子宮內膜異位癥患者血清LXA4、Ang-2及ENS水平與痛經、R-AFS分期的關系

賈璇 劉學良 吳國萍 柴連梅 車艷辭

子宮內膜異位癥（Endometriosis，EMS）是臨床中常見的婦科疾病，是因有活性的內膜細胞在子宮內膜外的位置出現種植而導致的［1］。EMS 作為良性病變，以藥物及手術治療為主，在早期對患者進行診斷及治療是預防EMS 發生、發展的關鍵。免疫脂氧素A4（Immune lipoxin A4，LXA4）屬于內在的“剎車信號”（炎性反應），對多種炎性介質及細胞有負調節作用，對EMS 發生有一定的促進作用［2］。有研究發現，新生血管在EMS 病情進展中發揮著重要的作用，血管生成素-2（Angiopoietin-2，Ang-2）、內皮抑素（Endostatin，ENS）在血管生成中有著重要的作用［3-4］。本文將通過分析LXA4、Ang-2及ENS 在EMS 患者中的表達情況，了解三者與患者痛經、美國生殖學會子宮內膜異位癥分期法（American reproductive society endometriosis staging，R-AFS）關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年12月至2021年12月青島大學附屬醫院收治的138 例EMS 患者（EMS 組），R-AFS分期［5］：Ⅰ～Ⅱ期75 例，Ⅲ～Ⅳ期63 例。納入標準：①符合《婦產科學》中相關診斷標準［6］；②經腹腔鏡病理檢查等確診；③臨床資料完整。排除標準：①合并其他子宮疾病者；②有接受過激素或避孕藥等藥物治療者；③合并活性炎癥或其他器官功能障礙者；④妊娠期或哺乳期婦女。另選取同期收治的125 例因卵巢良性腫瘤進行腹腔鏡手治療者作為對照組。兩組一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。本研究經院醫學倫理委員會批準通過，受試者已簽署知情同意書。

表1 一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general information（±s）

表1 一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general information（±s）

組別對照組EMS 組t 值P 值n 125 138年齡（歲）34.87±3.14 34.59±3.69 0.659 0.510病程（年）4.67±0.89 4.59±0.66 0.832 0.405月經周期（d）30.25±1.47 30.15±1.21 0.604 0.546

1.2 方法

1.2.1 LXA4、Ang-2 及ENS 檢測

患者均在入院后次日清晨抽取空腹靜脈血液5 mL，使用3 000 r/min 離心機離心10 min，離心半徑10 cm，獲取上清液待檢。使用酶聯免疫法檢測LXA4、Ang-2 及ENS，儀器為Elx800 全自動酶標儀，試劑及試劑均購自深圳晶美生物科技有限公司。

1.2.2 痛經程度評價

以視覺模擬疼痛評分（Visual Analogue Scale，VAS）進行評價［7］。無需服藥-0 分；需要服用藥物，但對患者的日常生活并無影響-1～3 分（輕度）；在服用藥物之后疼痛緩解，對日常生活有影響-4～6 分（中度）；服用藥物后疼痛無法緩解-7～10 分（重度）。由患者自訴情況，根據痛經程度不同將EMS 組分為輕度組和中-重度組。

1.3 統計學方法

采用SPSS 20.0 統計軟件建立數據庫，計量資料采用（±s）表示，行t檢驗；計數資料采用n（%）表示，行χ2檢驗，采用Pearson 相關性分析LXA4、Ang-2 及ENS 與R-AFS 分期、痛經程度之間的關系，以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同人群中LXA4、Ang-2 及ENS 水平比較

EMS 組Ang-2 及ENS 水平均明顯高于對照組，LXA4 水平則明顯低于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同人群中LXA4、Ang-2 及ENS 水平比較（±s）Table 2 Comparison of LXA4，Ang-2 and ENS levels in different populations（±s）

表2 不同人群中LXA4、Ang-2 及ENS 水平比較（±s）Table 2 Comparison of LXA4，Ang-2 and ENS levels in different populations（±s）

組別對照組EMS 組t 值P 值n 125 138 LXA4（ng/L）571.25±25.46 307.08±20.54 92.982＜0.001 Ang-2（ng/mL）30.26±8.54 67.82±10.55 31.530＜0.001 ENS（ng/mL）58.54±10.35 107.32±15.54 29.639＜0.001

