戶艷霞,趙 璇,張 寶,李江美,干華磊,馬駿潔,李佛琳,吳德喜
(1.云南省煙草公司大理州公司,云南 大理 671000;2.上海萬力華生物科技有限公司,上海 201203;3.紅塔集團大理卷煙廠,云南 大理6 710002;4.云南農業大學植物保護學院,云南 昆明 650201;5.云南農業大學煙草學院,云南 昆明 650201)
煙草黑脛病是由煙草疫霉菌引起的一種頑固性土傳病害,其病原菌可在土壤中存活數年并具有累積效應,可侵染煙株各生長階段,已成為煙草最頑固的病害之一[1]。該病發生范圍廣、危害重且防治難度大,除單獨發生之外,還會與煙草青枯病以及根黑腐病一起復合侵染,使煙葉的質量和產量下降,發生嚴重時造成的損失達到75%及以上,甚至有絕收的可能,嚴重影響了各個煙區農民的經濟收益[2]。長期以來,生產上防治煙草黑脛病以化學藥劑為主,化學藥劑防效好,但病原菌抗藥性、農藥殘留等問題也隨之出現。有效的生防菌防治煙草黑脛病可以避免化學藥劑的弊端,符合綠色生態防控、綠色優質煙葉生產的需求[3-4]。木霉菌是一種廣泛存在于土壤、植物根際和葉面的腐生型真菌,對多種植物病原真菌具有拮抗作用,是一類廣譜生防菌[5-6]。本試驗用生產上常用的化學藥劑甲霜·錳鋅(Metalaxyl mancozeb)作為對照,比較5 種木霉產品田間防治煙草黑脛病的效果試驗。
1.1.1 供試藥劑
供試木霉產品共有以下5 種,一是東方農韻牌木霉菌(2 億孢子/g)可濕性粉劑,上海萬力華生物科技有限公司生產;二是菌翹翹牌木霉菌(2 億個/g)水分散粒劑,云南星耀生物制品有限公司生產;三是稪活牌木霉菌(木霉菌10 億孢子/g)可濕性粉劑,山東惠民中聯生物有限公司生產;四是拜沃牌哈茨木霉菌(3 億CFU/g)可濕性粉劑,美國拜沃股份有限公司生產;五是三槍牌哈茨木霉菌(1 億CFU/克)可濕性粉劑,美國拜沃股份有限公司生產。對照的化學藥劑為寶大森牌68%甲霜·錳鋅(含58%甲霜靈、10%代森錳鋅)可濕性粉劑,江蘇寶靈化工股份有限公司生產。
1.1.2 供試菌種
煙草疫霉菌由云南農業大學植保學院提供,接種用的菌種采用谷粒培養基培養后用濕潤煙草專用育苗基質按菌種和基質體積1∶100 配制,每株移栽前放入200 mL 到栽苗塘,和土、肥料混拌后栽煙。
試驗于2021 年4—9 月在大理白族自治州彌渡縣紅巖鎮東海村委會進行,試驗煙田歷年煙草黑脛病發病嚴重。供試烤煙為感病品種紅花大金元,采用漂浮育苗后覆膜移栽,按當地優質煙葉生產技術規范進行栽培管理。
試驗共設置7 個處理,每個處理3 次重復,每個小區32 m2栽種60 株,煙株行距1.3 m、株距0.4 m。施肥量按常規進行,1 hm2田施氮肥75 kg、磷肥90 kg、鉀肥225 kg、商品有機肥1 t。有機肥和含氮磷鉀煙草專用復合肥全部作為基肥施用,硫酸鉀作為追肥施用。具體處理情況見表1。

表1 各處理施藥情況
處理2~處理7 按照各藥劑用量,分別在移栽當天和之后7 d 各施用1 次,每次每株兌水200 mL 施加。
1.4.1 農藝性狀調查
本試驗按照煙草行業標準《煙草農藝性狀調查測量方法》(YCT 142—2010)進行。不同處理每小區于煙草移栽后的30 d 調查記錄1 次煙株的株高、莖圍、葉片數、節距、最大葉葉長和葉寬等農藝性狀,并計算葉面積(葉長×葉寬×0.634 5)。每間隔15 d 各調查一次田間農藝性狀,直至腳葉成熟期結束。
1.4.2 煙草黑脛病發生情況調查
本試驗按照國家標準《煙草病蟲害分級及調查方法》(GB/T 23222—2008)進行煙草黑脛病分級調查。調查時期在腳葉成熟期,對全部煙株進行調查。發病率、病情指數、防治效果計算如式(1)、式(2)、式(3)所示。

利用Excel 2010、STST 方差分析軟件進行數據處理,用Duncan’s 新復極差法進行統計分析。
調查各處理煙株的田間農藝性并進行比較,和清水對照相比,采用藥劑防治的處理農藝性狀明顯好,6 種藥劑按照葉面積從大到小依次是:化學藥劑甲霜·錳鋅>東方農韻木霉菌>拜沃哈茨木霉菌>菌翹翹木霉菌>稪活木霉菌>三槍哈茨木霉菌,表明供試的5 種木霉菌控制煙草黑脛病后對于煙株的生長有利,但和化學藥劑甲霜·錳鋅相比,效果差一些,具體見表2。

