“海爾特茲”紅樹莓嫩枝扦插技術研究

王曉香，邱佳奇，張雪梅

(河北農業大學，河北保定 071000)

樹莓(L.)是薔薇科懸鉤子屬多年生漿果類小灌木果樹，又名托盤、覆盆子、馬林等。樹莓適應性強，抗寒性強，是富含多種人體所必需營養成分的果、藥、生態利用等多項兼用型樹種。樹莓含有豐富的維生素、有機酸、過氧化物歧化酶(SOD)等物質，具有光保護、抗氧化、延緩衰老、免疫藥理等作用，能夠減弱一些人體慢性疾病發生的風險，特別是抗癌物質“鞣花酸”含量位居水果之首，是我國新興開發的第三代“黃金水果”。

樹莓一般采用分株、壓條、培養根蘗苗等繁殖方法，但這些方法具有繁殖系數低、材料消耗多、占地面積大等缺點，組織培養方法繁育苗木成本較高。扦插繁殖是某些果樹的主要繁殖方法之一，具有縮短育苗周期、降低育苗成本、能夠保留品種的優良性狀、不受樹種限制、操作簡單等優點。植物生長調節劑又稱植物外源激素，是一種由人工合成的具有植物激素活性的調節植物生長和發育的有機物。ABT生根粉能夠調節和強化植物內源激素的含量，從而促進生物分子的合成，以此誘導植物形成不定根和不定芽的初步形態，是一種植物生根促進劑，能夠有效地提高植物的生根率，已經廣泛應用在植物生產中。為了找出紅樹莓嫩枝扦插的最佳方案，筆者開展“海爾特茲”紅樹莓品種嫩枝扦插試驗，以探究紅樹莓嫩枝扦插成苗的關鍵技術。

1 材料與方法

以“海爾特茲”紅樹莓為試驗材料，取初生莖莖段進行扦插試驗。

扦插基質為珍珠巖∶草炭土=7∶3，用0.5%的高錳酸鉀消毒24 h。將基質填入穴盤，填至緊實，然后噴水濕潤。選取紅樹莓當年生莖段作為插穗，插穗長度10 cm，剪留2～4片小葉，扦插深度約3 cm。及時噴水，保持濕度在90%，溫度在25 ℃左右。

第一次扦插。①扦插時間。2018年5月上旬。②插穗準備。選取當年生半木質化莖作為插穗，插穗剪口的上端平滑下端傾斜。③處理方法。選用ABT生根粉濃度分別為200、500、700、1 000 mg/L速蘸2～3 s，每個濃度處理50根插穗，3次重復，插穗數量600根。扦插后定期觀察并記錄插穗生長情況，統計生根率。

第二次扦插。①扦插時間。2018年6月上旬。②插穗準備。選取紅樹莓當年生莖中段半木質化作插穗，插穗切口上端平滑，下端傾斜。③處理方法。選用濃度分別為200、500、700 mg/L的ABT生根粉速蘸30 s，100 mg/L ABT生根粉浸泡1 h，以清水速蘸30 s為對照。每個濃度處理50株插穗，3次重復，插穗數量750根。扦插后定期觀察并記錄插穗生長情況。

第三次扦插。①扦插時期。2019年4月上旬。②萌梢處理。2019年3月14日，對農大三分廠的紅樹莓進行平茬，在其苗床上鋪墊6～8 cm厚的基質(珍珠巖∶草炭土=2∶1)，混合均勻。澆一次透水，在苗床上架設小拱棚，保持溫度在15～20 ℃，濕度在50%～70%，2～3 d澆1次水。③嫩梢扦插。2019年4月7日收獲新梢，從基質表面以下4～5 cm剪取新梢作為扦插材料。設置生根粉濃度梯度為200、500、700 mg/L，以清水為CK。

按照上剪口平滑、下剪口傾斜的方式進行，每個處理浸泡ABT生根粉2 h，每個處理20根插穗，3次重復。每個處理20根插穗，3次重復，共240根插穗。

扦插后每天觀察并記錄紅樹莓插穗生長情況，30 d后記錄全部扦插苗的成活數量及生根數量，統計生根率，隨機選取樣品測定葉片葉綠素含量以及抗氧化酶活性。

過氧化氫酶(CAT)活性的測定采用過氧化氫法；過氧化物酶(POD)活性測定采用愈創木酚法；超氧化物歧化酶(SOD)活性測定采用氮藍四唑(NBT)光還原法。葉綠素含量的測定采用分光光度計法。

