壓35例，糖尿病38例。研究組和對(duì)照組的性別、年齡、體重指數(shù)、合并疾病比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測(cè)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)

抽取所有受檢者的空腹靜脈血3 ml，研究組于入院次日清晨抽取，對(duì)照組于體檢當(dāng)日清晨抽取，使用乙二胺四乙酸抗凝處理后，3000 r/min離心10 min后取上清液備用。采用化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)血清CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平，嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作。CYFRA21-1正常參考值為1～3 ng/ml，CYFRA21-1﹥3 ng/ml提示異常升高；NSE正常參考值為4～12 ng/ml，NSE﹥12 ng/ml提示異常升高；SCC-Ag 正常參考值為 0.2～0.9 ng/ml，SCC-Ag﹥0.9 ng/ml提示異常升高。3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，以三者均在正常參考值范圍內(nèi)為陰性，任意一項(xiàng)不在正常參考值范圍內(nèi)即為陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)

比較研究組和對(duì)照組的CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平，比較合并組和未合并組的CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平，分析NSCLC患者合并惡性胸腔積液的影響因素，分析CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag單獨(dú)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)NSCLC患者合并惡性胸腔積液的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；采用多元Logistic回歸模型分析NSCLC患者合并惡性胸腔積液的影響因素；繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線，計(jì)算曲線下面積（area under the curve，AUC），分析CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag單獨(dú)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)NSCLC患者合并惡性胸腔積液的預(yù)測(cè)價(jià)值；以P﹤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組和對(duì)照組CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平的比較

研究組患者的CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）。（表1）

表1 研究組和對(duì)照組CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平的比較（ng/ml，±s）

表1 研究組和對(duì)照組CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平的比較（ng/ml，±s）

組別對(duì)照組（n=1 3 0）研究組（n=1 0 7）t值P值1.9 6±0.2 5 9.8 7±1.1 4 7 6.9 2 9<0.0 1 8.1 3±1.2 4 3 0.8 4±3.7 1 7 5.0 3 2<0.0 1 0.6 3±0.1 7 3.9 3±0.6 2 5 8.1 1 4＜0.0 1 C Y F R A 2 1-1 N S E S C C-A g

2.2 合并組和未合并組CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag 水平的比較

107例患者中，合并惡性胸腔積液69例（合并組），未合并惡性胸腔積液38例（未合并組）。合并組患者的CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平均明顯高于未合并組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）。（表2）

表2 合并組和未合并組CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平的比較（ng/ml，±s）

表2 合并組和未合并組CYFRA21-1、NSE和SCC-Ag水平的比較（ng/ml，±s）

組別合并組（n=6 9）未合并組（n=3 8）t值P值1 1.8 4±1.1 5 6.2 9±1.1 2 2 4.1 1 0<0.0 1 3 3.9 4±4.2 1 2 5.2 1±2.8 0 1 1.4 5 2<0.0 1 4.9 2±0.8 1 2.1 3±0.2 8 2 0.5 3 1<0.0 1 C Y F R A 2 1-1 N S E S C C-A g

2.3 NSCLC 患者合并惡性胸腔積液的影響因素

單因素及多因素分析結(jié)果顯示，血性胸腔積液、臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期及CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag水平異常升高均是NSCLC患者合并惡性胸腔積液的危險(xiǎn)因素（P﹤0.05）。（表3）

表3 NSCLC患者合并惡性胸腔積液影響因素的單因素及多因素分析

2.4 CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag 單獨(dú)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)NSCLC 患者合并惡性胸腔積液的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC曲線分析結(jié)果顯示，CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag單獨(dú)及三者聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)NSCLC患者合并惡性胸腔積液的AUC分別為0.948、0.803、0.834及0.976，其中三者聯(lián)合的預(yù)測(cè)價(jià)值最佳。（表4、圖1）

