尿液分析儀結(jié)合顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)法在尿液潛血檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值

陳志航

（惠州市第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 惠州 516211）

尿液是血液經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)、腎小管和集合管重吸收后所產(chǎn)生的終末代謝產(chǎn)物，是人體體液的重要組成部分，能夠反映腎臟代謝系統(tǒng)是否處于正常生理狀態(tài)，因此尿液樣本檢查常被用于臨床診斷多種疾病，尤其是泌尿系統(tǒng)相關(guān)疾病，其在尿液中會(huì)有特異化的病理體征，通過(guò)尿檢獲得這些體征，可幫助臨床對(duì)具體疾病進(jìn)行明確診斷[1-2]。對(duì)尿液中紅細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行探查可明確泌尿系統(tǒng)存在結(jié)石或占位等疾病，目前臨床上對(duì)尿液中紅細(xì)胞檢驗(yàn)的方法有很多種，其中尿常規(guī)是最常見(jiàn)的檢驗(yàn)項(xiàng)目，此外利用顯微鏡或其他相關(guān)檢驗(yàn)儀器，均能得到良好的檢驗(yàn)結(jié)果[3-4]。顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)法是血液經(jīng)稀釋后，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，用顯微鏡進(jìn)行觀察，最后對(duì)一定容積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，并換算成每升血液內(nèi)的數(shù)目，可反映不同樣本中的紅細(xì)胞水平，對(duì)于肉眼無(wú)法鑒別的隱性出血有積極的檢驗(yàn)意義。本研究為了探討尿液分析儀結(jié)合顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)法在尿液潛血檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值，對(duì)在2020 年3 月至2021 年3 月在我院進(jìn)行尿液檢驗(yàn)的患者86 例進(jìn)行了試驗(yàn)，具體內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，于2020 年3 月至2021 年3 月在我院檢驗(yàn)科進(jìn)行尿檢的患者中選取86 例，其中有男性52 例，女性34 例；其年齡均在18 ～67 歲之間，平均年齡（46.32±5.12）歲。

1.2 方法

采集患者晨起空腹中段尿液樣本10mL，在2h 內(nèi)對(duì)所有樣本均進(jìn)行尿液分析儀檢測(cè)、顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)及尿沉渣離心鏡檢（金標(biāo)準(zhǔn)）。尿液分析儀采用深圳市美橋醫(yī)療科技公司生產(chǎn)的全自動(dòng)尿液分析儀，將樣本混勻后倒入試管中，并將試紙浸入，浸潤(rùn)后將試紙拿出放入尿液分析儀中進(jìn)行檢測(cè)，且測(cè)試時(shí)間應(yīng)在30 秒之內(nèi)。顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)采用奧林巴斯公司生產(chǎn)的光學(xué)顯微鏡，取10mL 尿液樣本倒入試管后進(jìn)行離心處理，去除沉淀物，將剩余液體放在玻片上進(jìn)行鏡下紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，用高倍鏡依次計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角和正中5 個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞，遵從數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右的原則進(jìn)行計(jì)數(shù)。尿沉渣離心鏡檢采用湖南長(zhǎng)沙愛(ài)威科技公司生產(chǎn)的光學(xué)顯微鏡，取10mL 尿液樣本倒入試管后進(jìn)行離心處理，去上層清液，將0.02mL 的沉淀物放在載玻片上進(jìn)行鏡下檢驗(yàn)。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

尿液化學(xué)分析儀顯示陽(yáng)性即為尿液化學(xué)分析儀檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性。顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果為每高倍視野有2 個(gè)以上紅細(xì)胞即為顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性。尿沉渣離心鏡檢結(jié)果超過(guò)0 ～3/HP 即為尿沉渣離心鏡檢結(jié)果呈陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS22.0 軟件對(duì)本次研究中的數(shù)據(jù)資料進(jìn)行分析處理，計(jì)數(shù)資料以χ2 檢驗(yàn)對(duì)比。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 單純檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果

尿沉渣離心鏡檢結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有60 例，呈陰性的患者有26 例。尿液化學(xué)分析儀檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有42 例，呈陰性的患者有44 例。顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有49 例，呈陰性的患者有37 例。尿液化學(xué)分析儀與顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有58 例，呈陰性的患者有28 例。詳見(jiàn)表1。

表1 單純檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)果（例）

2.2 診斷效能

將聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果分別與尿液化學(xué)分析儀、顯微鏡檢分析進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)，用聯(lián)合檢測(cè)進(jìn)行相關(guān)診斷的敏感度、特異度、準(zhǔn)確率均顯著高于上述兩種單獨(dú)檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見(jiàn)表2。

表2 各種檢測(cè)方法的診斷效能[%( 例)]

