一起豬多種病毒混合感染的案例分析

袁庭娟，王 君，陳利峰，郭 垚，袁庭攀

（1.西安申亞動物保健品有限公司，陜西 西安 710000；2.陜西鑫誠大唐畜牧有限公司，陜西 西安 710000）

1 發(fā)病情況

寧夏某家庭農(nóng)場存欄母豬200頭，全場總存欄數(shù)2 300余頭，保育存欄800余頭，肥育存欄1 200余頭。豬場遠(yuǎn)離市區(qū)。2021年3月6日豬場肥育豬開始發(fā)病，并出現(xiàn)死亡病例。保育豬長期存在個(gè)別發(fā)病豬。場主擔(dān)心傳染性疾病，迅速采集20份口鼻肛棉拭子送至某檢測機(jī)構(gòu)進(jìn)行“非洲豬瘟”排查[1]，檢測結(jié)果為陰性。

2 臨床癥狀

肥育豬體重60～100 kg，發(fā)病豬只體溫38.5～40.5 ℃之間、個(gè)別病例體表皮膚出現(xiàn)不規(guī)則瘀血斑、采食量下降[2]，精神狀態(tài)欠佳。截至3月15日，共計(jì)死亡豬只20頭。豬只死亡前體表發(fā)紅、氣喘。

與此同時(shí)哺乳仔豬和保育階段豬只個(gè)別腹式呼吸，伴有咳嗽、腹瀉癥狀，露脊梁骨，眼結(jié)膜潮紅、有淚斑，腹股溝淋巴結(jié)腫大、青紫，乳頭發(fā)青。

3 剖檢癥狀

場主對瀕死豬只（死亡6 h以內(nèi)）進(jìn)行剖檢，肥育豬1頭，保育豬2頭。

肥育豬剖檢發(fā)現(xiàn)：全身淋巴結(jié)不同程度的腫大、充血，腎臟邊緣有出血點(diǎn)，脾臟邊緣針尖狀凸起呈鋸齒狀，回腸、盲腸交匯處出現(xiàn)不同程度的黏膜脫落及麥粒大潰瘍。

保育豬剖檢發(fā)現(xiàn)：腹股溝淋巴結(jié)腫大、青紫、土黃色樣變、切面多汁，胸腔有積液、積液略有渾濁，心臟包裹有纖維素性滲出，肺臟大面積淤血，脾臟腫大、邊緣有梗死現(xiàn)象，腎臟土樣色變，腸內(nèi)黏膜部分脫落。

4 實(shí)驗(yàn)室檢測

4.1 檢測標(biāo)本

采集病料組織樣品3份，送實(shí)驗(yàn)室檢測中心檢測。

4.2 試驗(yàn)試劑

柱式DNA核酸提取試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號YDNA-TQ 20200805P。柱式RNA核酸提取試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號YRNATQ 20201105P。蛋白酶K，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號TH030101。豬瘟病毒（CSFV）通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測試劑盒，哈爾濱元亨生物，試劑批號CSFV20200921P。豬偽狂犬病病毒（PRV）實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑盒，哈爾濱元亨生物，試劑批號PRV20201118P。豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號PCV2 20201118P。豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測試劑盒，哈爾濱元亨生物，生產(chǎn)批號PRRSV20200820P。

4.3 試驗(yàn)器材

RT-6100酶標(biāo)分析儀，572105033X，深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司。Real-Time PCR System全自動PCR分析系統(tǒng) Gentier 32R，西安天隆科技有限公司。HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋，上海力辰邦西儀器科技有限公司。TB16-W 離心機(jī)，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司。BBS-DDC醫(yī)用潔凈工作臺，濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)有限公司。

