綿羊人工授精技術流程和操作要點

王鑫悅

（新疆昌吉市佃壩鄉畜牧獸醫工作站 新疆昌吉 831100）

綿羊人工授精技術是指利用輸精器械，將采集到的符合輸精要求的公羊精液通過一定比例的稀釋后，輸入到發情母羊子宮頸口內，實現母羊受孕的非自然交配配種技術。綿羊人工授精技術可通過操作前的場地、器械消毒減少因自然交配出現的交叉感染，降低母羊陰道、子宮炎癥的發病率。同時，人工授精技術可以通過人為控制輸精量，提高精子利用率。對綿羊良種繁育來講，人工授精技術可以提高綿羊譜系的可靠性，加速綿羊品種改良工作進程。但由于該技術容易受人為因素的影響，出現受胎率低問題。因此工作人員要熟練掌握綿羊人工授精操作流程，注意到各個操作環節的技術要點，進而保障人工授精受胎率。

1 場地準備

綿羊人工授精需要配置專門的房間，一般包括采精室、精液品質檢測室、輸精室，其面積分別控制在18～22、9～11 和18～22m，使用時的溫度分別控制在18±2、20± 2 和18± 2℃。

2 器械衣物準備

2.1 物品標簽

精液品質檢測室內配有專門的器械柜櫥、藥品柜櫥、操作臺（含防塵罩）、顯微鏡等。藥品柜櫥內的所有藥品、試劑都需要標注名稱、配置時間、濃度、有效期限等信息，每次使用前要核實信息。

2.2 器械清洗

采精前要準備好采精工具，為防交叉感染，每個公羊使用的假陰道、采精杯（或集精瓶）是不同的，要根據采精公羊的數量多準備出1～2 套。首先對采精的用具進行清洗，清洗時可用洗衣粉浸泡30min 后再用毛刷反復洗刷，用清水沖洗殘留物或泡沫，直到無污物后再用蒸餾水沖洗2～3 次，然后將這些器械置于無菌的紗布上，自然晾干。

注意事項：假陰道內部的彎曲結構可用試管刷清洗，保障無殘留物，清洗過程中檢測是否有漏水問題，若有漏水需要更換。

1.3 器械消毒

①將假陰道、采精杯、輸精器、溫度計和相關的玻璃器皿可以浸泡到75%酒精內，或用75%酒精棉球反復擦拭，待酒精自然揮發后，依次用蒸餾水、生理鹽水各浸泡2 次；②金屬開腔器可用75%酒精棉球反復擦拭2 次后置于4℃蒸餾水內，然后再用生理鹽水浸泡的無菌抹布反復擦拭2 次；③采集或輸精用的衛生紙可用錫箔紙包好后，高壓滅菌后置于50℃烘箱自然烘干；④操作人員的衣物、操作中使用的毛巾都需要高壓滅菌后，通過烘干處理再使用。

3 精液采集方法

3.1 采精室衛生要求

采精室內不得進行抽煙、進食、飲酒等活動，采精前3d 用高壓水槍全面沖刷地面，通風讓地面干燥，使用前1h 打開紫外消毒燈，消毒30min 后再使用。采集過程中切勿多人圍觀、吵鬧等，操作人員工作前不得有抽煙、飲酒或進食任何帶刺激味道的食物。

3.2 采精前準備

1）母羊準備。對發情母羊的后軀干進行清水沖洗。

2）公羊準備。公羊牽入到采精室后，對其生殖器官進行清水清潔，此時要讓公羊和母羊保持距離，切勿直接爬跨，然后逐步靠近來刺激公羊產生性欲。

3）物品準備。準備好已消毒的假陰道、采精杯、凡士林、水盆、溫開水等。

假陰道處理：①注水打氣，將開水倒入到盆內，水溫至45℃時將溫水注入到假陰道的夾層內，假陰道內部溫度控制在39±2℃，注入到外殼和內胎容積的1/2 處即可，用打氣槍注入適量空氣，若假陰道另一端出現三塊相互擠壓的凸起停止打氣，關閉氣咀活塞；②潤滑，用對假陰道的內胎和陰莖進口處涂抹適量的凡士林，深度一般到假陰道的1/2 處，采精杯處不能涂抹上凡士林；③檢測內壓，涂抹凡士林后再次檢查假陰道的內壓，若不足可再注入適量空氣。

公羊包皮清潔：用清水沖洗公羊包皮處的污物，然后用無菌干抹布擦干。

3.3 采集操作

將母羊固定在保定架上，牽入主配公羊，待公羊有爬跨動作時，采集人員以半蹲的姿勢處于母羊后方，右手橫拿假陰道，假陰道的陰莖進口處朝下，公羊爬跨時左手輕輕抓住公羊的陰莖根部，公羊伸出陰莖時迅速且輕柔地將陰莖導入到假陰道內。一般陰莖在假陰道內抽搐幾秒后就會射精，整個射精過程不到1min。待公羊射精結束后，采集人員將假陰道豎起，將采集杯的一面向下，放出空氣，蓋好采集杯杯蓋，在采精杯上標記公羊編號，置于20～30℃且無太陽直射的地方，然后進行下一只公羊采集操作。

3.4 注意事項

①采集過程要快速、輕柔，減少對公羊的驚嚇刺激；②采集人員采集時切勿手碰公羊的龜頭；③采集后要將假陰道內的水放出，浸泡到含有洗衣粉的溫水中，待采集結束后立即沖洗。④成年種公羊每天最多可采集1～2 次，連續采精3d 后休息1d。公羊配種期間要提高日糧中蛋白飼料供給量，每天補充2 個雞蛋。配種結束后逐漸降低精料飼喂量和營養水平。

