Sysmex 血細胞分析儀與手工鏡檢在白細胞分類計數百分比檢測中的應用

童蘭庭，力曉涵（通信作者），王建平，范婷

南京醫科大學第二附屬醫院檢驗醫學中心 （江蘇南京 210011）

血細胞分析是血液學檢驗的一個常規檢測項目，其中的白細胞分類計數百分比是臨床所關注的重點之一。白細胞分為粒細胞（granulocyte，GRAN）、淋巴細胞（lymphoma，L）、單核細胞（monocyte，M），其中粒細胞又分為中性粒細胞（neutrophil，N）、嗜酸性粒細胞（eosinophil，E）、嗜堿性粒細胞（basophil，B）。目前，全自動五分類的血細胞分析儀被廣泛應用于臨床血細胞的檢測中。本實驗室采用的是日本希森美康（Sysmex）公司的XN 系列全自動血細胞分析儀，型號分別為XN-350、XN-550 和XN-1800。全自動血細胞分析儀檢測白細胞分類計數百分比具有準確、快捷的優點，但仍然不能完全替代血涂片手工顯微鏡鏡檢（手工鏡檢）[1-2]。本研究隨機選取2020 年8 月的50 份血常規標本，比較XN 系列血細胞分析儀與手工鏡檢在白細胞分類計數百分比檢測中的應用價值，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本

收集2020 年8 月門診及病房的血常規標本50 份（每天10 份，連續收集5 d）。

1.2 儀器

日本希森美康（Sysmex）公司開發的XN-350（儀器1）、XN-550（儀器2）、XN-1800（儀器3）血細胞分析儀；奧林巴斯CX-21 光學顯微鏡。

1.3 試劑

手工鏡檢試劑為珠海貝索生物技術有限公司的瑞氏-吉姆薩染色液（A 液）和pH 6.8磷酸鹽緩沖液（B 液），生產批號C200603。

儀器1與儀器2采用的試劑為儀器配套的CELLPACK DCL 全血稀釋液、SULFOLYSER 溶血劑、Lysercell WDF（WDF 溶血劑）、Fluorcell WDF（WDF 染色液）、CELLCLEAN AUTO 清洗液。

儀器3采用的試劑為儀器配套的CELLPACK DCL 全血稀釋液、SULFOLYSER 溶血劑、Lysercell WDF（WDF 溶血劑）、Fluorcell WDF（WDF 染色液）、Lysercell WNR（WNR 溶 血 劑）、Fluorcell WNF（WNF 染色液）、Fluorcell PLT（PLT 熒光染色液）、CELLPACK DFL 全血稀釋液以及低值血小板（platelet，PLT）檢測專用CELLCLEAN AUTO清洗液。

1.4 檢測方法

由專業技術人員按照標準操作程序雙盲法分別做儀器檢測和手工鏡檢。（1）儀器檢測：新鮮全血標本分別在每臺血細胞分析儀上進行白細胞分類計數百分比檢測（自動進樣架模式）。（2）手工鏡檢：每份標本制作血涂片做瑞氏染色后，遵循《全國臨床檢驗操作規程》[3]對白細胞分類計數百分比進行手工鏡檢。

1.5 觀察指標

比較XN 系列血細胞分析儀與手工鏡檢的檢測結果。

1.6 統計學處理

采用SPSS16統計軟件進行數據分析，以中位數（最小值～最大值）表示數據，采用兩關聯樣本非參數檢驗；相關性采用Spearman相關分析，相關系數r反映關聯性水平（r＜0.4則可認為相關性較差，0.4≤r＜0.6為一般相關，r≥0.6為相關性較好），P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 儀器檢測與手工鏡檢結果比較

儀器2、儀器3的M%與手工鏡檢檢測結果比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；3種型號血細胞分析儀的L%、N%、E%、B%及儀器1的M%與手工鏡檢檢測結果比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 儀器檢測與手工鏡檢結果比較（%）

