彩色多普勒超聲聯合CYFRA21-1、sTNFR-P55及HE4檢測在乳腺癌早期診斷中的應用

楊大才 陳鶴 彭良琴 朱廷玲★

乳腺癌為女性常見惡性腫瘤，有著較高的發病率，據相關數據顯示，乳腺癌是影響女性生存及生活質量的重要因素［1］。近年來乳腺癌發病率逐漸上升，且發病年齡逐漸趨于年輕化，早發現早治療是提高乳腺癌治療效果及降低死亡率的有效方法［2］。彩色多普勒超聲檢查是臨床中常用的檢查方式，在乳腺癌早期篩查中具有一定的使用價值。以往研究表明，相比單獨超聲檢查，聯合血清腫瘤標志物可提高乳腺癌檢出率［3］。隨著分子生物學發展，細胞角質蛋白19 片段（Cytokeratin 19 fragment，CYFRA21-1）、可溶性腫瘤壞死因子受體P55（Soluble tumor necrosis factor receptor p55，sTNFR-P55）、人附睪分泌蛋白4（human epididymis protein 4，HE4）等血清腫瘤標志物也被證實與乳腺癌發生、發展存在密切的聯系，研究指出，三者聯合超聲檢查在乳腺癌早期篩查中有一定使用價值［4］。本研究將通過分析CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 在乳腺癌中的表達情況，了解三者聯合彩色多普勒超聲對乳腺癌的診斷效能，以期為臨床早期篩查提供參考依據?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2021年7月重慶市永川區中醫院收治的116 例乳腺癌患者（乳腺癌組），所有患者均為女性，平均年齡為（46.69±6.68）歲，根據國際抗癌聯盟（International Anti Cancer Alliance，UICC）中TNM 分期［5］分為：Ⅰ期25 例，Ⅱa 期54 例，Ⅱb 期37 例。納入標準：①臨床資料完整；②符合《乳腺癌診療規范（2011 版）》中相關診斷標準［6］；③經術后病理檢查證實；④術前均進行彩色多普勒超聲檢查。排除標準：①入院前有行放化療或手術治療者；②存在代謝性疾病者；③合并其他臟器腫瘤者。另選取同期收治的乳腺良性疾病105 例作為良性組，包括乳腺囊腫39 例，乳腺增生31 例，纖維腺瘤35 例，所有患者均為女性，平均年齡為（46.88±6.21）歲，兩組入選者一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經院醫學倫理委員會批準通過，受試者或家屬已簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 檢測方法

入院后次日清晨抽取患者靜脈血液5 mL，使用離心機離心（轉速：3 000 r/min，時間：10 min，半徑：10 cm）后獲取上清液待檢，CYFRA21-1 使用電化學發光法進行檢測，儀器及試劑均為德國羅氏公司提供；sTNFR-P55、HE4 使用酶聯免疫法進行檢測，試劑為瑞典康乃格公司提供，儀器為IMX 酶標分析儀（美國雅培公司）。

1.2.2 彩色多普勒超聲檢查

乳腺癌組在術前進行超聲檢查，良性組則在入院當天進行超聲檢查。儀器為：Acuson Sequoia 512型彩色多普勒超聲診斷儀，探頭：頻率為2.5～5 MHz的腹部4C-1 凸陣探頭，對比脈沖序列。患者選擇仰臥位，并將雙手舉上，以便于將腋窩和胸部充分暴露。在檢查前需先設置乳腺檢查的相關條件，并根據患者病灶的具體情況對檢測深度、增益、聚焦部位進行調整，以此獲得最佳的圖像。乳腺超聲檢查范圍包括雙側乳腺，內側到達胸骨旁線，外側則到達腋中線。由2 名專業的超聲醫生對腫塊超聲圖像進行分析，采用“雙盲法”進行評估，在評價前醫生均未知患者病理檢查結果。彩色多普勒診斷乳腺癌陽性標準［7］：腫塊為無規則性團塊狀、分葉狀，呈浸潤性生長，邊界模糊，邊緣毛刺改變，無包膜，實質回聲非均勻分布，內部見血流信號，淋巴結血流紊亂，內部點狀強回聲、后方弱回聲，縱橫比≥1。

1.2.3 結果判斷

血清學指標陽性評估標準［8］：CYFRA21-1 陽性：＞3.3 μg/L，sTNFR-P55 陽性：＞85 ng/mL，HE4陽性：＞105 pg/L。聯合檢測中有一項為陽性，則判定為陽性。

1.3 觀察指標

對比乳腺癌組與良性組患者CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 表達水平以及彩色多普勒超聲征象差異，計算彩色多普勒超聲聯合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4 對乳腺癌的診斷價值。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0 統計軟件進行統計分析，計量資料采用（±s）表示，行t檢驗；計數資料采用n（%）表示，行χ2檢驗；均以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 表達水平比較

乳腺癌組CYFRA21-1、sTNFR-P55 及HE4 表達水平均明顯高于良性組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組CYFRA21-1、sTNFR-P55及HE4表達水平比較（±s）Table 1 Comparison of expression levels of CYFRA21-1，sTNFR-P55 and HE4 between the 2 groups（±s）

表1 兩組CYFRA21-1、sTNFR-P55及HE4表達水平比較（±s）Table 1 Comparison of expression levels of CYFRA21-1，sTNFR-P55 and HE4 between the 2 groups（±s）

