蘇格木勒-4精油多成分-多靶點-多途徑抗失眠作用機制研究*

楊 蕊，果佳霖，孫利東，白東浩，馬麗杰，靳尚武

（1.內蒙古醫科大學，內蒙古 呼和浩特 010000；2.鄂爾多斯市中心醫院，內蒙古 鄂爾多斯 017000；3.鄂爾多斯市第四人民醫院，內蒙古 鄂爾多斯 017000）

失眠，是由于多方面的因素造成心神失養或心神不安，從而導致經常不能獲得正常睡眠的一種病癥[1]。如果不給予適當的治療措施，失眠會給患者帶來長期的痛苦，甚至引起患者對安眠藥物的依賴。為了降低西藥治療失眠的一系列副作用，有多層次、多環節、多靶點藥理學作用特點的蒙藥成為重要選擇之一。蒙藥蘇格木勒-3湯為蒙醫臨床常用主治失眠的方劑，始載于《四部醫典》[2]。本研究使用的藥物是經過蒙醫查干夫教授改良后的配方，名為蘇格木勒-4。在原方（白豆蔻15 g，白苣勝10 g，蓽菝5 g）的基礎上，添加了輔助藥物炒酸棗仁15 g[3]。炒酸棗仁味甘、性平，可幫助其他藥材相互中和，更加協調地發揮作用，使蘇格木勒-4可以作為治療失眠、安神的良藥[4-5]。本研究應用GC-MS分離鑒定蘇格木勒-4精油主要化學成分，結合網絡藥理學的方法建立成分-靶點-失眠交互作用網絡，同時通過動物實驗驗證蘇格木勒-4對失眠相關神經遞質的影響，闡明蘇格木勒-4精油抗失眠有效成分和多成分、多途徑、多靶點的作用機制，旨在為使用蒙藥治療失眠提供更為廣泛的思路。

1 材 料

1.1 藥物白豆蔻為姜科植物白豆蔻Amomum kravanh Pierre ex Gagnep和爪哇白豆蔻Amomum compactum Soland.ex Maton的果實，批號：20160801；白苣勝為菊科植物萵苣Lactuca sativa L.的種子，批號：20160401；蓽茇為胡椒科（Piperaceae）胡椒屬（Piper）植物蓽茇Piper longum L.的干燥近成熟或成熟果穗，批號：20170101；以上3種藥材均購自安徽和濟堂中藥飲片有限公司。酸棗仁是鼠李科植物酸棗Ziziphus jujuba Mill.var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chow的干燥成熟種子（批號：20110103，安國市廣濟堂藥業有限責任公司）；安神補腦口服液（批號：1611232，吉林敖東延邊藥業股份有限公司）；對氯苯丙氨酸（PCPA）（批號：SHBH7873，美國Sigma-Aldrich公司）。

1.2 儀器與試劑30目標準檢驗篩（紹興市上虞華豐五金儀器有限公司）；DT-200電子天平、DZKW-S-8電熱恒溫水浴鍋、FZ102微型植物試樣粉碎機、DZTW型500ml調溫電熱套、DZF-2B真空干燥（北京市永光明醫療儀器有限公司）；GCMSQP2010UItra型氣相色譜質譜聯用儀（日本島津）；R-215型旋轉蒸發儀（瑞士Buchi公司）；二氯甲烷（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；無水硫酸鈉（天津市北聯精細化學品開發有限公司）。

5-羥色胺對照品（5-HT）（批號：SLBP9361V）、γ-氨基丁酸對照品（GABA）（批號：BCBN3020V）、多巴胺對照品（DA）（批號：BCBV2562）和內標3，4-二羥基苯甲酸（DHBA）（批號：MKBS7646V）均購自美國Sigma-Aldrich公司。

1.3 數據庫與軟件中藥藥理學平臺TCMSP數據庫（http://tcmspw.com/tcmsp.php）；Uniprot數據庫（https://www.uniprot.org）；GeneCards數據庫（https://www.genecards.org）；Venny 2.1作圖平臺；Cytoscape軟件；STRING平臺（https://string-db.org）；R語言；PDB數據庫（https://www.rcsb.org）；PubChem數據庫（https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov）；PyMOL軟件、ChemBio3D及AutoDock vina軟件。

