神經纖毛蛋白-1在胃癌組織中的表達與臨床病理特征及預后相關性的meta分析

楊漢 顧玉蘭

常熟市第二人民醫院腫瘤科，常熟 215500

胃癌（gastric cancer，GC）是世界范圍內發病率第5的惡性腫瘤，且常常發現即為中晚期，預后不佳［1］。近年來，越來越多的胃癌相關標志物被發掘出來。神經纖毛蛋白-1（neuropilin-1，NRP-1）是一種跨膜糖蛋白，是血管內皮生長因子（VEGF）配體家族的同種型特異性受體。NRP-1可通過引發一系列細胞內信號級聯反應參與腫瘤發展并促進腫瘤轉移［2-3］。最近研究發現，NRP-1 的異常表達與腫瘤的不良預后有關（如乳腺癌、肝細胞癌、胰腺癌和結直腸癌）［4-7］。也有研究證明，NRP-1 在胃癌組織中過度表達，并且NRP-1可以作為生物標志物或治療靶點［8-9］。但其與胃癌的臨床病理特征之間及預后的相關性仍然存在爭議。本研究擬通過meta 分析來評估NRP-1 表達與胃癌臨床病理學特征及預后之間的關聯。

資料與方法

1、文獻檢索策略

檢索 PubMed、Web of Science、Embase、The Cochrance Library、中國知網、萬方、維普等數據庫公開發表的關于胃癌中NRP-1 表達的研究，檢索時間從建庫至2022 年4 月。中文文獻使用了以下檢索詞：胃癌、胃惡性腫瘤、NRP-1，英文文獻使用了以下檢索詞：gastric cancer、stomach cancer、gastric neoplasm、neuropilin-1、NRP-1，對符合條件的參考文獻進行手工檢索。

2、文獻納入及排除標準

（1）納入標準：①組織病理學診斷為胃癌患者，對照組為正常組織或癌旁組織；②用免疫組織化學法檢測胃癌患者NRP-1的表達；③報告患者的臨床病理特征，包括腫瘤長徑、TNM分期、分化程度、淋巴結轉移、遠處轉移等。（2）排除標準：①動物實驗或體外研究、綜述、病例報告、會議摘要等；②重復發表或數據缺失或質量評價過低的文獻；③沒有足夠的數據來計算NRP-1 表達與臨床病理特征的比值比（OR）的文獻；④檢測前已行放化療。

3、文獻篩選和數據提取

2名研究者根據納入和排除標準對研究進行了評估，分歧通過討論解決。從納入的研究中記錄了以下信息：第一作者、出版年份、國家、病例數檢測方法、臨床病理學特征、組織中NRP-1 的表達、結局指標［總生存（OS）］。納入研究的質量通過紐卡斯爾-渥太華量表（NOS）進行評估。

4、統計學方法

采用95%置信區間（CI）和OR評估胃癌中NRP-1 表達及其與臨床病理學特征的相關性，采用95%CI和風險比（HR）評估胃癌中NRP-1表達與預后的相關性，P＜0.05為差異有統計學意義。采用Q檢驗和I2統計檢驗確定研究異質性（P＜0.10 或I2＞50%表示差異有顯著異質性）。當不存在顯著異質性時，使用固定效應模型，否則使用隨機效應模型。發表偏倚采用Egger檢驗（P＜0.05為差異有統計學意義的發表偏倚）。使用軟件RevMan 5.3 和Stata 12 進行統計分析。

結 果

1、文獻篩選結果及納入文獻基本特征

從在線數據庫中共檢索到735 篇文獻。刪除重復、閱讀題目、摘要全文后共有13 項符合條件的研究［9-21］納入薈萃分析，具體見圖1。本薈萃分析中納入研究的特征總結具體見表1（所有13篇文獻均提示性別、年齡與胃癌NRP-1的表達無關，因此不再納入研究）。

