“三步消毒法”對豁眼鵝種蛋消毒效果的研究

邱文然

（遼寧職業學院，遼寧鐵嶺 112099）

豁眼鵝是我國優秀的地方良種，其突出的優點是年產蛋量多，繁殖能力強，是最理想的育種素材和雜交綜合利用的首選品種[1]。因其趾間有蹼、圈舍潮濕，使腳底特別污濁，產蛋時會污染產蛋箱中的其他種蛋，導致種蛋污染嚴重。據本課題組2016 年對鐵嶺市部分豁眼鵝養殖場種蛋污染狀況調查，重度污染的臟蛋率達2%～5%，中、輕度污染的臟蛋率高達90%以上主要是種蛋消毒不當，導致受精卵孵化率和健雛率較低。

本試驗從提升和規范豁眼鵝種蛋消毒技術著手，參考家禽種蛋消毒的相關研究成果，精選碘液浸洗、福爾馬林熏蒸和新潔爾滅噴灑3 種種蛋消毒方法，依據種蛋保存和孵化過程特點，依次排列為：種蛋收集后浸洗、入孵前熏蒸和孵化過程中噴灑的三步消毒，并規范種蛋消毒操作技術，構建豁眼鵝種蛋“三步消毒法”，并與傳統消毒方法對比，探討種蛋“三步消毒法”消毒效果及其對孵化效果的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 種蛋

種蛋購自昌圖金秋豁鵝原種場。每天收集種蛋經初選和試驗處理后，送到蛋庫種保存7d，保存溫度12～18℃，相對濕度70%～75%[2]。

1.1.2 儀器設備

箱體式孵化出雛一體機(型號為EIFTPC-YM1500)購自青島興儀電子設備有限責任公司；三用恒溫水浴槽（型號為HH-600）購自由上海百碘儀器設備有限公司。

1.1.3 藥品

甲醛溶液（批號為2020072101），碘化鉀（批號為2020010601）購自成都市科隆化學品有限公司；高錳酸鉀（批號為20071019）購自沈陽瑞豐精細化學品有限公司；碘片（批號為20150922）購自天津市瑞豐特化學品有限公司；新潔爾滅（批號為200302）購自山東利爾康醫療科技股份有限公司；營養瓊脂（批號為20201102，普通瓊脂平板及薩布羅氏瓊脂平板）購自北京奧博星生物技術有限責任公司。

1.2 方法

隨機選取1000 枚合格種蛋，隨機分為兩組后編號，每組500 枚。對照組收集種蛋后在蛋庫保存7d，在種蛋入孵前實施福爾馬林熏蒸消毒。將種蛋放置在孵化機的蛋盤內，送到消毒柜中，按照消毒柜容積稱量消毒藥品，即含甲醛40%的福爾馬林30mL/m3、高錳酸鉀15g/m3；將稱量好的高錳酸鉀放置于廣口瓷盆中，送入消毒柜內備用，將稱量好的福爾馬林迅速倒入裝有高錳酸鉀瓷盆內，并置于消毒柜內下方，關閉消毒柜，保持消毒柜內溫度為25～27℃、相對濕度為70%～80%。消毒30min 后開啟消毒柜通風系統，排除消毒氣體，打開消毒柜門，取出種蛋，檢測消毒效果[3]。

試驗組種蛋采用“三步消毒法”消毒。第一步收集種蛋后實施碘液浸洗消毒：下午14 點開始收集種蛋，初選后進行蛋殼細菌數量檢測。配制0.1%碘液：10g 碘片和15g 碘化鉀，研磨后溶解于1000mL 清水中，然后再加入9000mL 溫水（37～40℃）。將配制好的碘液置于水浴槽中，保持水溫在40℃左右。將收集后的種蛋分批放入0.1%的溫碘液中，浸泡30～60s，洗凈污物后取出晾干，檢測消毒效果后送到蛋庫中保存7d，保存溫度12～18℃，相對濕度為70%～75%。第二步在種蛋入孵前實施福爾馬林熏蒸消毒，消毒步驟同對照組。消毒30min 后開啟消毒柜通風系統，排除消毒氣體，打開消毒柜門，取出種蛋，檢測消毒效果[3]。第三步在種蛋入孵第16d 結合涼蛋實施新潔爾滅噴灑消毒1 次：用5%的新潔爾滅原液加25倍30℃溫水配制成0.2%溶液；關閉孵化器，拉出蛋車，消毒前檢測蛋殼細菌數量，用噴霧器將配制好的0.2%新潔爾滅溫溶液均勻噴灑在種蛋表面；將種蛋涼約30min 左右，待蛋溫降至30℃左右時，檢測消毒效果后送至孵化器內繼續孵化[4]。