1.4 實驗動物SPF級健康雄性ICR小鼠40只，體質量18～22 g，由斯貝福（北京）生物技術有限公司提供，動物生產許可證號：SCXK（京）2016-0002。小鼠飼養在室內溫度（22±2）℃、相對濕度（50±10）%的動物實驗室內，自然光照，晝夜交替，自由攝食飲水，實驗結束后脫頸處死全部小鼠。動物實驗經內蒙古醫科大學倫理委員會批準，該實驗所有動物操作均符合動物實驗倫理要求。

2 方 法

2.1 樣品的制備

2.1.1 蘇格木勒-4精油的提取 將4種藥物分別用粉碎機粉碎，過30目篩，備用。稱取1劑蘇格木勒-4（白豆蔻15 g，白苣勝10 g，蓽茇5 g，炒酸棗仁15 g），加入360 mL去離子水，置于圓底燒瓶中，浸泡1 h。連接同時蒸餾萃取裝置，使用電熱套加熱使料液持續沸騰，另一個燒瓶中加入50 mL二氯甲烷保持在45℃，連續萃取1.5 h，收集揮發油部分，緩慢加入適量無水硫酸鈉，-20℃冷凍干燥過夜的溶液。

2.1.2 蘇格木勒-4灌胃液的配制 稱取10劑蘇格木勒-4共450 g，加水4 500 mL，浸泡1 h后煮沸30 min，用紗布濾過，藥渣再加水2 250 mL煮沸20 min后濾過，將兩次濾液合并，用旋轉蒸發儀、減壓干燥器濃縮至浸膏狀，得浸膏58 g。使用時用蒸餾水稀釋成相應生藥濃度的溶液。

2.1.3 PCPA溶液的配制 稱取PCPA粉末6 g溶于生理鹽水100 mL，加入兩滴2%聚山梨酯-80助溶，配制成質量濃度為0.06 g/mL的混懸液。

2.2 網絡藥理學預測

2.2.1 精油GC-MS分析條件HP-5毛細管柱（30 mm×0.25 mm，0.25μm），載氣使用氦氣，樣品進入毛細柱管口的溫度為300℃，氣體流量為1 mL/min；升溫程序設置為在60℃下停留3min，依次設置5℃/min升溫速度升溫至120℃，10℃/min的速度升溫至200℃，10℃/min升溫速度至280℃，停留3 min，按照10∶1的分流比、1 μL的進樣數量、1 mL/min的進樣流速使樣品分流進入。

在EI的電離方式下，設置200℃的離子源進行電離，以及1 482 V的倍增電壓和34.6 μA發射電流，出口溫度為300℃，在35～550 m/z的范圍下掃描，通過NIST譜庫進行檢索。

2.2.2 構建蛋白相互作用關系（PPI）網絡圖 通過GC-MS技術獲得蘇格木勒-4精油成分的名稱，在中藥系統藥理學分析平臺（TCMSP）數據庫依次檢索，將精油中沒有靶點的成分去除，得到有靶點信息的有效成分及其全部靶點名稱。使用Uniprot數據庫，矯正已知靶點名稱。借助GeneCards數據庫搜索“失眠”有關的基因和靶點蛋白。在Venny 2.1作圖平臺上分別輸入蘇格木勒-4和已知的失眠靶點，繪制韋恩圖，獲得藥物有效成分和失眠靶點的交集。

借助Cytoscape 3.7.1軟件及Network Analyzer功能，構建出有效成分、疾病、靶點之間的聯系，繪制網絡關系圖，對蘇格木勒-4精油中已知的主要成分進行系統分析。

2.2.3 構建蛋白相關作用關系（PPI）網絡圖 在STRING數據庫中搜索藥物與失眠之間共同存在靶點，以置信度分數〉0.4作為限制條件進行篩選，繪制蛋白相互作用的PPI網絡，并以蛋白間的關聯度排列順序。

2.2.4 通路富集分析 在R軟件中，安裝運行Bioconductor軟件包“org.Hs.eg.db”，將藥物和失眠的共同靶點轉換成entrezID形式，在R軟件中安裝clusterProfiler安裝包，將轉換后的entrezID形式輸入，以P〈0.05，Q〈0.05進行基因本體論（GO）和基因百科全書（KEGG）功能的分析，將所得到的結果以條形統計圖的形式輸出。

