虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)在布魯菌病抗體檢測(cè)中的應(yīng)用對(duì)比

孔嘉名

（本溪市疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科，遼寧 本溪 117000）

布魯菌病又被稱作布病，主要由布魯氏菌感染引發(fā)所致，是全球廣泛流行的人畜共患病[1]。與牛、羊、豬有密切接觸史的屠宰人員和飼養(yǎng)員是布病高危群體[2]。若布病患者未得到及時(shí)、有效的治療，則會(huì)由急性轉(zhuǎn)為慢性，誘發(fā)隱性病灶，導(dǎo)致患者病情反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重影響患者身體健康和正常勞動(dòng)能力。早期診斷對(duì)合理制訂治療方案、改善布病患者預(yù)后具有重要意義[3]。傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)方法雖具有較高的準(zhǔn)確性，但耗時(shí)較長(zhǎng)，易延誤治療時(shí)機(jī)。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，布病血清學(xué)凝集試驗(yàn)成為臨床行之有效的檢測(cè)方法，具有操作便捷、快速、易于判斷的優(yōu)勢(shì)，但仍存在漏診情況。為探尋更加可靠的檢測(cè)方法。基于此，本研究旨在分析虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)在布病抗體檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017 年7 月至2019 年7 月本心中366 例待檢的疑似布病陽(yáng)性標(biāo)本，其中男208例，女158例；年齡25～73歲，平均（49.03±8.17）歲。患者均對(duì)本研究知情，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：疑似陽(yáng)性；均接受虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行布病抗體檢測(cè)。排除標(biāo)準(zhǔn)：依從性差，無(wú)法配合研究；血液系統(tǒng)疾病；臨床資料不完整。

1.2 方法 ①采集血液標(biāo)本，抽取患者晨起空腹靜脈血3～5 ml，促凝處理后2～8 ℃冷藏備用。②虎紅平板凝集試驗(yàn)，使用中國(guó)疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所提供的虎紅平板凝集抗原，于冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆茫瑴囟?～8 ℃。檢測(cè)時(shí)取血清標(biāo)本30 μl，滴于干凈玻片上，取等量虎紅平板凝集抗原，使其與玻片上血清充分混合，5 min后用裸眼判定結(jié)果。③試管凝集試驗(yàn)，使用中國(guó)疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所提供的布魯氏菌抗原液，于冰箱中保存?zhèn)溆茫瑴囟?～8 ℃。布魯氏菌抗原液用0.9%氯化鈉溶液稀釋10倍，取血清40 μl添加到第1試管中，試管內(nèi)含有0.9%氯化鈉溶液960 μl，均勻混合，取混合液500 μl添加到第2試管中，試管內(nèi)含有0.9%氯化鈉溶液500 μl，按照1∶1的比例進(jìn)行倍比稀釋，其余各5管以此類推。將稀釋10倍的布魯氏菌抗原液500 μl添加至各血清稀釋管中，混合均勻，常溫放置24 h觀察結(jié)果。根據(jù)《布魯菌病診斷標(biāo)準(zhǔn)》[4]判斷檢測(cè)結(jié)果，虎紅平板凝集試驗(yàn)陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)25%凝集（+）或以上；試管凝集試驗(yàn)陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：抗體滴度≥1∶100++。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)的檢測(cè)陽(yáng)性率。②以細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，分析并比較虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)在布病抗體檢測(cè)中的結(jié)果。③比較虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)兩種檢查在布病抗體檢測(cè)中的診斷效能，包括準(zhǔn)確度、敏感度、特異度、漏診率和誤診率，敏感度=真陽(yáng)性例數(shù)（/真陽(yáng)性+假陰性）例數(shù)，特異度=真陰例數(shù)（/真陰性+假陽(yáng)性）例數(shù)，準(zhǔn)確度=（真陽(yáng)性+真陰性）例數(shù)/總例數(shù)，漏診率=假陰性例數(shù)（/真陽(yáng)性+假陰性）例數(shù)，誤診率=假陽(yáng)性例數(shù)（/真陰性+假陽(yáng)性）例數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以“”表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]或率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果分析 兩種檢查方法檢測(cè)布病抗體的陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。

表1 虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果分析Table 1 Analysis of the detection results of Rose bengal plate agglutination test and standard tube agglutination test

2.2 虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)在布病抗體檢測(cè)中的結(jié)果比較 細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示，366 例疑似布病感染者中布病抗體檢測(cè)陽(yáng)性15 例，陰性351 例，陽(yáng)性率為4.10%（15/366）。以此為參照，虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)兩種檢測(cè)方式診斷布病抗體檢測(cè)的結(jié)果，見(jiàn)表2。