1.2.1 蛋殼細菌數量檢測

在消毒操作前后每組隨機抽取10 枚種蛋，進行蛋殼細菌數量測定。在無菌操作下，分別用滅菌純凈水沾濕棉簽擦洗被檢樣本鈍端蛋殼1.0cm2面積內的細菌，用滅菌純凈水進行1∶10、1∶100、1∶1000 倍稀釋，最后將稀釋后的液體加至培養基上，37℃培養24h，統計消毒前后每枚種蛋蛋殼1.0cm2面積內的細菌數量[4]。

1.2.2 孵化處理

將消毒處理的種蛋放入同一臺孵化機進行孵化，將各試驗處理后的種蛋預熱后碼盤入孵。孵化過程溫濕度見表1；隨著胚齡增大逐漸開大通風口；每2h 翻蛋1 次，翻蛋角度為90°；16 胚齡開始上午、下午各凉蛋1 次，每次30min 左右，待蛋溫降至30℃左右時放回孵化器內繼續孵化；在孵化到第8、21 和28天時各進行1 次照蛋[5]。種蛋入孵前逐個編號，分別統計對照組和試驗組的入孵蛋數、受精蛋數、受精卵孵化率、出雛數、健雛數、健雛率和胚胎死亡率。

表1 豁眼鵝種蛋孵化過程溫濕度設置情況表

1.3 數據統計分析

采用SPSS 軟件對種蛋蛋殼表面細菌數量、細菌減少率、授精卵孵化率、健雛率、胚胎早期死亡率、胚胎后期死亡率等數據進行t 檢驗。

2 結果與分析

2.1 消毒效果分析

不同消毒方式種蛋蛋殼細菌數量情況見表2，從表中可以看出，在種蛋進入蛋庫前，對照組和試驗組雞蛋表面細菌數差異不顯著，但由于對照組在種蛋收集時未進行消毒，入孵前蛋殼表面細菌數量（21320±2499 個/cm2）顯著高于試驗組，即使經過福爾馬林熏蒸，細菌數仍在十萬級以上。而試驗組在種蛋收集時經碘液浸洗消毒，細菌數量減少81.5%（3940±993），種蛋在蛋庫保存7d 后細菌增殖1 倍左右（8320±2295 個/cm2），入孵前經福爾馬林熏蒸消毒后，細菌數減少了72.5%，不足3000 個/cm2，遠低于對照組的細菌數。試驗組孵化過程中細菌雖有增殖，但由于細菌基數較低，入孵后16 天也未超過10000 個/cm2，而對照組則仍在十萬級以上。試驗組種蛋通過“三步消毒法”的消毒，蛋殼表面細菌綜合減少率為91.0%，對照組種蛋通過福爾馬林熏蒸消毒，蛋殼表面細菌減少率為66.7%，試驗組顯著高于對照組。

表2 不同消毒方式種蛋蛋殼細菌數量情況

表3 孵化試驗結果統計表

2.2 孵化試驗結果分析

對照組與試驗組種蛋放入同一臺孵化器內進行孵化，孵化結果見表4。從表中可以看出，試驗組比對照組受精卵孵化率高出8.5 個百分點，健雛率高出7.2個百分點，胚胎早期死亡率低7.0 個百分點，胚胎后期死亡率低1.6%。

3 結論

與僅在入孵前采用福爾馬林熏蒸消毒相比，實施“三步消毒法”消毒豁眼鵝種蛋可大幅度減少種蛋保存與孵化過程中蛋殼表面的細菌數量，可明顯提高種蛋受精卵孵化率及健雛率，降低種蛋胚胎早期死亡率。

本試驗精選碘液浸洗、福爾馬林熏蒸和新潔爾滅噴灑3 種種蛋消毒法，依據種蛋保存和孵化特點，依次排列為：種蛋收集后浸洗、入孵前熏蒸和孵化過程中噴灑的三步消毒，并規范操作技術，構建豁眼鵝種蛋“三步消毒法”，獲得顯著的消毒效果和孵化效果。隨著新型種蛋消毒藥物的研制，也可用新型種蛋消毒藥物替代上述消毒藥物，其消毒效果和孵化效果有待進一步研究。種蛋“三步消毒法”及規范消毒技術的消毒效果和孵化效果顯著優于種蛋入孵前熏蒸消毒，但增加了消毒藥物及用量，進而增加了消毒成本，有關種蛋“三步消毒法”的經濟效益有待進一步研究。