表2 腳葉成熟期不同處理煙株的農藝性狀比較
2.2.1 發病普遍性調查及分析
發病率調查結果和通過發病率計算的相對防效結果如表3 所示。供試的5 種木霉菌和化學藥劑對煙草黑脛病的防治效果從高到低的排列順序依次是:化學藥劑甲霜·錳鋅(85.37%)>東方農韻木霉菌(69.63%)>拜沃哈茨木霉菌(68.67%)>菌翹翹木霉菌(66.00%)>稪活木霉菌(60.53%)>三槍哈茨木霉菌(54.20%),表明供試的5 種木霉菌對煙草黑脛病均有一定的防治效果,但均沒有化學藥劑甲霜·錳鋅效果好。

表3 腳葉成熟期不同處理煙草黑脛病發生情況比較 單位:%
對供試6 種藥劑發病率計算的防治效果數據進行方差分析,并通過新復極差(SSR 法)比較得出以下結論。6 個處理間差異達到極顯著(1%水平)的是:化學藥劑甲霜·錳鋅和東方農韻木霉菌、拜沃哈茨木霉菌、菌翹翹木霉菌、稪活木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間,東方農韻木霉菌和稪活木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間,拜沃哈茨木霉菌和稪活木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間,菌翹翹木霉菌和三槍哈茨木霉菌之間。6 個處理間差異僅達到顯著(5%水平)的是:菌翹翹木霉菌和稪活木霉菌之間,稪活木霉菌和三槍哈茨木霉菌之間,具體見表4。

表4 不同處理發病率計算的防治效果差異顯著性測驗結果
2.2.2 發病嚴重性調查及分析
病情指數調查結果及相對防效表明,供試的5 種木霉菌和對照化學藥劑對煙草黑脛病的防治效果從高到低依次是:化學藥劑甲霜·錳鋅(86.40%)>東方農韻木霉菌(69.87%)>菌翹翹木霉菌(69.20%)>稪活木霉菌(67.1%)>拜沃哈茨木霉菌(63.33%)>三槍哈茨木霉菌(60.87%),表明供試的5 種木霉菌對煙草黑脛病在病害嚴重性方面均有一定的防治效果,但是沒有化學藥劑甲霜·錳鋅防治效果好,具體見表5。

表5 腳葉成熟期不同處理對煙草黑脛病的防治效果比較
對供試6 種藥劑病情指數計算的防治效果數據進行方差分析,并通過新復極差(SSR 法)比較得出以下結論。一是6 個處理間差異達到極顯著(1%水平)的是化學藥劑甲霜·錳鋅和東方農韻木霉菌、菌翹翹木霉菌、稪活木霉菌、拜沃哈茨木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間。二是6 個處理間差異僅達到顯著(5%水平)的是東方農韻木霉菌和拜沃哈茨木霉菌、三槍哈茨木霉菌之間,菌翹翹木霉菌和三槍哈茨木霉菌之間,具體見表6。

表6 不同處理病情指數計算的防治效果差異顯著性測驗結果
通過本次試驗可以得出,供試的5 種木霉菌對接種煙草疫霉菌條件下的田間煙草黑脛病在發病普遍性和嚴重性方面,防效不及化學藥劑甲霜·錳鋅(86.40%),但均有一定的防控效果。通過發病率計算的相對防治效果如下,東方農韻木霉菌(69.87%)、拜沃哈茨木霉菌(68.67%)和菌翹翹木霉菌(66.00%)防治效果較好,其次為稪活木霉菌(60.53%),三槍哈茨木霉菌(54.20%)防治效果最差。通過病情指數計算的相對防治效果,東方農韻木霉菌(69.87%)、菌翹翹木霉菌(69.20%)和稪活木霉菌(67.1%)防治效果較好,其次為拜沃哈茨木霉菌(63.33%)和三槍哈茨木霉菌(60.87%)。
本試驗采用人工接種通過谷粒培養的煙草疫霉菌,若不采取防控措施,發病普遍性和嚴重度均會較高(本試驗清水對照發病率60.56%,病情指數平均36.55),對比試驗各處理取得比較好的防治效果,表明供試的6 種藥劑分別在移栽當天和之后7 d 各施用1 次,能夠有效防控煙草疫霉菌侵染煙草發病,結果和相關學術研究報道基本一致[7-9]。但試驗結果和生產反映的效果也有不一致的地方,一方面是生物菌劑在存放、運輸方面穩定性不如化學藥劑,另一方面可能是使用、調查評價方法方面出現的問題。
煙草黑脛病是煙草生產中常見且為害嚴重的病害,長期使用化學藥劑必然出現病菌的抗藥性、藥劑殘留及環境污染等問題,篩選有效的生物菌劑配合化學藥劑防控煙草黑脛病在當前是比較現實的,本試驗結果可供生產參考。