表2 虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)在布病抗體檢測(cè)中的結(jié)果比較（n）Table 2 Comparison of results of Rose bengal plate agglutination test and standard tube agglutination test in the detection of brucellosis antibody(n)

2.3 虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)檢測(cè)布病抗體的診斷效能評(píng)價(jià) 虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)布病抗體的敏感度高于試管凝集試驗(yàn)，漏診率低于試管凝集試驗(yàn)（P＜0.05）；試管凝集試驗(yàn)檢測(cè)布病抗體的特異度高于虎紅平板凝集試驗(yàn)，誤診率低于虎紅平板凝集試驗(yàn)（P＜0.05）；兩種檢測(cè)方法的檢測(cè)準(zhǔn)確性比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.612，P=0.433）。見(jiàn)表3。

表3 虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)檢測(cè)布病抗體的效能評(píng)價(jià)[%（n/N）]Table 3 Evaluation of the efficacy of tiger red plate agglutination test and tube agglutination test for detecting brucellosis antibodies[%(n/N)]

3 討論

布病起病緩慢，感染后患者缺乏特異性癥狀，可表現(xiàn)為亞急性、急性、慢性等多種類型，易出現(xiàn)誤診、漏診情況，延誤患者病情，影響預(yù)后[5-6]。由于細(xì)菌培養(yǎng)具有較高的檢驗(yàn)條件要求，且檢驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)，因此，多采用血清學(xué)方法進(jìn)行布病檢測(cè)。相關(guān)報(bào)道顯示，虎紅平板凝集試驗(yàn)快速易行，試驗(yàn)簡(jiǎn)便，有助于篩查布病患者；試管凝集試驗(yàn)是診斷布病的常用手段，具有較高的特異度和準(zhǔn)確度[7-8]。目前，虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)已被列入國(guó)家布病診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中虎紅平板凝集試驗(yàn)陽(yáng)性即可判定為可疑病例，試管凝集試驗(yàn)滴度1∶100++及以上即可判斷為陽(yáng)性病例，可作為早期篩查布病的重要依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)檢測(cè)布病抗體的準(zhǔn)確度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示兩種檢測(cè)方法在布病檢測(cè)中均具有較高的準(zhǔn)確性，診斷結(jié)果相近。其中虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)布病抗體的敏感度高于試管凝集試驗(yàn)，試管凝集試驗(yàn)的特異度高于虎紅平板凝集試驗(yàn)，可改善誤診情況，兩種檢查方法互為補(bǔ)充，能為醫(yī)師鑒別布病感染病例提供可靠的參考依據(jù)。分析后可知，盡管虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)兩種方法在布病抗體檢測(cè)中具有較高的準(zhǔn)確度，但兩種方法檢測(cè)的抗體類型各異。其中虎紅凝集抗原呈酸性，pH值3.6～3.9，而在酸性條件下會(huì)抑制IgM的活性，因此，該方法主要用于篩查IgG類抗體，試管凝集試驗(yàn)則主要以IgM 類抗體檢測(cè)為主。動(dòng)物和人在感染布病后，體內(nèi)均會(huì)出現(xiàn)IgM、IgG 抗體，但I(xiàn)gM 水平隨著病情的發(fā)展而快速下降，尤其是在慢性布病患者的血清中，IgM 水平呈低表達(dá)狀態(tài)，因此，通常需依靠IgG檢出此類病例。本研究中兩種方法的檢測(cè)陽(yáng)性率存在一定差異，其中虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)的陽(yáng)性率為6.01%，試管凝集試驗(yàn)的陽(yáng)性率為4.64%，證實(shí)了這一觀點(diǎn)。結(jié)合本研究結(jié)果表明，虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)成本較低，操作便捷，僅需依賴肉眼即可明確診斷結(jié)果，具有診斷快速、易于判斷、敏感度高的優(yōu)點(diǎn)，在布病的流行病學(xué)調(diào)查和大范圍篩查中發(fā)揮著重要的作用。臨床中為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，建議急性布病患者2 周后行血清學(xué)復(fù)查，以明確診斷結(jié)果，減少誤診，也可對(duì)虎紅平板凝集試驗(yàn)陽(yáng)性的樣本進(jìn)行試管凝集試驗(yàn)復(fù)查，以提高布病抗體檢測(cè)的診斷效能，進(jìn)一步改善漏診、誤診情況[9-11]。

綜上所述，在布病抗體檢測(cè)中應(yīng)用虎紅平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)均可有效檢出布病患者，二者的診斷準(zhǔn)確性相當(dāng)，其中虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)布病抗體的敏感度更高，漏診率更低，試管凝集試驗(yàn)的特異度更高，誤診率更低，兩種檢測(cè)方法互為補(bǔ)充，可為醫(yī)師診斷布病提供可靠參照，具有重要的應(yīng)用與推廣價(jià)值。