2 結果與分析

5月不同ABT濃度對紅樹莓嫩枝扦插生根的影響。2018年5月上旬紅樹莓嫩枝扦插后30 d的生長情況見表1。由表1可知，不同濃度ABT生根粉處理的生根情況有顯著差異，愈傷形成時間和生根時間隨著生根粉濃度的升高而延長，ABT濃度為200 mg/L的處理愈傷形成時間最短僅為7 d，ABT濃度為1 000 mg/L的處理愈傷形成時間最長，達18 d。ABT濃度為200 mg/L的處理生根時間最短，僅15 d，生根率最高9.77%。ABT濃度為500 mg/L的處理生根時間為20 d，較200 mg/L的處理延長了5 d，生根率為6.17%，較200 mg/L的處理降低了3.60百分點，ABT濃度為700 mg/L的處理生根時間為26 d，較200 mg/L的處理延長了11 d，生根率為3.65%，較200 mg/L的處理降低了6.12百分點，ABT濃度為1 000 mg/L的處理未生根。

6月不同ABT濃度對紅樹莓嫩枝扦插生根的影響。2018年6月上旬紅樹莓嫩枝扦插后30 d的生長狀態見表2。由表2可知，當ABT濃度高于200 mg/L時，愈傷形成時間、生根時間均隨著ABT濃度的升高而延長，生根率隨著ABT濃度的升高而降低。100 mg/L的處理愈傷形成時間為13 d，較200 mg/L的處理延長2 d，較對照組縮短15 d，生根時間較200 mg/L的處理延長5 d。100 mg/L處理生根率顯著低于200 mg/L的處理。當ABT生根粉濃度為200 mg/L時其愈傷組織形成時間和生根時間最短，分別為11和18 d，愈傷組織形成時間較對照組縮短了17 d，生根率為18.11%，顯著高于其他濃度ABT的處理。ABT濃度為100和700 mg/L的處理生根率差異不顯著，其中100 mg/L處理的生根率略高于700 mg/L的處理。對照組愈傷組織形成時間最長為28 d，未生根。

表1 2018年5月紅樹莓嫩枝扦插生根狀態

表2 2018年6月紅樹莓嫩枝扦插生根情況

4月不同濃度ABT對紅樹莓嫩枝扦插生根的影響。 2019年4月上旬紅樹莓嫩枝扦插后30 d的生長情況見表3。由表3可知，不同ABT濃度之間的生根率存在顯著差異，隨著ABT濃度的升高，紅樹莓愈傷形成時間和生根時間延長，生根數和生根率呈下降趨勢，對照組的愈傷形成時間和生根時間分別是15、25 d，生根率為18.98%。當ABT濃度為200 mg/L時愈傷組織形成時間及生根時間最短，分別為5、10 d，較對照組分別縮短了10、15 d，生根率為42.04%，較對照組提高了23.06百分點。ABT濃度為700 mg/L的處理生根率最低，僅1.68%，較對照組降低了17.3百分點。

不同生根粉濃度對紅樹莓嫩枝扦插生根的影響。各個時期紅樹莓嫩枝扦插生根率隨生根粉濃度的變化趨勢見圖1。由圖1可知，各扦插時期的生根率在不同ABT濃度下均有顯著差異。當ABT生根粉濃度為200 mg/L時不同時期嫩枝扦插生根率均顯著高于其他濃度處理。其中4月上旬200 mg/L ABT處理的生根率最高，為42.04%，ABT濃度為500 mg/L的處理生根率是14.32%，ABT濃度為700 mg/L的處理生根率是1.68%，其中，200 mg/L處理的生根率比500 mg/L、700 mg/L的處理分別高27.72、40.36百分點。5月上旬ABT濃度為200 mg/L的處理生根率為9.77%，ABT濃度為500 mg/L的處理生根率為6.17%，ABT濃度為700 mg/L的處理生根率為3.65%，其中，200 mg/L處理的生根率比500、700 mg/L的處理分別高3.60、6.12百分點。6月上旬ABT濃度為200 mg/L的處理生根率為18.11%，ABT濃度為500 mg/L的處理生根率是7.91%，ABT濃度為700 mg/L的處理生根率是3.60%，其中，200 mg/L處理的生根率比500、700 mg/L的處理分別高10.20、14.51百分點。