圖1 CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag 單獨(dú)及三者聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)NSCLC 患者合并惡性胸腔積液的ROC曲線

表4 CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag單獨(dú)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)NSCLC患者合并惡性胸腔積液的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討論

研究表明，惡性胸腔積液是腫瘤晚期常見的并發(fā)癥，而原發(fā)性肺癌的胸膜轉(zhuǎn)移是引起惡性胸腔積液最常見的原因，如何早期干預(yù)以避免惡性胸腔積液的發(fā)生對(duì)肺癌患者具有重要意義[7-8]。

CYFRA21-1是位于上皮細(xì)胞內(nèi)的角蛋白，是腫瘤細(xì)胞中蛋白激酶的降解產(chǎn)物[9]。研究表明，CYFRA21-1是診斷NSCLC的血清標(biāo)志物，其與NSCLC的病理組織類型、臨床分期等密切相關(guān)，對(duì)NSCLC的診斷及預(yù)后評(píng)估具有重要的臨床價(jià)值[10]。NSE是神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞所特有的一種酸性蛋白酶，廣泛存在于生物組織細(xì)胞內(nèi)，性質(zhì)穩(wěn)定，在血清和脊髓中含量偏低，一旦神經(jīng)細(xì)胞受損，NSE可通過(guò)血腦屏障進(jìn)入血液及腦脊髓，對(duì)神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制受損具有高度敏感性[11-12]。有研究者采用單克隆技術(shù)從腫瘤相關(guān)抗原TA4中提純出一個(gè)糖蛋白片段SCC-Ag，其診斷鱗狀細(xì)胞癌的特異度較高，可有效監(jiān)測(cè)鱗狀細(xì)胞癌的治療效果及術(shù)后轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)情況[13]。本研究結(jié)果顯示，NSCLC患者中CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag水平均明顯高于對(duì)照組，且合并惡性胸腔積液的NSCLC患者中CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag水平更高。說(shuō)明CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag可能參與了NSCLC的病情進(jìn)展，且與合并惡性胸腔積液有著密切聯(lián)系。

研究表明，CYFRA21-1水平與胸腔積液患者病情危重程度及預(yù)后密切相關(guān)[14]。另有研究表明，當(dāng)患者發(fā)生胸腔積液后，體內(nèi)缺血缺氧，機(jī)體免疫功能降低，不僅會(huì)使患者出現(xiàn)咳嗽、呼吸困難等臨床癥狀，還會(huì)對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)、心、肺功能造成影響，引發(fā)NSE、SCC-Ag水平升高[15-16]。本研究通過(guò)Logistic回歸模型分析NSCLC患者合并惡性胸腔積液的影響因素，結(jié)果顯示，血性胸腔積液、臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期及CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag水平異常升高均是NSCLC患者合并惡性胸腔積液的危險(xiǎn)因素（P﹤0.05）。鑒于此，本研究進(jìn)一步分析CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag單獨(dú)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)NSCLC患者合并惡性胸腔積液的預(yù)測(cè)價(jià)值，結(jié)果顯示，CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag聯(lián)合檢測(cè)的預(yù)測(cè)價(jià)值最佳，證實(shí)三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可作為預(yù)測(cè)NSCLC患者合并惡性胸腔積液的有效手段。然而本研究存在一定的局限性：①納入的病例數(shù)較少，可能影響結(jié)果；②患者發(fā)病至入院的時(shí)間不統(tǒng)一，造成血清樣本采集時(shí)間點(diǎn)不平行。未來(lái)可擴(kuò)大樣本量，規(guī)范研究對(duì)象的入組時(shí)間開展進(jìn)一步研究。

綜上所述，NSCLC合并惡性胸腔積液患者中CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag水平均異常升高，臨床醫(yī)師可通過(guò)加強(qiáng)監(jiān)測(cè)這三項(xiàng)指標(biāo)，有效預(yù)測(cè)惡性胸腔積液的發(fā)生。