3 討論

尿液潛血試驗(yàn)是尿常規(guī)檢查項(xiàng)目之一，可以檢測(cè)尿液樣本中是否含有血紅蛋白，因紅細(xì)胞的主要成分為血紅蛋白，在尿液樣本中檢測(cè)到的血紅蛋白量即為紅細(xì)胞含量。一般尿潛血試驗(yàn)陽(yáng)性提示患者泌尿系統(tǒng)有黏膜損傷，病因可能與感染、結(jié)石、腫瘤等有關(guān)。此外，女性月經(jīng)期做此試驗(yàn)也會(huì)呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，這是由于經(jīng)血污染小便引起的，并無(wú)實(shí)際臨床意義[5-6]。臨床上對(duì)于尿液樣本檢測(cè)的方法有多種，其中結(jié)果最為準(zhǔn)確的是尿沉渣離心鏡檢法，該法主要是將尿液樣本高速離心后對(duì)沉渣進(jìn)行顯微鏡下觀察，低倍鏡下觀察全片，高倍鏡下計(jì)數(shù)，對(duì)尿液中可能存在的有形成分如紅細(xì)胞等進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)[7]。顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是利用光學(xué)顯微鏡對(duì)尿液樣本中的紅細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，隨著自動(dòng)化儀器的發(fā)展，尿液分析儀逐漸在臨床普遍應(yīng)用，其利用特定檢測(cè)試劑與尿液接觸反應(yīng)，可自動(dòng)得出檢測(cè)結(jié)果，可以檢測(cè)尿液中多種成分，現(xiàn)已成為尿液自動(dòng)化檢查的常用檢測(cè)方法。尿液分析儀的優(yōu)點(diǎn)諸多，比如對(duì)標(biāo)本的需求量較少，檢測(cè)的速度快，并且對(duì)多種臨床治療項(xiàng)目均能夠提供一定的結(jié)果，最快10 余秒即可完成1 條多聯(lián)試帶11 個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)，且有較大的容錯(cuò)空間，能夠重復(fù)檢測(cè)，適合于多樣本的疾病普查[8-9]。但這類(lèi)自動(dòng)化儀器一般都比較精密，對(duì)于儀器的后期維護(hù)保養(yǎng)要求較高，需要檢驗(yàn)人員妥善保管，保證儀器在最佳使用狀態(tài)。另外對(duì)于標(biāo)本質(zhì)量也有一定的要求，若受到外界因素的干擾，如藥物或其他外源性干擾，患者的尿液樣本成分則會(huì)摻雜其他干擾性物質(zhì)，就會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果，出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果[9]。總體上，雖然尿液分析儀使用效率高，但還是不能替代傳統(tǒng)顯微鏡對(duì)病理性尿液標(biāo)本的檢查，特別是管型、結(jié)晶、上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等其他有形物質(zhì)。在一些腎功能障礙性疾病患者中，其尿液組織中多為球蛋白，而尿液分析儀用到的尿蛋白試帶主要是檢測(cè)清蛋白，對(duì)球蛋白不敏感，因此用這種檢測(cè)方法得出的結(jié)果缺乏臨床診治價(jià)值，故不適用于腎病患者[10-11]。而顯微鏡下計(jì)數(shù)檢測(cè)受外源性因素的影響不大，其能夠直接在鏡下觀察，計(jì)數(shù)時(shí)可以直接忽略其他細(xì)胞因子，只對(duì)紅細(xì)胞或者目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，故結(jié)果比較準(zhǔn)確。但是其會(huì)受到細(xì)胞形態(tài)的影響，比如對(duì)于一些裂解的紅細(xì)胞可能會(huì)漏數(shù)或者多數(shù)，這會(huì)降低計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。應(yīng)用顯微鏡計(jì)數(shù)適合于小范圍樣本量的檢驗(yàn)以及對(duì)自動(dòng)化血液分析儀器的矯正。研究表明，在儀器正常、檢驗(yàn)試紙正常的情況下，樣本經(jīng)尿液自動(dòng)分析儀檢測(cè)后紅細(xì)胞、白細(xì)胞、蛋白等多種指標(biāo)結(jié)果為陰性可以不用顯微鏡計(jì)數(shù)檢測(cè)，若有一項(xiàng)為陽(yáng)性，則需要聯(lián)合顯微鏡進(jìn)行檢驗(yàn)，這樣就可以篩檢出健康樣本，同時(shí)不遺漏異常樣本[12-13]。其他值得注意的是，尿液檢驗(yàn)只適合濕化學(xué)檢驗(yàn)而不適合干化學(xué)檢驗(yàn)，這是因?yàn)槠涫茉S多因素如pH值、維生素C 等的影響易出現(xiàn)假陽(yáng)性。鄒慧青等[14]在研究中用自動(dòng)尿液分析儀檢測(cè)尿路感染患者尿液中的細(xì)菌和白細(xì)胞，結(jié)果顯示檢測(cè)的準(zhǔn)確率較高。在本研究中，聯(lián)合顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與自動(dòng)尿液分析儀對(duì)86 例進(jìn)行尿潛血檢驗(yàn)的患者進(jìn)行檢測(cè)，尿液化學(xué)分析儀檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有42 例，呈陰性的患者有44 例；顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有49 例，呈陰性的患者有37 例；尿液化學(xué)分析儀與顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有58 例，呈陰性的患者有28例；尿沉渣離心鏡檢結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有60 例，呈陰性的患者有26 例。將單純檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果顯示聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確率均更高。翁寶川[15]的研究中也分析了上述檢驗(yàn)方法的診斷效能，其得出的結(jié)果是尿液分析儀檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確率分別為90.00%、90.77%、90.59%，顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確率分別為75.00%、96.72%、90.59%。其研究認(rèn)為這兩種檢驗(yàn)方法各有優(yōu)劣，在臨床中需要根據(jù)實(shí)際情況選用合適的檢驗(yàn)方法，必要時(shí)可將兩者相聯(lián)合來(lái)提高檢驗(yàn)的準(zhǔn)確率。

綜上所述，在尿液潛血檢驗(yàn)中，尿液自動(dòng)分析儀與顯微鏡下紅細(xì)胞計(jì)數(shù)有各自的優(yōu)勢(shì)和不足，將二者相聯(lián)合進(jìn)行檢驗(yàn)可提高檢驗(yàn)的準(zhǔn)確率，更有助于臨床對(duì)疾病的明確診斷。