圖1 文獻納入流程及結果

表1 13篇納入文獻的基本特征

2、meta分析結果

2.1、NRP-1 與腫瘤長徑 共有 6 篇文獻［12，15-16，19-21］評估了NRP-1 表達與腫瘤長徑之間的關系。組間存在異質性（P＜0.01，I2=85%），采用隨機效應模型，結果顯示NRP-1 表達與胃癌的腫瘤長徑之間無明顯關聯（腫瘤長徑≤5 cm 比＞5 cm：OR=0.40，95%CI0.15～1.10，P=0.08），見圖2。

圖2 胃癌組織神經纖毛蛋白（NRP）-1表達與腫瘤長徑關系的森林圖

2.2、NRP-1 與 TNM 分期 共有 12 篇文獻［9-12，14-21］評估了NRP-1 表達與胃癌TNM 分期之間的關系。組間存在異質性（P＜0.01，I2=88%），采用隨機效應模型，結果顯示Ⅰ期和Ⅱ期胃癌患者NRP-1的表達率遠低于Ⅲ和Ⅳ期胃癌患者（OR=0.37，95%CI0.18～0.77，P=0.008），見圖3。

圖3 胃癌組織神經纖毛蛋白（NRP）-1表達與TNM分期關系的森林圖

2.3、NRP-1 與分化程度 共有 12 篇文獻［9-16，18-21］評估了NRP-1表達與胃癌分化程度之間的關系。組間存在異質性（P=0.07，I2=41%），采用隨機效應模型，結果顯示胃癌高/中分化患者的NRP-1 表達率遠低于低分化組（OR=0.43，95%CI0.31～0.58，P＜0.001），見圖4。

圖4 胃癌組織神經纖毛蛋白（NRP）-1表達與分化程度關系的森林圖

2.4、NRP-1 與浸潤程度 共有 7 篇文獻［11-13，15-17，21］評估了NRP-1表達與胃癌浸潤程度之間的關系。組間存在異質性（P＜0.001，I2=92%），采用隨機效應模型，結果顯示NRP-1 表達與胃癌的腫瘤浸潤程度之間無明顯關聯（未侵出肌層對比侵出肌層：OR=0.44，95%CI0.15～1.35，P=0.15），見圖5。

圖5 胃癌組織神經纖毛蛋白（NRP）-1表達與浸潤程度關系的森林圖

2.5、NRP-1 與淋巴結轉移 共有 11 篇文獻［10-13，15-21］評估了NRP-1表達與淋巴結轉移之間的關系。組間存在異質性（P＜0.001，I2=83%），采用隨機效應模型，結果顯示無淋巴結轉移的胃癌患者的NRP-1表達率遠低于有淋巴結轉移患者（OR=0.32，95%CI0.16～0.63，P=0.000 9），見圖6。

圖6 胃癌組織神經纖毛蛋白（NRP）-1表達與淋巴結轉移關系的森林圖

2.6、NRP-1 與遠處轉移 共有 3 篇文獻［17，19，21］評估了NRP-1表達與胃癌遠處轉移之間的關系。組間異質性較小（P=0.30，I2=17%），采用固定效應模型，結果顯示無遠處轉移的胃癌患者的NRP-1 表達率遠低于有遠處轉移患者（OR=0.15，95%CI0.06～0.39，P=0.000 1），見圖7。

圖7 胃癌組織神經纖毛蛋白（NRP）-1表達與遠處轉移關系的森林圖

2.7、NRP-1與Lauren分型 共有2篇文獻［11，15］NRP-1表達與胃癌Lauren 分型之間的關系。組間異質性較小（P=0.27，I2=17%），采用固定效應模型，結果顯示NRP-1 表達與Lauren 分型之間無明顯關聯（Lauren 彌漫型對比腸型：OR=0.73，95%CI0.45～1.19，P=0.21），見圖8。