4.4 檢測方法

4.4.1 抗原檢測

（1）樣品處理：組織樣品需要充分研磨處理，棉拭子需充分浸泡處理，全血需冷藏自然析出。所有的樣品均需要高速離心，取上清液備用。

（2）用DNA、RNA提取試劑盒對應(yīng)提取DNA模板、RNA模板，備用。

（3）按照各項(xiàng)目配置體系，設(shè)置運(yùn)行步驟，運(yùn)行監(jiān)測，數(shù)據(jù)采集及結(jié)果分析。

（4）病毒學(xué)檢測統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表1、表2、圖1、表3、圖2、表4、圖3、表5、圖4、表6、圖5。

表1 樣本圓環(huán)病毒2型、藍(lán)耳?。ㄍㄓ眯停┎《尽⒇i瘟病毒、豬偽狂犬病病毒檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)

表2 豬圓環(huán)病毒2型檢測結(jié)果

表3 豬藍(lán)耳?。ㄍㄓ眯停┎《緳z測結(jié)果

表4 豬瘟病毒檢測結(jié)果

表5 豬瘟病毒復(fù)檢結(jié)果

表6 豬偽狂犬病病毒檢測結(jié)果

5 結(jié)果與分析

5.1 PCV2結(jié)果分析

3份組織樣品，經(jīng)過核酸提取，檢測結(jié)果均為陽性，且病毒載量較高。

5.2 PRRSV結(jié)果分析

3份組織樣品，經(jīng)過核酸提取，檢測結(jié)果1份為陽性，2份陰性。

5.3 PRV結(jié)果分析

3份組織樣品，經(jīng)過核酸提取，檢測結(jié)果3份均為陽性。

5.4 CSFV結(jié)果分析

3份組織樣品，經(jīng)過核酸提取，檢測結(jié)果為3號樣品CT值在可疑區(qū)間并出現(xiàn)擴(kuò)增曲線，經(jīng)過復(fù)檢，CT值仍在可疑區(qū)間并出現(xiàn)擴(kuò)增曲線，判定3號樣品為陽性。

6 治療方案

6.1 生物安全

6.1.1 消毒與隔離

（1）消毒。

全場進(jìn)行消毒，建立全方面的消毒體系。濃度調(diào)整為1∶200，申亞-福溶安（主要成分：過硫酸氫鉀復(fù)合物）、濃戊二醛交替使用，連續(xù)使用7～10 d，后隔天消毒1次。工作人員、圈舍使用工具、產(chǎn)床、保育床、限位欄、大欄及凈污道全面消毒。工作服、鞋子用1∶500濃度的消毒液浸泡。帶豬消毒時(shí)消毒藥遠(yuǎn)離豬只口腔、眼睛，消毒時(shí)間選擇日溫度較高時(shí)進(jìn)行，噴灑后密閉15～20 min，后開窗開門通風(fēng)。

（2）隔離。

對于發(fā)病豬進(jìn)行隔離飼喂治療，病癥嚴(yán)重直接淘汰。

6.1.2 免疫 經(jīng)過圓環(huán)病毒2型、豬瘟病毒、偽狂犬病病毒、藍(lán)耳病病毒的核酸檢測，判定該廠為多病毒混合感染病癥。具體免疫程序如下。

（1）保育豬、肥育豬。

全群依次普免圓環(huán)病毒2型疫苗、偽狂犬病疫苗、豬瘟疫苗[3]。

（2）產(chǎn)房仔豬。

1日齡，噴鼻豬偽狂犬病活疫苗1頭份。7日齡肌注藍(lán)耳病活疫苗1頭份[4]，14日齡肌注圓環(huán)病毒2型滅活苗1 mL/頭，21日齡肌注豬瘟活疫苗2頭份，28日齡追加圓環(huán)病毒2型滅活苗2 mL/頭。其它按原有免疫程序執(zhí)行。

（3）母豬、公豬。

母豬、公豬加強(qiáng)免疫，依次免疫圓環(huán)病毒2型滅活苗2 mL/頭，豬偽狂犬病活疫苗2頭份，豬瘟高效疫苗2頭份。其它按原有免疫程序執(zhí)行。

母豬產(chǎn)前30 d、產(chǎn)前15 d各后海穴注射傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)苗4 mL/頭。產(chǎn)后14 d肌注豬藍(lán)耳病活疫苗1頭份。