表3 2019年4月紅樹莓嫩枝扦插生根狀態

注：不同小寫字母表示同一時期不同濃度間差異顯著(P<0.05)Note：Different lowercases indicated significant difference between different concentrations at the same stage at 0.05 level圖1 不同濃度生根粉對紅樹莓嫩枝扦插生根的影響Fig.1 Effects of different concentrations of root powder on roots of red raspberry cuttings

不同扦插時期對紅樹莓嫩枝扦插生根的影響。在不同濃度ABT處理下，紅樹莓嫩枝扦插生根率和扦插時期的關系見圖2。由圖2可知，當ABT濃度為200 mg/L時，各個扦插時期的生根率存在顯著差異，4月上旬生根率為42.04%，顯著高于5月上旬和6月上旬，分別高32.27、23.93百分點。5月上旬生根率為9.77%，顯著低于6月上旬生根率(18.11%)。當ABT濃度為500 mg/L時，4月上旬的生根率與5月上旬、6月上旬的生根率存在顯著差異，5月上旬和6月上旬的生根率差異不顯著。4月上旬的生根率為14.32%，分別顯著高于5月上旬、6月上旬8.15、6.41百分點，5月上旬生根率為6.17%，6月上旬生根率為7.91%。當ABT濃度為700 mg/L時，各個時期扦插的生根率無顯著差異，4月上旬、5月上旬、6月上旬的生根率分別為1.68%、3.65%、3.60%。

注：不同小寫字母表示同一濃度不同時期間差異顯著(P<0.05)Note：Different lowercases indicated significant difference between different stages in the same concentration at 0.05 level圖2 不同扦插時期對紅樹莓嫩枝扦插生根的影響Fig.2 Effects of different cutting periods on roots of red raspberry cuttings

不同濃度ABT處理的紅樹莓嫩枝扦插幼苗葉綠素含量。對2019年4月上旬紅樹莓嫩枝扦插成活的幼苗進行葉綠素的測定，結果見圖3。由圖3可知，不同濃度ABT處理的幼苗葉綠素a和總葉綠素的含量存在差異，且均隨ABT濃度的升高呈下降趨勢，且高于對照。ABT濃度為500 mg/L的處理與對照組的葉綠素b含量無顯著差異，ABT濃度為200、500 mg/L的處理中類胡蘿卜素含量無顯著差異。

當ABT濃度為200 mg/L時葉綠素和類胡蘿卜素的含量均最高，葉綠素a的含量為1.667 5 mg/L，較對照組高0.806 8 mg/L，葉綠素b的含量為0.564 5 mg/L，較對照組高0.157 9 mg/L，總葉綠素的含量為2.260 8 mg/L，較對照組高1.030 0 mg/L，類胡蘿卜素的含量為0.514 0 mg/L，較對照組高0.177 1 mg/L。

注：不同小寫字母表示不同濃度間差異顯著(P<0.05)Note：Different lowercases indicated significant difference between different concentrations at 0.05 level圖3 紅樹莓嫩枝扦插幼苗葉綠素和類胡蘿卜素含量Fig.3 Chlorophyll and carotenoids content of cutting seedlings of red raspberry

不同濃度ABT處理的紅樹莓嫩枝扦插幼苗的過氧化氫酶(CAT)活性。不同濃度ABT處理的紅樹莓嫩枝扦插幼苗的過氧化氫酶(CAT)活性的變化趨勢見圖4。由圖4可知，不同濃度ABT處理之間CAT的活性存在顯著差異，且其活性隨ABT濃度的升高呈下降趨勢，ABT濃度為500 mg/L的處理與對照組無顯著差異。當ABT濃度為200 mg/L時CAT活性最強，CAT活性為18 U/(g·min)，顯著高于其他處理，較對照組高50.00%。對照組的CAT活性為12 U/(g·min)，ABT濃度為700 mg/L的處理CAT活性為8 U/(g·min)，對照組的CAT活性比700 mg/L的處理高50.00%。

注：不同小寫字母表示不同濃度間差異顯著(P<0.05)Note：Different lowercases indicated significant difference between different concentrations at 0.05 level圖4 紅樹莓嫩枝扦插幼苗的過氧化氫酶(CAT)活性Fig.4 Catalase(CAT)activity in shoot cutting seedlings of red raspberry

