腦膜瘤組織FASN、EphA2表達與疾病進展的關系

林昌福 劉家豪 于朝春

腦膜瘤主要指起源于腦膜部位的原發性腫瘤，以良性居多，對患者產生的影響主要與腫瘤對大腦不同功能區的壓迫情況相關，因此患者臨床癥狀并無顯著特異性表現[1-2]。臨床診斷腦膜瘤一般結合臨床特征、血清腫瘤標志物表達水平、腦CT影像、術后病理組織檢測等進行，多數患者經手術治療切除病灶后恢復良好，可長期生存，但少數患者仍存在疾病復發風險[3-4]。部分學者指出，腫瘤組織中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)直接參與細胞膜的合成代謝進程，其表達與腫瘤細胞的增殖速率密切相關[5]；上皮細胞激酶(epithelial kinase A2,EphA2)對細胞侵襲-黏附起到調控作用，其表達水平隨腫瘤惡變程度升高而上升[6]。國內外研究大多集中于觀察FASN、EphA2在乳腺癌、卵巢癌中的表達及臨床意義，而有關其在腦膜瘤中的表達則少見報道[7-8]。本研究對腦膜瘤病理組織中FASN、EphA2的表達進行探究，現將相關結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧2015年6月至2020年7月于本院就診的70例腦膜瘤患者臨床資料，其中：男性41例，女性29例；年齡22～68歲，平均年齡(44.34±5.27)歲；病程5個月～4年，平均病程(1.83±0.52)年；臨床分期[9]：Ⅰ期39例，Ⅱ期20例，Ⅲ期11例；病理分型：砂粒型28例，纖維型23例，混合型12例，血管瘤型5例，其它2例。納入標準：①符合美國國立綜合癌癥網絡發布的腦膜瘤診斷標準[10]，腦部影像檢查存在可測量病灶，結合病理組織檢測結果確診為腦膜瘤；②均于本院首次接受腫瘤切除手術治療，符合手術適應證條件；③近期未接受化療、放療治療；④精神正常；⑤患者臨床資料保留完整。排除標準：①腦膜瘤為非原發病灶，同時合并其它類型惡性腫瘤；②心、肺、腎、肝嚴重損傷；③妊娠期、哺乳期女性患者；④合并內分泌系統疾病；⑤凝血功能異常；⑥既往無顱腦外科手術史；⑦合并顱腦外傷；⑧合并嚴重感染。

1.2 檢測方法及判定標準

術中提取腫瘤組織及病灶周邊距病變2～3 cm的正常腦膜組織送檢，經石蠟包埋后制得組織切片，對檢測樣本予以脫蠟、水化處理，滴加檸檬酸鈉溶液，微波加熱修復抗原，使用磷酸鹽緩沖溶液洗滌樣本，以羊血清封閉，采用免疫組化技術檢測組織中FASN、EphA2的表達，一抗滴加兔抗人多克隆抗體(美國Bioworld Technology公司)，4℃孵育過夜，二抗滴加酶標羊抗兔抗體(美國Earthox公司)，DAB充分顯色后使用蘇木精復染封片，試劑盒購自上海康朗生物科技有限公司，將磷酸鹽緩沖溶液作為陰性對照，于高倍顯微鏡下觀察組織染色情況，結果分別交由3名病理科專業醫師獨立完成判讀。細胞質、細胞核呈現棕黃色或棕褐色即表明為陽性細胞，隨機選取鏡下5個不同區域進行計數，陽性信號表達強度判定標準如下[11]：①陰性(-)：視野內未見染色陽性細胞，或陽性細胞數占細胞總數比例≤10%；②弱陽性(+)：10%<陽性細胞數占細胞總數比例≤25%；③中度陽性(++)：25%<陽性細胞數占細胞總數比例≤50%；④強陽性(+++)：陽性細胞數占細胞總數比例>50%。除陰性結果外，其它納入總陽性率統計范疇。

1.3 觀察指標

(1)腦膜瘤腫瘤組織及病灶周邊正常組織中FASN、EphA2的表達情況。(2)不同病理分期、病理類型、淋巴結轉移與否的腫瘤組織FASN、EphA2的表達情況。(3)術后1年腦膜瘤復發及未復發患者腫瘤組織中FASN、EphA2的表達情況。

1.4 統計學方法

使用統計學軟件SPSS 22.0處理數據。計數資料用率表示，行χ2檢驗；不同等級資料采用R×C列聯表及Spearman秩檢驗相關性。P<0.05表明差異有統計學意義。

2 結果

2.1 腦膜瘤與病灶周邊組織FASN、EphA2表達比較

腦膜瘤組織FASN、EphA2表達陽性例數分別為70例(100.00%)、57例(81.43%)，病灶周邊正常組織中FASN、EphA2表達陽性例數分別為55例(78.57%)、15例(21.43%)，腦膜瘤FASN、EphA2表達陽性率均高于病灶周邊正常組織(χ2=16.800、50.441，P均<0.05)，見表1。

表1 腦膜瘤與病灶周邊正常組織FASN、EphA2表達比較/例

2.2 不同臨床分期患者FASN、EphA2表達比較

不同臨床分期患者腫瘤組織中FASN、EphA2表達陽性率比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。FASN、EphA2表達水平隨WHO腦膜瘤臨床分期結果提升而升高，與臨床分期結果顯著相關(γ=0.568、0.303，P<0.05)，見表2。