2.2 相關性分析

Spearman相關分析結果顯示，3種型號血細胞分析儀的L%、M%、N%、E%和儀器1的B%與手工鏡檢檢測結果存在一定相關性（r均≥0.4，P＜0.05）；而儀器2、儀器3的B%與手工鏡檢檢測結果的相關性較差，見表2。

表2 儀器檢測與手工鏡檢結果的相關性分析

3 討論

全自動血液分析儀目前被廣泛應用于各級醫院檢驗科，本實驗室的XN 系列全自動血細胞分析儀采用的是通過電阻抗法、比色法、流式激光散射技術、核酸熒光染色技術，通過側向散射光、側向熒光信號和前向散射光，分別獲得反映細胞體積大小、RNA 及DNA 含量多少、細胞內核的形狀及有無顆粒存在等信息；該系列儀器不僅能獲得準確的白細胞五分類結果，也可以根據核酸含量，得到未成熟粒細胞的參數，同時還可以進行網織紅細胞計數及提供未成熟網織紅細胞指數；此外，該儀器可進行核酸熒光染色，其PLT 計數結果更加可靠。

XN-1800是XN 系列的新機型，該型號儀器在提高原有儀器性能的基礎上，可通過試劑反應、信號處理、分析算法的最優化方法檢出白細胞分類（WDF 通道）和異常細胞（WPC 通道），并提高報警信息（IP 信息）性能。但該型號儀器在白細胞分類特別是異常細胞的檢出性能方面也與其他類型儀器存在同樣的局限，即存在一定的假陽性率和假陰性率，并不能完全表現出受檢標本的血細胞形態特征，從而造成準確性降低，尤其在某些疾病造成血細胞形態改變時，單純依靠儀器檢測往往會造成漏診或者誤診。

手工鏡檢是血液檢測的金標準。由于目前臨床只有白細胞計數商品校準物，尚無白細胞分類計數百分比商品校準物，采用手工鏡檢測定結果對血細胞分析儀的白細胞分類計數百分比檢測結果進行校準和驗證，是保證檢驗結果準確可靠的前提[4]。本研究結果顯示，儀器2、儀器3的M%與手工鏡檢檢測結果比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；3種型號血細胞分析儀的L%、N%、E%、B%及儀器1的M%與手工鏡檢檢測結果比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。這可能是由于血細胞分析儀在識別白細胞形態方面仍存在一定的限制，尤其會將L 分類到M，造成M%假性增高[5-6]。Spearman相關分析結果顯示，3種型號血細胞分析儀的L%、N%與手工鏡檢檢測結果的相關性最好（r≥0.9），E%與手工鏡檢檢測結果的相關性一般（0.4≤r＜0.6），儀器1的M%與手工鏡檢檢測結果的相關性一般（0.4≤r＜0.6），而儀器2、儀器3的M%與手工鏡檢檢測結果的相關性較好（r≥0.6），儀器1的B%與手工鏡檢檢測結果的相關性一般（0.4≤r＜0.6），而儀器2、儀器3的B%與手工鏡檢檢測結果的相關性較差（r＜0.4）。這可能與血液中B 的含量較少及該型號儀器的檢測原理（如該儀器有WNR 通道能計數B 和有核紅細胞）有關。因此，為使血常規檢驗結果更加可靠，雖然手工鏡檢耗時，但其對細胞形態的識別是目前血細胞分析儀無法比擬的，同時手工鏡檢也能消除儀器對特殊病例（如血液病）標本檢驗的局限性，即存在一定的假血細胞形態特征，僅依賴儀器檢測會使準確性降低，往往造成漏診或者誤診，但同時進行手工鏡檢則可提高特殊少見細胞的檢出率。

綜上所述，雖然儀器2、儀器3的M%與手工鏡檢檢測結果存在差異，且儀器2、儀器3的B%與手工鏡檢檢測結果的相關性較差，但考慮到外周血中M 與B 含量較少，且XN 系列血細胞分析儀在L%、N%、E%的檢測中具有良好的性能，因此XN 系列血細胞分析儀適合大批量標本的快速檢測，日常工作中可與手工鏡檢結合，同時應定期對儀器的白細胞分類計數百分比檢測結果進行校準，以確保檢測的準確性。