長順綠殼蛋雞快慢羽品系的建立與自別雌雄配套系的研究

丁金龍，劉敬壽

（長順天農綠殼蛋雞實業有限公司，貴州 長順 550700）

長順綠殼蛋雞產區位于黔南州長順縣而得名，境內喀斯特地貌特征，地勢復雜，山高坡陡，交通閉塞，閉鎖繁育，形成獨特的地方品種長順綠殼蛋雞。長順綠殼蛋雞體型緊湊，結構勻稱，羽毛緊密，背部平直，皮膚為白色。喙平直，灰或黑色；虹彩橘黃色，耳葉紅色或黑色；脛、爪黑色。公雞單冠直立，5～7齒，髯大，呈鮮紅色；頸羽、鞍羽赤紅，背羽、腹羽紅黑相間，主翼羽、尾羽墨綠而有光澤。母雞羽色以麻黃色居多，有少量黑麻羽和白羽。雛雞絨毛以黃麻色居多，少數為黑色、淡黃色，背上有條狀黑色絨毛帶，喙、脛、趾多為黑色[1]。

隨著近年來經濟水平提高，人們對生活品質追求越來越高，對食材的選擇偏向健康和營養。長順綠殼雞蛋呈橢圓形，蛋殼墨綠色，厚而致密。長順綠殼雞蛋中硒、碘、鋅等人體所需的礦物質含量較高，還富含大量對人有益的腦磷脂、卵磷脂、神經磷脂及多種微量元素和維生素[2]。長順綠殼雞蛋于2014年9月通過原國家質檢總局批準對“長順綠殼雞蛋”實施地理標志產品保護。長順綠殼雞蛋具有很大的市場和推廣價值。為了進一步節約綠殼蛋雞的生產成本，提高經濟效益，針對長順綠殼蛋雞建立快、慢羽（以下簡稱快慢羽）品系，使出殼雛雞根據羽型鑒別雌雄，提高鑒別效率和準確率，減少鑒別感染風險，提高雛雞成活，實現商品雞分類飼養。

快慢羽基因是由性染色體上的一對同位點基因（K，k）控制，慢羽對快羽為顯性。鳥類性染色體的基因型為雄性（ZZ）雌性（ZW）。快慢羽公母共有5種基因型，即快羽型公雞（kk）、快羽型母雞（k-）、慢羽型母雞（K-）、慢羽型公雞（Kk）或（KK）[3]。根據羽速表現型區分快羽型公母雞和慢羽型母雞為純合子，慢羽型公雞有兩種基因型，可能存在雜合慢羽基因型，需要進行測交或基因檢測選留純合慢羽基因型，淘汰雜合慢羽型。雛雞通過快慢羽鑒別雌雄簡單便易、快速準確、節約成本，可利用快慢羽基因的性連鎖這一特性，純化品系，建立快慢羽雌雄自別的配套系。

1 材料與方法

1.1 材料

采用飼養于長順天農綠殼蛋雞實業有限公司原種場長順綠殼蛋雞純種公雞100只，母雞1 500只為素材。

1.2 方法

1.2.1 種蛋收集 將長順綠殼蛋雞純種100只公雞人工采精于集精杯中，用輸精槍混精后人工輸精到1 500只母雞，連續輸精3遍后，12 d為1個周期，收集2個周期，第一次收集種蛋9 760枚，第二次收集9 680枚，合計19 440枚。

1.2.2 種蛋入孵 將每天收集的長順綠殼蛋雞種蛋在長順天農公司原種場孵化車間熏蒸消毒20 min，熏蒸試劑采用28 ml/m3甲醛。每批次集蛋結束后用青島41研究所生產的19 200型全自動孵化機進行孵化出雛。

1.2.3 出殼雛雞觀測羽型分布 參照包世增[4]，宋素芳、康相濤、孫桂榮等[5]劃分羽型的方法，將快羽羽型分為2類，慢羽羽型劃分為4類。快羽型：主翼羽長于覆主翼羽且絕對差值大于等于5 mm的為R1型，小于5 mm而大于2 mm的為R2型；慢羽型：等長型（主翼羽與覆主翼羽等長）；倒長型（主翼羽短于覆主翼羽）；未長出型（主翼羽未長出或主、覆翼羽均未長出）；微長型（主翼羽長于覆主翼羽在2 mm以內）。將出殼的雛雞依據上述羽型劃分方法進行快慢羽分類鑒別，統計出長順綠殼蛋雞純系的快慢羽羽型分布。

1.2.4 翻肛鑒別 24 h內將分好類的長順綠殼蛋雞快慢羽雞群進行翻肛雌雄鑒別，選留快羽型和慢羽的等長型、倒長型、未長出型且符合長順綠殼蛋雞外貌特征的健康雛雞。

1.2.5 切腳標記 快羽R1型切左外腳趾；快羽R2型切左中腳趾；慢羽等長型切右外腳趾；慢羽型倒長型和未長出型切右中腳趾。

1.2.6 飼養方法 飼養地點在長順天農綠殼蛋雞實業有限公司原種場，進苗前將育雛舍升溫至35 ℃[6]。育雛舍飼養階段0～7周，全自動控溫，1～2周33～35 ℃，2周之后每周下降2 ℃，直至降至室溫[7]。8～18周齡在育成舍飼養，19周齡后在單體產蛋籠飼養，全程的飼養管理和免疫保健均按照長順綠殼蛋雞飼養管理手冊進行。并分別在8、12、18周齡對長順綠殼蛋雞快羽群和慢羽群進行外觀和生長性能選擇，淘汰不符合育種要求的個體。在13、17周齡和30周齡對快慢羽群進行白痢檢測，淘汰陽性個體。在28周齡對快慢羽群進行白血病檢測，淘汰陽性個體。31周齡對留種公雞進行精液品質測定，選留發育良好、外觀符合品種特征且精液品質好的健康種雞備用。