圖8 胃癌組織神經纖毛蛋白（NRP）-1表達與Lauren分型關系的森林圖

2.8、NRP-1 與預后 共有 5 篇文獻［12，16-18，21］NRP-1 表達與胃癌預后之間的關系。組間無異質性（P=0.79，I2=0%），采用固定效應模型，結果顯示NRP-1 高表達胃癌患者的不良預后有關（HR=1.66，95%CI1.25～2.22，P=0.000 5），見圖9。

圖9 胃癌組織神經纖毛蛋白（NRP）-1表達與預后關系的森林圖

3、發表偏倚分析

使用Egger 檢驗分析NRP-1 表達與胃癌腫瘤長徑（t=1.51，P=0.207）、TNM 分期（t=-0.66，P=0.527）、分化程度（t=-0.04，P=0.968）、浸潤程度（t=-0.30，P=0.775）、淋巴結轉移（t=-1.98，P=0.079）、遠處轉移（t=3.56，P=0.174）、OS（t=0.84，P=0.463）均發表偏倚。關于 Lauren 分型僅 2 篇研究涉及，未進行分析。

討 論

NRP-1 是一種跨膜糖蛋白，可作為信號素（SEMA）和VEGF的共同受體，是神經系統發育、血管生成、免疫和腫瘤發生的關鍵調節劑［22-25］。研究表明，NRP-1 通過與信號通路［細胞外信號調節激酶（ERK）1/2、P38 絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、信號轉導和轉錄激活因子5（Stat5）和蛋白激酶B（Akt）等］相互作用來調節腫瘤遷移、侵襲和血管生成［26-28］。上皮間質轉化（EMT）是腫瘤細胞侵襲和轉移的第一步。它表現為細胞極性和細胞粘附的喪失，促進腫瘤細胞的侵襲和轉移。最新研究發現NRP-1可以通過激活磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/Akt 信號通路誘導EMT 促進GC 細胞的侵襲和遷移［21］。

目前的臨床研究對于NRP-1與胃癌的臨床病理特征仍有爭議。本研究共納入13 項研究包括1 635 例胃癌患者，結果表明NRP-1 的表達與胃癌患者TNM 分期、分化程度、淋巴結轉移、遠處轉移有關，而與腫瘤長徑、浸潤程度、Lauren分型無關，與既往細胞學研究相符合。

已有研究表明NRP-1的表達可以作為胃癌治療療效及預后的預測因素［29-32］。如Ⅲ期隨機對照試驗AVAGAST 得出結論，NRP-1 可以作為預測晚期胃癌患者貝伐單抗治療療效的生物標志物［29］。本研究表明NRP-1 的高表達與胃癌的不良預后有關，納入的研究也大部分支持這個結論。然而，有一項研究的生存分析表明，NRP-1高表達和低表達兩組OS 比較差異無統計學意義（P=0.721），進一步根據組織學類型分為腺體形成（GF）和無腺體形成（nGF）型兩組，結果發現在GF組中NRP-1陽性的患者比陰性的患者OS更長，而nGF 組中則相反，且通過多變量分析在nGF 組中NRP-1 的表達是胃癌的獨立預后因素（HR=1.923；95%CI1.041～3.551）［17］。既往的研究均未有類似的分層，因此無法納入亞組分析，但提示我們今后關于胃癌NRP-1 的研究可以嘗試進行GF和nGF的分層，可能會得出不同的結論。

本研究存在的局限性：所有納入的研究均來自亞洲，大部分來自中國，且每項研究均未確定種族；雖然都使用免疫組化進行檢測，但不同研究之間難免存在差異如抗體來源、具體實驗步驟、稀釋濃度、結果判斷標準等，這也可能是異質性的來源之一；部分數據相對較少，如遠處轉移、Lauren分型等，結論的準確性可能受影響。

綜上所述，NRP-1 在胃癌組織中的表達與TNM 分期、分化程度、淋巴結轉移、遠處轉移有關。檢測NRP-1的表達可能有助于判斷胃癌患者的預后。需要更大樣本和不同種族的研究來進一步證實NRP-1表達與胃癌臨床病理特征及預后之間的關聯。