2.2.5 分子對接 選取核心靶點GABRA2和度值較高的6種成分進行分子對接檢驗，利用PDB蛋白質數據庫（http://www.pdb.org/）下載這6種蛋白質對應的晶體結構，在Autodock 4.2.6軟件中進行驗證分析，進行活性化合物成分與核心靶點的分子對接。

2.3 動物神經遞質檢測實驗

2.3.1 分組、造模與給藥40只ICR雄性小鼠適應性喂養7 d，將小鼠按體質量隨機分為正常組、模型組、安神補腦口服液組及蘇格木勒-4組，每組10只。除正常組外，其余組小鼠每天08：00：00腹腔注射PCPA混懸液，1 mL/100 g，1次/d，連續2 d，正常組小鼠腹腔注射等體積生理鹽水。小鼠出現自發性活動減少，唇部黏膜發白，被毛干枯毛躁，精神不振且處于高度緊張狀態，易受到外界環境的驚嚇，飲水量增加伴隨食欲不振等癥狀即提示造模成功。于第3天開始每天08∶00∶00灌胃給藥，安神補腦口服液組小鼠灌胃給予安神補腦口服液，1.3 mL/100 g，蘇格木勒-4組小鼠灌胃給予蘇格木勒-4溶液，0.26 g/100 g（以生藥含量算），正常組和模型組小鼠給予同體積的蒸餾水灌胃，1次/d，連續灌胃7 d。各組小鼠每天灌胃前均禁食不禁水12 h。

2.3.2 腦組織樣品采集處理 第7天給藥結束24 h后，小鼠脫頸處死，斷頭取腦，在冰盤上分離出大腦皮層，放入-80℃冰箱。將腦樣品稱重并使用組織勻漿器在冰冷的1.89%甲酸水溶液中以10 mL/g組織的濃度勻漿，4℃14 000 r/min離心40 min，取上清液稀釋100倍。取離心管數支，加入稀釋后的腦組織上清液45 μL并以9∶1的體積比加入內標DHBA，然后加入5 μL的標準系列液。將含有1%甲酸的乙腈（ACN）以4∶1的體積比加入到上清液中，并在4℃條件下14 000 r/min離心5 min。取上清液，過0.22 μm的濾膜后將樣品轉移到進樣瓶中，等待進行LC-MS/MS測量。

2.3.3 色譜-質譜聯用條件0.2%甲酸（A）和乙腈（B）作為流動相。梯度洗脫程序包括0～2.5 min，5%B，2.5～4 min，5%～20%B；4～7 min，20%～60%B；7～7.5 min，60%～5%B；7.5～10 min，5%B，流速：0.2 mL/min，柱溫：30℃，進樣量：3 μL。

電離方式為ESI+，霧化氣為氮氣，碰撞氣為氬氣，DL管溫度為250℃，加熱氣流量為10 L/min，霧化氣流量為3 L/min，加熱模塊溫度為400℃，離子源溫度為300℃，檢測方式為MRM。

2.3.4 標準溶液和質量控制溶液的配制

2.3.4.1 標準品儲備液的制備 分別稱取5-HT、DA對照品1.0 mg，GABA對照品10 mg，各加入溶劑（1.89%甲酸-甲醇，休積比為7∶3）溶解，并分別定容至10 mL，制得0.1 mg/mL的5-HT、0.1 mg/mL的DA和1 mg/mL的GABA標準品儲備液。

2.3.4.2 混合標準溶液的制備 將精密量取的標準儲備液作為溶質，在容量瓶中混勻后，加溶劑（1.89%甲酸-甲醇，體積比為7∶3）定容至100 mL，制得分別為181.82、90.91、45.45、22.73、11.36、5.682、2.84 ng/mL的5-HT和DA混合標準溶液，以 及18 181.82、9 090.91、4 545.46、2 272.73、1 136.36、568.18、284.09 ng/mL的GABA的混合標準系列溶液，保存于4℃冰箱中備用。

2.3.4.3 質量控制（QC）液的制備 將適量精密量取的標準儲備液作為溶質，加溶劑（1.89%甲酸-甲醇，體積比為7∶3）定容至100 mL，可以得到低、中、高3種不同濃度的溶液，用于配制QC溶液。溶液濃度分別如下：5-HT和DA均分別為181.82、45.45、5.682 ng/mL；GABA為18 181.82、4 545.46、568.18 ng/mL，保存于4℃冰箱中備用。