1.2.7 基因型檢測 根據快慢羽伴性遺傳規律，快羽為隱性，其表現型和基因型一致，不必再進行基因檢測，可確定快羽雞為純合基因型[8]。在慢羽雞中，由于母雞性染色體為異型染色體，在Z染色體上只有1個K基因，雖屬于顯性遺傳，但表現型仍與基因型一致，也不需要進行基因檢測[9]。但慢羽型母雞中等長型羽型存在鑒別誤差，需要對慢羽型母雞中等長型羽型群體（切右外趾）和慢羽公雞群體進行基因檢測。慢羽公雞和慢羽等長型母雞進行基因檢測。

1.2.8 純繁驗證及純系擴群 34周齡將選出的快羽公雞群和母雞群混精自交擴群；將基因檢測出的純合慢羽群混精自交擴群。分別收取2批種蛋，每批3 000枚合格種蛋，熏蒸消毒后在原種場孵化車間進行孵化，分別統計后代雛雞快慢羽群體準確率。用快羽公雞群雜交慢羽母雞群，收2批種蛋，每批500枚各個種蛋，熏蒸消毒后在原種場孵化車間進行孵化，統計雜交后代雛雞快慢羽自別雌雄準確率。

1.2.9 純系擴群建立純系 根據上述出苗測定結果，若快慢羽純系的快慢羽比例達到99 % 以上，配套系自別準確率達98 % 以上，即可組建長順綠殼蛋雞快慢羽純系。

2 結果與分析

2.1 育種素材孵化結果

長順綠殼蛋雞素材群種蛋孵化出苗統計結果見表1。2個批次平均受精率91.8 %，出苗率85.5 %，健雛率95.55 %。經快慢羽觀測雛雞統計結果見表2，快羽比例為77.3 %，慢羽比例為22.7 %，由此可見長順綠殼蛋雞原始群主要以快羽為主。

表1 長順綠殼蛋雞素材群孵化出苗結果

表2 雛雞快慢羽羽型分布

2.2 慢羽公雞和慢羽等長型母雞基因檢測結果

經過對長順綠殼蛋雞外觀表型、生長性能、疫病凈化選擇后，共選留下慢羽公雞278羽，慢羽等長型母雞594羽，采血進行基因檢測結果見表3，慢羽公雞雜合子有116羽，純合子162羽，純合子比例58.3 %，慢羽等長型母雞雜合子31羽，純合子比例94.8 %。

表3 慢羽公雞和慢羽等長型母雞基因檢測結果

2.3 自繁擴群建立快慢羽純系及驗證

將通過品種選擇留下的快羽群和基因檢測留下的慢羽群分別自繁擴群，分別建立快羽純系和慢羽純系。根據孵化出雛快慢羽觀測驗證結果見表4。由表4可以看出：快羽系中快羽占比99.86 %，慢羽系中，慢羽占比99.96 %，符合建立純系要求。長順綠殼蛋雞快慢羽自別雌雄配套系后代快慢羽自別雌雄準確率均在99 % 以上，符合大生產使用要求。

表4 快羽系、慢羽系自繁擴群出雛羽型分布

表5 長順綠殼蛋雞快慢羽自別雌雄配套系驗證結果

3 討論

從長順綠殼蛋雞孵化結果分析，其受精率、出苗率、健雛率均在正常范圍，孵化2批種蛋共計19 418枚，受精率、出苗率、健雛率結果相差不大，收集慢羽雞占比數據具有代表性。

長順綠殼蛋雞以快羽為主，慢羽雞占比22.7 %，沒有找到長順綠殼蛋雞慢羽占比相關報道，與其他地方品種慢羽雞占比沒有比價價值。

本配套系在對慢羽公雞雜合子測定中，選擇用慢羽基因檢測的方式，而非其他學者宋素芳[5]、謝金防[10]、歐陽建華[11]等采用的測交測定的方式，測定效率和準確率更高，成本更低。

利用慢羽伴性遺傳基因選育快慢羽自別雌雄配套系，其準確率一般在98 % 以上，如宋素芳報道：公雛99.23 %，母雛99.58 %[5]，謝金防報道：98 %[10]，歐陽建華報道：公雛100 %，母雛95.79 %[11]等。本配套系準確率達到99.76 %，略高于98 %，可作為一項可靠的技術在生產中推廣。

在蛋雞和其他地方雞品種的生產中，早已利用快慢羽自別雌雄技術，長順綠殼蛋雞作為我國優質地方品種還在使用翻肛鑒別的傳統技術，本研究為長順綠殼蛋雞提供一種快慢羽鑒別雌雄技術，提高鑒別效率和準確率，降低生產成本，減少鑒別感染風險。

4 結論

從出雛羽型觀察得出長順綠殼蛋雞主要以快羽型為主，占77.3 %，慢羽型占比22.7 %。慢羽型公雞和慢羽等長型母雞基因檢測純合子占比分布為58.3 % 和94.8 %。

組建快慢羽純系擴繁后代出雛快羽系中快羽占比99.86 %，慢羽系中慢羽占比99.96 %。通過基因檢測能夠快速準確的確定慢羽純合子公雞和慢羽母雞，與傳統測交基因試驗相比減少工作量和提高準確率。快慢羽自別雌雄配套系后代準確率達到99.76 %，雖未達到完全純合，但較一般翻肛鑒別準確率在95 % 以上要求，該研究比其鑒別準確率提高4 % 以上，較宋素芳報道：公雛99.23 %，母雛99.58 %[5]，謝金防報道：98 %[10]，歐陽建華報道：公雛100 %，母雛95.79 %[11]等配套系水平略高，可以應用于生產推廣。