組別良性組乳腺癌組t 值P 值n 105 116 CYFRA21-1（μg/L）1.36±0.26 5.69±1.34 32.554＜0.001 sTNFR-P55（ng/mL）59.69±5.66 108.54±6.94 56.982＜0.001 HE4（pg/L）80.26±5.25 149.65±6.78 84.428＜0.001

2.2 兩組彩色多普勒超聲征象比較

乳腺癌組患者腫瘤形態不規則、邊界不清晰、毛刺征、后方回聲衰減、存在微小鈣化、血流Ⅱ～Ⅲ級、縱橫比為≥1 所占比例明顯高于良性組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組彩色多普勒超聲征象比較［n（%）］Table 2 Comparison of color Doppler ultrasound signs between the 2 groups［n（%）］

2.3 彩色多普勒超聲聯合CYFRA21-1、sTNFRP55、HE4 對乳腺癌的診斷價值

依據ROC 曲線可知，彩色多普勒超聲聯合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4 檢測對乳腺癌診斷敏感度和特異度分別為0.817、0.857，AUC=0.858（95% CI：0.705～0.974），明顯高于三者單獨診斷（P＜0.05）。見表3、圖1。

表3 彩色多普勒超聲聯合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4對乳腺癌的診斷價值Table 3 diagnostic value of color Doppler ultrasonography combined with CYFRA21-1，sTNFR-P55 and HE4 in breast cancer

圖1 診斷價值Figure 1 diagnostic value

2.4 典型病例

本研究中1 例患者經超聲檢查可見：左乳2 點位距乳頭1.6 cm 掃及1.5 cm×0.7 cm 低回聲團塊，邊界欠清，形態不規則，邊緣不規則，內部見點狀強回聲。見圖2A。團塊內未見明顯血流信號。見圖2B。

圖2 乳腺癌超聲圖Figure 2 ultrasonogram of breast cancer

3 討論

早期診斷是改善乳腺癌預后的關鍵，既往數據指出，乳腺癌患者早期精確診斷可提升5年生存率［9］。早期正確診斷是治療的前提，以往臨床中乳腺癌早期篩查手段主要為乳腺鉬靶，其可為乳腺癌早期診斷提供重要參考信息，但對致密型乳腺癌顯示效果不佳，且對于微小病灶檢出率低，同時由于存在一定電離輻射，使其臨床使用價值受限。彩色多普勒超聲檢查則可彌補上述缺點，但由于檢查結果主要依賴醫生主觀判斷，也存在一定誤診、漏診的情況。為更好地提高乳腺早期診斷效能，本研究采用多種腫瘤標志物與彩色多普勒超聲進行聯合診斷。

CYFRA21-1 是構成細胞骨架的一種絲狀物質，在細胞出現癌變、壞死、溶解后CYFRA21-1 在血液中的表達呈明顯升高趨勢。研究顯示，在惡性腫瘤患者中CYFRA21-1 陽性率與患者的臨床分期、預后復發情況有關，臨床分期越高、出現轉移復發的患者其CYFRA21-1 水平明顯增加［10］。但CYFRA21-1 并非器官特異性的腫瘤標志物，其除在乳腺癌患者中表達升高，在肺癌、肝癌等患者中其表達也可明顯升高。HE4 是乳清酸性4-二硫化中心蛋白中的一員，具有類似胰蛋白酶抑制劑的特性［11］。以往研究顯示，HE4 可在附睪、生殖道、呼吸道上皮中表達，在乳腺癌、卵巢癌等患者中陽性表達明顯升高，對女性盆腔惡性腫瘤診斷有較高的診斷價值，同時可為患者預后評估提供參考［12］。本研究中，與良性組患者相比，乳腺癌患者中CYFRA21-1、HE4 表達均明顯升高，與以往研究結果相符［13］，提示CYFRA21-1、HE4 與乳腺癌發生之間存在一定聯系。sTNFR-P55 是由膜結合腫瘤壞死因子受體裂解形成的腫瘤壞死因子-α 的主要受體，通常在蛋白激酶的作用下裂解形成，臨床中認為sTNFR-P55 是腫瘤壞死因子-α 的主要受體［14］。以往研究顯示，在惡性腫瘤患者中sTNFR-P55 表達明顯升高［15］。本研究也發現，與良性組相比，乳腺癌患者sTNFR-P55 表達水平明顯上升，分析可能與腫瘤細胞導致機體細胞因子調節紊亂有關，乳腺癌患者機體的防御能力下降，細胞免疫功能受抑，刺激機體產生大量sTNFR-P55；也可能是因機體腫瘤過度生長，刺激單核—巨噬細胞合成和釋放過量的sTNFR-P55，導致其在患者血液中為高表達［16］。

本研究發現，上述指標在單獨檢測時均存在一定局限性，雖然均可為乳腺診斷提供一定的參考信息，但診斷效能一般，敏感度及靈敏度均不理想。進一步分析顯示，彩色多普勒超聲聯合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4檢測對乳腺癌診斷敏感度和特異度分別為81.70%、85.70%，提示相比單獨診斷，超聲聯合血清因子檢測診斷乳腺癌效果更佳，診斷效能更佳。

綜上所述，彩色多普勒超聲聯合CYFRA21-1、sTNFR-P55、HE4 檢可有效彌補單項檢測的不足，對乳腺癌早期診斷有重要的臨床使用價值，可為臨床早期診斷提供更全面參考信息。