2.3.5 內標溶液的制備 將約10.0 mg的DHBA對照品作為溶質，溶于溶劑（1.89%甲酸-甲醇，體積比為7∶3）中后定容至10 mL，得到的內標儲備液濃度約為1.0 mg/mL。加入溶劑直至適量內標儲備液定容至100 mL，制得濃度為3.6 μg/mL的DHBA內標標準溶液，保存于4℃冰箱中備用。

2.3.6 統計學方法 使用SPSS 22.0軟件處理實驗數據，計量資料以（±s）表示。經檢驗數據方差齊，組間比較采用單因素方差分析（One-Way ANOVA），兩兩比較采用LSD檢驗。P〈0.05為差異有統計學意義。

3 結 果

3.1 網絡藥理學預測結果

3.1.1 GC-MS分析結果 根據各色譜峰相應的質譜圖以相關文獻進行匹配篩選。再將各色譜圖進行處理，去電溶劑峰，再通過歸一化的方法得出各化學成分含量較高的10個化學成分。（見圖1）各成分在數據庫中搜索得到108個靶點，去重復后得到39個靶點。（見表1）

表1 蘇格木勒-4精油組分信息

圖1 蘇格木勒-4精油質譜圖

3.1.2 藥物精油成分-疾病共同靶點的篩選 在GeneCards數據庫搜索“失眠”，共得到疾病靶點2 599個（重復除外）。利用Venny 2.1在線軟件繪制成韋恩圖，共得到19個共同靶點。（見圖2）

圖2 蘇格木勒-4精油成分靶點與失眠相關基因交集韋恩圖

3.1.3 蘇格木勒-4精油成分-靶點網絡模型的構建 在TCMSP數據庫檢索蘇格木勒-4精油的10種主要成分，將39個潛在靶點輸入到Cytoscape軟件中繪制網格，得到“藥物-成分-靶點”相互作用的網絡圖。藥物用橢圓標記，蘇格木勒-4精油中的10種活性成分用菱形標記，39個靶點用長方形標記，直線表示化合物與靶點之間的相互作用關系。（見圖3）

圖3 蘇格木勒-4精油-活性成分-靶點網絡圖

3.1.4 靶點PPI網絡分析結果 所得PPI網絡中包含19個節點和94條邊。PPI網絡平均Degree為4.9，度值排名前5位的是SLC6A3、GABRA2、GRIA2、GABRA1和GABRA6。（見圖4）

圖4 蘇格木勒-4精油成分與失眠蛋白質相互作用核心網絡圖

3.1.5 GO富集分析R語言運行后，將19個共同靶點進行GO分析提取出生物過程、細胞組分及分子功能3個部分。結果表明，交集基因集合會匯合到54條生物學過程通路中，主要有氯離子跨膜轉運活性（chloride transmembrane transporter activity）、神經遞質受體的活動（neurotransmitter receptor activity）、無機陰離子轉運體活性（inorganic anion transmembrane transporter activity）、參與突觸后膜電位調節的神經遞質受體活性（neurot ransmitter receptor activity involved in regulation of postsynaptic membrane potential）、遞質門控離子通道活性（transmitter-gated ion channel activity）、突觸后神經遞質受體活性（postsynaptic neurotransmitter receptor activity）、細胞外配體門控離子通道活性（extracellular ligand-gated ion channel activity）、被動跨膜轉運體活性（passive transmembrane transporter activity）等。（見圖5）

圖5 GO分析生物過程

3.1.6 KEGG富集分析 在R語言的運行下，19個藥物與疾病的靶點會得到14個KEGG通路，P表示富集顯著性，且顏色越紅，表示顯著性越強。結果表明共同靶點主要富集在神經活性配體與受體之間的相互作用（Neuroactive ligand-receptor interaction）、尼古丁成癮（Nicotine addiction）、逆行內源性大麻素信號（Retrograde endocannabinoid signaling）、味覺轉導（Taste transduction）、GABA能突觸（GABA ergic synapse）、嗎啡成癮（Morphine addiction）、鈣信號通路（Calcium signaling pathway）、可卡因成癮（Cocaine addiction）、苯丙胺成癮（Amphetamine addiction）、血小板激活（Platelet activation）、多巴胺能突觸（Dopaminergic synapse）、cGMP-PKG信號通路（cGMP-PKG signaling pathway）。（見圖6）

