lncRNA SNHG7對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲、遷移的影響

王昆鵬 張建黨 董孟寧 劉素杰 徐廣建

膠質(zhì)瘤是最常見(jiàn)的惡性腦腫瘤[1]。近年來(lái)，膠質(zhì)瘤的研究已經(jīng)取得了很大進(jìn)展，但是總體生存率仍未見(jiàn)明顯提高[2]。探索膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制，對(duì)于改善膠質(zhì)瘤的治療效果具有重要意義。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在表觀遺傳調(diào)控、細(xì)胞分化及細(xì)胞周期調(diào)控等過(guò)程中發(fā)揮重要作用，與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[3～6]。研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA小核仁RNA 宿主基因7（small nucleolar RNA host gene 7，SNHG7）與前列腺癌[7]、胰腺癌[8]等增殖和侵襲有關(guān)。本文分析lncRNA SNHG7與膠質(zhì)瘤病人預(yù)后的關(guān)系及其對(duì)瘤細(xì)胞細(xì)胞侵襲和遷移的影響。

1 材料與方法

1.1 組織樣本來(lái)源 納入標(biāo)準(zhǔn)：病理檢查證實(shí)為膠質(zhì)瘤；術(shù)前未接受放療、化療或免疫治療；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他腫瘤；合并嚴(yán)重心、肝、腎等臟器功能疾病；合并免疫或代謝性疾病。選取2015年6 月至2016 年3 月符合上述標(biāo)準(zhǔn)的膠質(zhì)瘤80 例，其中男48 例，女32 例；年齡28～72 歲，平均（47.01±9.23）歲；WHO分級(jí)為Ⅰ級(jí)10例，Ⅱ級(jí)22例，Ⅲ級(jí)22例，Ⅳ級(jí)26 例；術(shù)后隨訪截止2020 年4 月。另選取顱腦損傷顱內(nèi)減壓術(shù)中切取的非腫瘤腦組織50 例為對(duì)照，其中男26 例，女24 例；年齡23～68 歲，平均（46.80±6.27）歲。本研究獲醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 RT-PCR 檢測(cè)組織lncRNA SNHG7 水平TRIzol試劑（上海源葉生物科技有限公司）提取組織總RNA。用反轉(zhuǎn)錄試劑盒（上海一研生物科技有限公司）獲得cDNA，隨后用2×SYBR Green PCR Mastermix 試劑盒（上海一研生物科技有限公司），以cDNA為模板進(jìn)行PCR 反應(yīng)，反應(yīng)條件：95 ℃、10 min；95 ℃、30 s；60 ℃、15 s；72 ℃、20 s；40 個(gè)循環(huán)；72 ℃、10 min。用2-△△Ct法計(jì)算相對(duì)表達(dá)量。以表達(dá)量中位數(shù)為截?cái)嘀担譃楦弑磉_(dá)組和低表達(dá)組。

1.3 細(xì)胞培養(yǎng)及siRNA 轉(zhuǎn)染 膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U87（中科院上海細(xì)胞庫(kù)）在含10%胎牛血清（上海唯科生物制藥有限公司）的DMEM F12培養(yǎng)基（上海唯科生物制藥有限公司）中進(jìn)行培養(yǎng)。……