腦膠質瘤病人血漿miR-9-3p的變化及其與病人臨床預后的關系

孫玉書 王 飛 王振飛 王選平 牟永平

膠質瘤是成人顱內最常見的惡性腫瘤[1]。近年來，膠質瘤的治療主要依靠手術切除，并結合放療和化療的聯合治療，但腦膠質瘤具有高度侵襲性，術后容易復發，中位生存期僅12個月[2]。因此，探討腦膠質瘤的發病機制，尋找新的診斷和治療方法顯得尤為重要。微小核糖核酸（microRNA，miRNA）是一類長度22～24 個核苷的非編碼RNA，在進化上高度保守，通過與靶基因mRNA 3'-UTR區域結合調控基因的表達，調節細胞分化、凋亡、細胞周期、增殖和分裂等[3，4]。Yang 等[5]研究發現，腦膠質瘤組織miRNA 芯片差異表達譜中miR-9-3p 表達下調。本文選取42例腦膠質瘤和20 例健康體檢者為對照，用RT-PCR法檢測血漿miR-9-3p 水平，分析血漿miR-9-3p 水平與腦膠質瘤病人生存預后的關系。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2016 年3 月1 日至2019 年3 月1日收治的腦膠質瘤42 例，其中男23 例，女19 例；年齡14～68 歲。另選20 例同期健康查體者為對照，其中男11例，女9例；年齡18～65歲。本研究經內蒙古醫科大學倫理委員會批準，病人簽署知情同意書。

1.2 術后隨訪 采用電話、微信、門診等方式隨訪，隨訪時間為手術之日到死亡或末次隨訪時間至2021年3月1日。本文42例腦膠質瘤隨訪24～60個月，記錄生存情況。

1.3 PCR 檢測血漿miR-9-3p 水平 術前取靜脈血2 ml，離心分離血漿備用。使用miRcute miRNA 血清/血漿提取分離試劑盒（北京天根生化公司）提取血漿總RNA，測定總RNA 濃度和純度，置-80 ℃保存備用。使用增強型miRNA cDNA 第一鏈合成試劑盒（北京天根生化公司）反轉錄為cDNA，應用miRcute（SYBR Green）增強型miRNA 熒光定量檢測試劑盒（北京天根生化公司）擴增，使用ABI 公司7500 系列實時熒光定量PCR 儀進行擴增。……