圖6 KEGG通路分析

3.1.7 分子對接驗證結果 使用Autodock 4.2.6軟件，得到關鍵靶點GABRA2與蘇格木勒-4精油中6個有效成分結合能。（見表2）關鍵靶點GABRA2與活性成分結合能≤-5.0 kcal/mol，展現出較好的結合能力，說明關鍵靶點與成分之間的結合力較好。將結合能為-7.2 kcal/mol的石竹烯與GABRA2靶點對接結果使用PyMOL軟件進行可視化分析。（見圖7）

表2 蘇格木勒-4精油部分有效成分與關鍵靶點分子對接信息表

圖7 石竹烯與GABRA2的相互作用

3.2 小鼠大腦皮層神經遞質檢測結果

3.2.1 線性關系考察 以各神經遞質的質量濃度為橫坐標，被測物與內標峰面積比為縱坐標，進行線性回歸，結果見表3。

表3 4種神經遞質的線性方程

3.2.2 準確度和精密度 精密量取45 μL被稀釋過后的腦組織上清液，分別加入5 μL內標溶液和5 μL高、中、低3個濃度的QC溶液，配制成高、中、低3個濃度水平的樣品，按照“2.3.2”項下方法進行預處理。所有濃度都要對6個樣本展開分析，對本方法的精密度RSD和準確度RE進行計算，結果見表4。

表4 4種神經遞質的精密度、準確度和回收率

3.2.3 穩定性 取“2.3.4”項下配制的混合對照品溶液，于4℃保存，分別在0、6、12、24 h進樣分析，結果表明于4℃條件下24 h內穩定性較好。取腦樣品3份，于-80℃保存，每天測定1份，比較各個神經遞質在不同時間點的含量變化，表明腦樣品于4℃條件下在24 h內較好，存于-80℃的樣品較穩定，在3周內無明顯降解。

3.2.4 各組小鼠大腦皮層5-HT、GABA、DA含量比較 與正常組比較，模型組小鼠大腦皮層DA含量明顯升高（P〈0.01），5-HT、GABA含量均明顯降低（P〈0.01），提示造模成功。與模型組比較，蘇格木勒-4組小鼠大腦皮層DA含量明顯降低（P〈0.01），5-HT、GABA的含量均明顯升高（P〈0.01）；與模型組比較，安神補腦口服液組小鼠大腦皮層DA含量明顯降低（P〈0.01），而5-HT和GABA含量與模型組比較，差異均無統計學意義（P〉0.05）。（見表5）

表5 各組小鼠大腦皮層5-HT、GABA、DA含量比較（±s，μg/mL）

表5 各組小鼠大腦皮層5-HT、GABA、DA含量比較（±s，μg/mL）

注：與正常組比較，aP〈0.01；與模型組比較，bP〈0.01

組別 動物數（只）給藥劑量 5-HT GABA DA正常組 10 - 0.409±0.063 276.841±54.019 0.421±0.050模型組 10 - 0.293±0.011a 57.352±8.003a 0.959±0.434a安神補腦口服液組10 1.30 mL/100 g 0.306±0.015 110.705±25.273 0.414±0.060b蘇格木勒-4組 10 0.26 g/100 g 0.449±0.087b 568.354±92.052b 0.397±0.046b F 21.840 174.427 88.408 P 0.000 0.000 0.000

4 討 論

蒙藥具有多成分、多靶點、多途徑的特點，應探索蒙藥中可以代表藥效的多個有效成分。本研究通過GC-MS技術確定蘇格木勒-4精油中的成分，再結合網絡藥理學分析，為尋找蘇格木勒-4精油治療失眠的多種活性成分提供了一定的理論依據，而小鼠腦組織神經遞質的檢測實驗進一步驗證了蘇格木勒-4精油治療失眠的相關作用機制。本研究探索的10種潛在活性成分，包括β-蒎烯、桉油精、芳樟醇、4-松油醇、L-α-松油醇、乙酸松油酯、石竹烯、大牛兒烯D、β-紅沒藥烯、乙酸橙花叔醇酯。其中，芳樟醇不僅具有緩解抑郁的作用[6]，還可以鎮靜安眠[7]。以往的研究[8]中，已經證實芳樟醇對中樞神經系統有安撫作用，如促進睡眠、減少驚厥和降低體溫等。蒎烯可以緩解壓力[9]。石竹烯被認為是催眠的活性成分[10]。研究證實，薰衣草精油中乙酸松油酯有較好的助眠作用[7]。