表2 不同臨床分期患者FASN、EphA2表達比較/例

2.3 不同病理類型患者FASN、EphA2表達比較

不同病理類型患者腫瘤組織中FASN、EphA2表達陽性率比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 不同病理類型患者FASN、EphA2表達比較/例

2.4 淋巴結是否轉移患者FASN、EphA2表達比較

70例患者中，共有23例出現淋巴結轉移，47例未出現淋巴結轉移，發生淋巴結轉移的患者腫瘤組織中FASN、EphA2表達陽性率高于未發生淋巴結轉移的患者(P<0.05)，見表4。

表4 不同淋巴結轉移情況患者FASN、EphA2表達比較/例

2.5 復發與未復發患者FASN、EphA2表達比較

70例患者中，共有3例術后1年內出現復發，67例未出現復發，復發組患者腫瘤組織中EphA2表達陽性率高于未復發患者(P<0.05)，FASN表達陽性率與未復發患者相比，差異無統計學意義(P>0.05)，見表5。

表5 復發與未復發患者FASN、EphA2表達比較/例

3 討論

腦膜瘤早期癥狀表現隱匿，腫瘤生長速度緩慢，病程較長，轉移率較低，但復發風險較高，楊松等[12]學者研究指出，良性腦膜瘤患者術后復發情況不僅與腫瘤特征、手術切除方式相關，也與腫瘤病灶血管生成情況和細胞增殖活性有關。腫瘤的發生進展受多種細胞因子及相關蛋白調控，對機體組織中酶類物質的表達情況進行檢測將有助于臨床了解腫瘤的生物活性，為疾病診斷及預后預測提供有價值的參考信息[13]。FASN對細胞內脂肪酸合成起到催化作用，腫瘤細胞在生長代謝過程中需要脂肪等營養物質提供能量支持，為滿足細胞的脂肪供應需求，FASN的表達量隨之上升，并間接誘導腫瘤細胞發生上皮-間質轉變[14]。EphA2屬于細胞外調節蛋白激酶，其具有多樣化的生物功能，在腫瘤血管生成過程中介導細胞的生長分化[15]。本研究結果顯示，腦膜瘤患者腫瘤組織內FASN、EphA2表達陽性率明顯高于病灶周邊正常組織，表明腦膜瘤新生血管活躍度較高，脂肪生成及消耗速率較正常組織更快。

既往研究結果表明，不同臨床分期腫瘤的增殖狀態和侵襲風險存在較大差異，隨著臨床病理分級的增加，血管內皮生長因子協同環氧合酶-2共同促進內皮細胞遷移、增殖，加大局部病灶血流灌注的同時刺激更多新生血管形成[16]。本研究結果顯示，惡化、侵襲程度較高的Ⅱ、Ⅲ期腦膜瘤腫瘤組織中FASN、EphA2的表達陽性率也處于較高水平，發生淋巴結轉移的腫瘤組織中FASN、EphA2的表達陽性率高于未發生淋巴結轉移的腫瘤組織。陳阿靜等[17]發現Ⅱ、Ⅲ級腦膜瘤中FASN均呈現過表達，與本研究結果一致。董家志等[18]研究表明腦膜瘤組織中EphA2對特異性配體識別能力降低，導致磷酸化進程受阻，降解效率降低，而腫瘤細胞之間的黏附性能是影響EphA2與下游信號轉導蛋白發生反應的主要因素，由此可見，EphA2在腫瘤組織中的表達水平是腫瘤組織內部連接性能的直接體現，EphA2表達陽性率越高，表明腫瘤血管內皮細胞粘連強度越低，意味著腫瘤組織發生脫落和游離的可能性越大，轉移風險也越高。

本研究結果顯示，不同病理分型腦膜瘤腫瘤組織中FASN、EphA2的表達未見顯著差異，出現此結果的原因可能在于，本研究入選病理類型主要為砂粒型、纖維型，其中砂粒型內部表現出均勻鈣化特征，纖維型內部分布大量膠質纖維，此類腫瘤結構限制了內部血管的生長增殖，同時也限制了FASN、EphA2的過表達，因此發生惡變的可能性較低，較少出現轉移。但本研究納入樣本并未覆蓋腦膜瘤所有類型，結果可能存在不確定性，因此該結論仍有待進一步論證。本研究還發現，術后疾病復發患者腫瘤組織中EphA2的表達陽性率高于未復發患者，且均為強陽性，與左延卿等[19]研究結果相近，但復發與未復發患者FASN的表達情況相近，原因可能在于腦膜瘤患者1年內復發率偏低、樣本數據相對缺乏，因而未能體現FASN的陽性表達差異。臨床診療期間可根據病理結果中EphA2的表達預測腦膜瘤復發風險，對高風險患者加強管控，結合藥物及靶向治療等方案予以干預，以改善患者預后生存結局。

綜上所述，腦膜瘤患者腫瘤組織中FASN、EphA2表達陽性率高于病灶周邊正常組織，其表達水平隨患者臨床分期的提升而升高，但與病理分型無直接聯系，發生淋巴結轉移的患者FASN、EphA2表達陽性率均偏高，術后出現復發的患者EphA2表達陽性率偏高。