4 精液品質的檢查方法

4.1 檢測室要求

精液檢測室要求清潔，工作時的環境溫度維持在20± 2℃，工作時避免強燈照射。

4.2 精液量、色澤、氣溫

公羊一次的射精量約為0.5～2mL，精液由精子（30%）和精清（70%）組成。

正常公羊精液顏色呈乳白色，肉眼觀察為云霧狀，若呈鮮黃色、褐色、綠色、紅色，這些精液均不符合輸精精液要求。

正常公羊精液無氣味，若出現腐敗、酸臭味，則不符合輸精精液要求。

4.3 精子活力

檢測設備為顯微鏡（300～600 倍），用無菌的玻璃棒蘸取一小滴精液，滴落到載玻片中央，輕輕蓋上蓋玻片，要求覆蓋后的載玻片上無氣泡。精子常見的運動方式有“前進直線”“繞圈”和“搖擺”運動，只有“前進”運動的精子具備受精能力，以此計算精子活力。若顯微鏡視野下精子全部呈“前進直線”運動，評定為1.0 分，若50%呈“前進直線”運動則為0.5 分，根據精子活力進行0～1.0 評分[2]。

4.4 精液密度

精子密度評定分3 個級別，分別為密（精子間的距離小于1 個精子長度）、中（精子間有1 個精子長度的孔隙）、稀（精子間有1～2個精子長度的孔隙或視野內精子數量少量）。若視野內無精子則標記為“無”。

4.5 輸精精子要求

精子活力0.7 以上，冷凍精液精子活力大于0.3；且精液密度為中、密。

5 精液稀釋

5.1 稀釋方法

新鮮精液在品質檢測后需要盡快稀釋、輸精，若時間過長會影響精液品質。稀釋液配方：枸櫞酸鈉2.3g、葡萄糖10g，加入100mL 蒸餾水，充分溶解后過濾，高壓滅菌消毒，液體溫度降低到40℃時加入10mL 卵黃、0.3g 磺胺粉末、10 萬IU 青霉素、10IU 鏈霉素。稀釋比例為2～3 倍。

5.2 保存與運送

將稀釋好的精子分裝到2mL 的玻璃管內，盡可能裝滿，減少震蕩對精液品質的損害。裝滿后要做好密封，如用消毒后的醫用石蠟油密封，然后用蠟封口，再套上一次性塑料薄膜。輸新鮮精液時，一般采精到輸精結束整個流程控制在6h 內，若是采精后低溫保存，降溫過程應控制在60～80min，以防迅速降溫造成精子失活，4℃低溫保存的精液應在12h 內完成輸精。

6 輸精操作

6.1 母羊準備

授精的母羊應為發情母羊，因此養殖人員要做好發情鑒定，為做好綿羊的同期發情工作，一般經過放栓-取栓-注射孕馬血清等流程后，母羊會有發情癥狀。將發情母羊趕到授精室，在輸精架上保定好，然后用酒精棉球擦拭母羊外陰部。

6.2 輸精操作

輸精人員左手持金屬開腔器，將其緩慢、柔和的插入到母羊陰道內，確定好子宮頸位置，此時可見陰道內殘留黏液且無陰道炎癥、子宮頸管松弛開張（表明母羊處于發情中、后期）可進行輸精。右手持輸精器，將其插入到子宮頸口處1cm 深度，拇指按壓輸精器的活塞，輸入1mL 精液，輸精結束后取出，更換輸精針。

6.3 復配操作

為保障人工授精受胎率，一般在上午8～10 點進行第一次輸精，然后間隔6～8h 后進行第二次輸精。授精未成功的母羊一般在第一次輸精后的2～3 周出現返情。返情原因可能與母羊陰道感染、母羊假發情、精液品質不佳有關。返情母羊要做好標記，并按照生產計劃進行再次配種。

6.4 注意事項

輸精時要保障精液溫度，因此在更換母羊時，輸精員要手握輸精針，減少溫度散失。每次更換母羊時要更換輸精針，保障一針一羊，使用后的輸精針立即噴灑75%酒精消毒，然后統一清洗、消毒。輸精人員配搭長款手套、口罩和白大褂。

7 輸精記錄

在完成輸精后，要準確做好每項記錄工作，分別為：采精時間、采精數量、精子活力、輸精時間、被輸精母羊號等，為接下來開展的綿羊繁殖、品種改良等工作提供重要參考依據。

8 結語

人工授精技術可實現不同體型綿羊的雜交配種工作，減少因自然配種出現的公母羊體重差距大造成的傷害或生殖器官病原菌感染問題。但該技術的應用有一定的操作難度，對操作人員有較高技術要求，因此在人工授精過程中要嚴格遵守操作流程，做好上述各方面的操作要點，保障綿羊人工授精質量。此外，在日常管理中，凡是參加配種的母羊要進行分群管理和發情鑒定，采集、輸精前后要對公羊、母羊進行合理的營養供給和適量運動，配種期間要做好羊群健康檢疫工作，保持圈舍干凈，給受精后的母羊提供舒適環境，公羊要合理采集，減少因過度采集縮短利用年限。通過規范綿羊人工授精技術操作，有利于促進養羊業的良好發展。