基于網絡藥理學構建的蘇格木勒-4精油活性成分-作用靶點網絡圖顯示，蘇格木勒-4精油治療失眠是通過多種成分作用于多個靶點產生效應。其中GABRA1、GABRA2、PTGS2、camC、NCOA2、SLC6A2、CHRM2、GABRA6、CHRM1、GABRA5、IL-6等為主要靶蛋白。NIWA Y[11]等通過實驗發現毒蕈堿乙酰膽堿受體CHRM1和CHRM3對睡眠調節至關重要，尤其是對快速眼動睡眠。而CHRM2作為毒蕈堿乙酰膽堿受體，同樣可對睡眠進行調節[12]。GO分析表明蘇格木勒-4精油活性成分抗失眠的作用機制主要與配體門控氯通道、神經遞質受體的活動、參與突觸后膜電位調節的神經遞質受體活性、遞質門控離子通道活性、突觸后神經遞質受體活性等多個生物過程有關。KEGG分析通路顯示，蘇格木勒-4精油活性成分通過調控神經活性配體-受體相互作用、尼古丁成癮、逆行內源性大麻素信號、味覺轉導、GABA能突觸、多巴胺能突觸、鈣信號通路等方法來治療失眠的癥狀。神經活性配體-受體相互作用通路中受體與配體之間相互作用信號和神經功能相關，該通路與神經遞質傳遞在失眠的治療過程中發揮著重要的作用[13-14]。共11個基因富集在該通路上（CHRM1、GABRA6、GABRA1、GABRA2、GABRA5、ADRA1A、NR3C1、GABRA3、ADRA1B、F2、GRIA2），大致可分為γ-氨基丁酸、多巴胺、腎上腺素α/β受體和乙酰膽堿類受體，是臨床上常用的鎮靜、抗焦慮及抗驚厥藥物的靶受體。其中GABRA1、GABRA2、GABRA6、GABRA5基因均編碼γ-氨基丁酸（GABA）受體[15]。GABA是哺乳動物大腦中主要的抑制性神經遞質，它作用于GABA-A受體，屬于配體門控氯通道。這些通道的氯離子電導可以通過結合GABA-A受體的苯二氮艸卓類藥物來調節。另外，分子對接發現蘇格木勒-4精油中β-蒎烯、桉油精、方樟醇、4-松油醇、L-α-松油醇、石竹烯均與GABRA2有較好結合能力，而且動物實驗中蘇格木勒-4組小鼠大腦皮層GABA含量明顯高于模型組，說明蘇格木勒-4精油多個成分可以通過調控配體門控氯通道和GABA能突觸通路來發揮抗失眠作用。

DA是腦內非常重要的神經遞質，可以促使清醒過程的進行[16]，且有動物實驗證明大腦DA含量降低后可改善大鼠睡眠紊亂的癥狀[17]。本研究中蘇格木勒-4組小鼠大腦皮層DA含量下降，故蘇格木勒-4精油的抗失眠機制為下調DA含量，使覺醒減少，從而達到增加睡眠時間的效果。5-羥色胺是參與睡眠、食欲、焦慮及抑郁等生理功能活動中很重要的神經遞質。研究報道，薰衣草精油中主要生物活性成分芳樟醇和乙酸松油酯[18]，可以通過調控5-HT神經遞質的傳遞發揮其抗焦慮作用[19]。蘇格木勒-4精油中的有效成分也包括芳樟醇和乙酸松油酯，且蘇格木勒-4組小鼠大腦皮層中5-HT含量增加，說明蘇格木勒-4精油能通過改變大腦皮層中5-HT含量來發揮抗失眠作用。

綜上所述，將GC-MS檢測結果和網絡藥理學方法相結合，對蘇格木勒-4精油的化學成分和作用機制進行預測分析，再結合小鼠大腦皮層神經遞質實驗可知蘇格木勒-4精油中多種成分都涉及與睡眠相關的神經遞質靶點。蘇格木勒-4精油活性成分治療失眠存在多成分、多靶點、多途徑的復雜網絡機制，為下一階段的相關研究提供了方向與參考。