不同濃度ABT處理的紅樹莓嫩枝扦插幼苗的超氧化物歧化酶(SOD)活性。不同濃度ABT處理的紅樹莓嫩枝扦插幼苗的超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化趨勢見圖5。由圖5可知，ABT濃度為200與500 mg/L的處理之間以及ABT濃度為700 mg/L的處理與對照組之間SOD活性無顯著差異，但兩者之間SOD活性存在顯著差異，其中SOD活性最高的處理是ABT濃度 200 mg/L，其活性為10.828 6 U/(g·min)，較700 mg/L的處理高63.07%，較對照組高38.55%。ABT濃度為500 mg/L處理的SOD活性為9.957 6 U/(g·min)，較700 mg/L的處理高50%，較對照組高27.41%。SOD活性最低的處理是ABT 濃度700 mg/L，其活性為6.638 5 U/(g·min)，較對照組低15.06%。對照組的活性為7.815 4 U/(g·min)。

注：不同小寫字母表示不同濃度間差異顯著(P<0.05)Note：Different lowercases indicated significant difference between different concentrations at 0.05 level圖5 紅樹莓嫩枝扦插幼苗的超氧化物歧化酶(SOD)活性Fig.5 Superoxide dismutase(SOD)activity in shoot cutting seedlings of red raspberry

不同濃度ABT處理的紅樹莓嫩枝扦插幼苗的過氧化物酶(POD)活性。不同濃度ABT處理的紅樹莓嫩枝扦插幼苗的過氧化物酶(POD)活性變化趨勢見圖6。由圖6可知，ABT濃度為200與500 mg/L的處理之間以及ABT濃度為700 mg/L的處理與對照組之間POD活性無顯著差異，但兩者之間POD活性存在顯著差異。隨著ABT濃度的升高POD活性逐漸升高。ABT濃度200 mg/L處理的POD活性為41.443 3 U/(g·min)，顯著低于ABT為700 mg/L的處理和對照組，分別較700 mg/L處理與對照組的活性低55.06%、62.06%。ABT濃度為700 mg/L處理的POD活性為92.223 3 U/(g·min)，對照組POD活性為109.223 3 U/(g·min)。ABT濃度500 mg/L處理的POD活性為47.556 7 U/(g·min)，顯著低于ABT為700 mg/L的處理和對照組，分別較700 mg/L處理與對照組的活性低48.43%、56.46%。

注：不同小寫字母表示不同濃度間差異顯著(P<0.05)Note：Different lowercases indicated significant difference between different concentrations at 0.05 level圖6 紅樹莓嫩枝扦插幼苗的過氧化物酶(POD)活性Fig.6 Peroxidase(POD)activity of shoot cutting seedlings of red raspberry

3 結論與討論

該試驗結果表明，不同時間紅樹莓嫩枝扦插均以200 mg/L的ABT生根粉處理生根率最高，這與王竹的研究結果一致。當ABT濃度超過200 mg/L時，生根率隨ABT濃度的升高而降低。2019年4月上旬扦插的紅樹莓幼苗，ABT濃度為700 mg/L的處理生根率低于對照，說明越高濃度的ABT會對插穗生根產生抑制作用。

該試驗選擇4月上旬、5月上旬、6月上旬3個時期分別對“海爾特茲”紅樹莓的嫩枝扦插進行研究，結果發現，扦插時期以4月上旬覆蓋基質幼化后的插穗扦插生根率和成活率最高，主要是因為4月上旬溫度適宜，氣候溫和，插穗提前進行覆蓋基質進行幼化后的插穗基部幼嫩，5月以后，氣溫逐漸升高，插穗組織逐漸老化是扦插生根困難的主要因素。

對生根率最高的4月上旬扦插成活的幼苗進行生理指標測定，葉綠素的測定結果發現，葉綠素和類胡蘿卜素的含量以ABT濃度為200 mg/L的處理最高，扦插效果最好。當ABT濃度為200 mg/L時CAT和SOD活性最強，POD活性最低，CAT活性為18 U/(g·min)，較對照組高33.33%，SOD活性為10.828 6 U/(g·min)，較對照組高38.55%，POD活性為41.443 3 U/(g·min)，較對照組低62.06%。該研究發現，生根效果最好的處理CAT、SOD活性均最大，POD活性最小。CAT可以催化過氧化氫分解為水和分子氧，從而減輕HO對植物組織的氧化傷害。SOD能夠清除超氧陰離子自由基，從而減少自由基對植物的毒害。POD與植物體內IAA的氧化代謝相關。POD活性降低有利于插穗基部IAA的積累，加快細胞分裂及分化，從而促進不定根的形成。

綜上所述，紅樹莓嫩枝扦插的最佳方案是在4月上旬，ABT濃度為200 mg/L。