6.2 藥物防治

6.2.1 斷奶保育豬治療及增強(qiáng)免疫力

（1）治療階段。

疫力多糖粉（主要成分：黃芪多糖）1 000 g，雙黃連可溶性粉1 000 g，包被替米考星預(yù)混劑1 500 g，阿莫西林可溶性粉1 000 g。拌料1 t，連用7～10 d，視豬只健康度酌情使用，個(gè)別豬只使用10～15 d。

（2）增加免疫力。

疫力多糖粉500 g，仔豬?。ㄖ饕煞郑壕S生素、礦物質(zhì)、地衣芽孢桿菌、氨基酸）2 500 g、活力康（主要成分：維生素C）2 500 g、補(bǔ)氣生血素500 g、混合型飼料添加劑（百里香酚+香芹酚+肉桂醛）Ⅰ型260 g，拌料1 t，連用20 d。

6.2.2 公豬、母豬治療及增強(qiáng)免疫力

（1）治療階段。

囊非安（主要成分：黃芪、金銀花、黨參、當(dāng)歸）2 000 g，雙聯(lián)抗可溶性粉（主要成分：金銀花、黃芩、連翹）1 000 g，藍(lán)力凈（主要成分：酒石酸泰萬菌素）200 g，多西環(huán)素1 500 g。拌料1 t，連用7 d。哺乳母豬使用量按采食量減半。

（2）保健階段。

疫力多糖粉500 g、母豬健（主要成分：維生素、礦物質(zhì)、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、氨基酸）2 500 g、活力康2 500 g、補(bǔ)氣生血素500 g，拌料1 t，連用20 d。以妊娠母豬用量計(jì)，哺乳母豬使用量按采食量減半。

7 分析與討論

綜上所述，結(jié)合豬場免疫程序、臨床表現(xiàn)、豬只剖檢情況以及實(shí)驗(yàn)室樣本抗原檢測結(jié)果綜合分析，該豬場存在豬圓環(huán)病毒2型、偽狂犬病病毒、藍(lán)耳病病毒、豬瘟病毒混合感染。方案出具后，嚴(yán)格執(zhí)行，經(jīng)過3個(gè)月的跟蹤觀察，效果顯著。

（1）引起本次發(fā)病的誘因主要是該場的生物安全未做到位。場主自述，分批次引進(jìn)種豬后未能嚴(yán)格按照免疫程序執(zhí)行，免疫存在漏免及免疫劑量不到位等情況。養(yǎng)殖場工作人員消毒、免疫意識差，圈舍衛(wèi)生條件不達(dá)標(biāo)。提出建議如下：圈舍清掃干凈，廠區(qū)全面消毒。全群按照第6部分生物安全版塊要求全面執(zhí)行。

（2）加強(qiáng)母豬群、公豬群管理，藍(lán)耳病按季度凈化。嚴(yán)格按照免疫程序免疫，做到一豬一針頭，疫苗按照說明存放、稀釋、注射。使用完的廢棄物集中高溫消毒處理。合理安排種豬群的營養(yǎng)水平，調(diào)理亞健康豬群，增強(qiáng)抵抗力。科學(xué)補(bǔ)充微量元素及礦物質(zhì)。

（3）加強(qiáng)斷奶仔豬管理。及早教槽，減少斷奶仔豬的斷奶應(yīng)激，換料按照7～10 d逐步更換。控制好圈舍溫度及豬群密度。

養(yǎng)殖場的傳染性疾病關(guān)鍵是生物防控，出現(xiàn)傳染病主要是生物安全缺失或執(zhí)行不到位導(dǎo)致。為了豬只全年處于健康、穩(wěn)定的生產(chǎn)情況下，必須嚴(yán)格做好生物安全管理、豬群的保健、飼養(yǎng)管理、飼料營養(yǎng)的搭配、疾病的診療。時(shí)刻將“預(yù)防為主，治療為輔”的理念貫徹落實(shí)到生產(chǎn)的每一步。