保健品中非法添加藥物的相關分析

任玉琴

（古浪縣人民醫院，甘肅古浪 733100）

隨著社會的發展，越來越多的人關注保健，在生活中也常服用保健品。有很多不法商人在保健品中會非法添加具有降糖作用的藥物達到降糖效果，從而夸大其保健療效。目前，有很多方法用于檢測非法添加降糖藥，如薄層色譜法[1-4]、高效液相法[5-9]、液質法[10-14]、毛細管電泳法[15-16]、近紅外光譜法[17]和拉曼光譜法[18]。本實驗采用高效液相色譜法對市售的糖尿病人用的食療包、保健品進行篩查，檢測其中是否含有二甲雙胍、格列吡嗪、格列齊特和格列喹酮降糖藥，本方法快速簡單，結果準確，可以用于保健品中非法添加降糖藥的快速篩查。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

樣品：降糖茶、降糖食療包和苦瓜洋參膠囊等降糖保健品20批次，均為市售。

試劑：二甲雙胍、格列喹酮、格列吡嗪和格列齊特標準品，購于中國藥品生物制品檢定所；甲醇、乙腈（色譜純），美國Mreda公司；正己烷、乙酸銨、乙酸（色譜純），美國Fisher Scientific公司；水為超純水。

1.2 儀器設備

高效液相色譜儀，美國安捷倫公司；配有二極管檢測器（DAD）；MS1003S電子分析天平，瑞士Mettler Toledo公司；Milli-Q超純水儀，美國Millipore公司；IKA-RV10真空濃縮儀，德國IKA公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 色譜條件

色譜柱：安杰爾C18色譜柱（250 mm×2.1 mm，5 μm）；柱溫：40 ℃；進樣量：5 μL；流動相：乙酸銨10 mmol·mL-1水溶液（A）+和乙腈溶液（B）；梯度洗脫程序：0～5 min，20%～80%乙腈（B）；5～20 min，80%乙腈（B）；20 min，20%乙腈（B）；流速：0.8 mL·min-1。

1.3.2 混合標準品溶液配制

準確稱取各標準品10 mg，用乙腈溶解，轉移至10 mL容量瓶中，定容至刻度，配制成1 000 μg·mL-1混合標準儲備液，于-20 ℃以下儲存。移取上述標準儲備液1 mL，再用乙腈逐級配制成1 μg·mL-1、10 μg·mL-1、50 μg·mL-1、100 μg·mL-1和 200 μg·mL-1的系列標準工作液，混合標準品工作液現用現配。

1.3.3 樣品處理

取試樣適量混勻，研細，稱取粉末10 g（準確至0.001 g），置25 mL容量瓶中，加15 mL乙腈超聲提取（功率300 W、頻率50 kHz）30 min，以8 000 r·min-1離心5 min，取上清有機液，殘渣加乙腈溶液重復提取，合并兩次有機液，旋轉蒸發近干，加1 mL乙腈復溶，過0.45 μm濾膜，備用。

2 結果與分析

2.1 色譜方法的建立

吸取1.3.2項下的混合標準標準工作液100 μg·mL-1，進樣10 μL，按照色譜條件進樣檢測，4種降糖藥能夠得到很好的分離，且不受其他雜質干擾，色譜圖見圖1。

圖1 混合標準標準工作液色譜圖

2.2 線性關系

以 1.3.2 項下的系列標準工作液 1 μg·mL-1、10 μg·mL-1、50 μg·mL-1、100 μg·mL-1和 200 μg·mL-1，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積積分值（Y）為縱坐標，4 種藥物的濃度（X，μg·mL-1）為橫坐標，繪制標準曲線，相關內容詳見表1。

2.3 檢出限和定量限

在本實驗色譜條件下，取混合標準標準工作液100 μg·mL-1稀釋后，進高效液相色譜儀分析檢測，測定信噪比，取信噪比約為3的溶液濃度作為定性檢測限，取信噪比約為10的溶液濃度作為定量檢測限。由表1可知，4種藥品的檢出限為0.5～1.0 g·kg-1，定量限為 1.0 ～ 4.0 g·kg-1。

表1 4種藥物的線性方程、檢出限和定量限

2.4 回收率和精密度

取1.3.2項下標準儲備液依次加入降糖食療包空白基質中，配制成濃度分別為 1 μg·mL-1、10 μg·mL-1和50 μg·mL-1的加標樣品，每個濃度平行實驗6次，按照1.3.3項樣品處理方法進行實驗，計算回收率和精密度，結果見表2。由表2可知，二甲雙胍、格列喹酮、格列吡嗪和格列齊特的平均回收率為84.3%～105.0%，相對標準偏差為2.2%～4.3%，方法的準確度、精密度良好。

表2 4種藥物的回收率和精密度

2.5 樣品測定

應用建立的本方法，對市場銷售的20批次降糖和食療降糖保健品進行快速篩查，僅有4批次保健品檢出疑似二甲雙胍藥品，但含量較低且低于檢出限，需進一步檢測，其他樣品中均未檢出非法添加降糖藥。

3 結論

糖尿病是一種復雜的代謝型疾病，與先天遺傳因素或個人的生活習慣、飲食結構、活動方式以及居住環境等有關。

本研究建立的高效液相色譜檢測方法可以同時測定食品中非法添加的4種降糖藥，具有檢測時間短、靈敏度高、準確度可靠的特點，適用于食品中非法添加4種降糖藥（二甲雙胍、格列吡嗪、格列齊特和格列喹酮）的檢測需要。