2.2 R-AFS 分期患者中LXA4、Ang-2 及ENS 水平比較

Ⅲ～Ⅳ患者Ang-2 及ENS 水平均明顯高于Ⅲ～Ⅳ期，LXA4 水平則明顯低于Ⅲ～Ⅳ期，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 R-AFS分期患者中LXA4、Ang-2及ENS水平比較（±s）Table 3 Comparison of LXA4，Ang-2 and ENS levels in patients with R-AFS staging（±s）

表3 R-AFS分期患者中LXA4、Ang-2及ENS水平比較（±s）Table 3 Comparison of LXA4，Ang-2 and ENS levels in patients with R-AFS staging（±s）

組別Ⅰ～Ⅱ期Ⅲ～Ⅳ期t 值P 值n 75 63 LXA4（ng/L）381.57±20.32 218.41±20.16 47.153＜0.001 Ang-2（ng/mL）61.25±12.64 75.64±12.36 6.729＜0.001 ENS（ng/mL）81.54±15.06 138.01±15.64 21.558＜0.001

2.3 不同痛經程度患者中LXA4、Ang-2 及ENS水平比較

138 例患者中根據痛經程度不同分為輕度組、中-重度組分別為79 例、59 例，中-重度組Ang-2 及ENS 水平均明顯高于輕度，LXA4 水平則明顯低于輕度，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 不同痛經程度患者中LXA4、Ang-2 及ENS 水平比較（±s）Table 4 Comparison of LXA4，Ang-2 and ENS levels in patients with different degrees of dysmenorrhea（±s）

表4 不同痛經程度患者中LXA4、Ang-2 及ENS 水平比較（±s）Table 4 Comparison of LXA4，Ang-2 and ENS levels in patients with different degrees of dysmenorrhea（±s）

組別輕度中-重度t 值P 值n 79 59 LXA4（ng/L）395.58±20.69 188.59±20.25 58.670＜0.001 Ang-2（ng/mL）56.29±13.58 83.26±13.25 11.662＜0.001 ENS（ng/mL）88.49±15.30 132.54±15.58 16.602＜0.001

2.4 LXA4、Ang-2 及ENS 與R-AFS 分期、痛經程度相關性分析

LXA4 與R-AFS 分期、痛經程度均為負相關性（rR-AFS分期=-0.621，r痛經程度=-0.551，P均＜0.05）；Ang-2與R-AFS 分期、痛經程度均為正相關性（rR-AFS分期=0.596，r痛經程度=0.603，P均＜0.05）；ENS 與R-AFS 分期、痛經程度均為正相關性（rR-AFS分期=0.575，r痛經程度=0.715，P均＜0.05）。

3 討論

LXA4 屬于內源性炎癥消退介質，可通過跨膜途徑經酶氧化花生四烯酸催化合成，具有抗炎、促炎真消退、抗纖維化以及抑制組織增生的作用。研究發現，LXA4 可減少由于炎癥引發的痛覺及水腫作用［8］。本研究結果顯示，EMS 患者中LXA4 表達明顯降低，這可能與EMS 患者體內過度的炎癥反應導致機體LXA4 合成障礙，致使EMS 患者機體炎癥反應失調有關［9］。且隨著R-AFS 分期越高、痛經程度越嚴重，患者LXA4 水平越低，LXA4 與R-AFS 分期、痛經程度為負相關。提示隨著患者病情進展，機體炎癥反應更嚴重，機體的LXA4 水平明顯降低，導致EMS 疾病的發生發展。故LXA4 可能成為早期診斷EMS 的有用指標，監測其水平變化對患者預后情況評估可能有一定參考價值［10］。

在子宮內膜成功種植后，新生的血管對異位內膜的進一步發展有著較大的作用，以往研究證實，新生血管可促進EMS 發?。?1］。Ang-2 是血管生成中的一種重要因子，主要由內皮細胞分泌。在血管內皮細胞中，Ang-2 可與其特異性酪氨酸激酶受體結合，從而影響血管的穩定性，Ang-2 與血管生成因子之間也有密切的聯系［12］。本研究發現，EMS 組與對照組比較Ang-2 水平明顯升高，且在III-IV 期與痛經程度為中-重度患者中Ang-2 水平也為明顯升高趨勢，Ang-2 與R-AFS 分期、痛經程度為正相關，提示異位內膜的血管增生能力較強，而Ang-2 可促使異位內膜存活，并參與子宮內膜異位癥的發病過程。以往研究也顯示，EMS 發生時，血管內皮細胞增生活躍，Ang-2 是強效的血管生成因子，在某些病理環境下刺激毛細血管增生，提高血管通透性，為異位生長的腺上皮細胞提供賴以生存的物質基礎，因此病灶組織在大量新生血管的支持下不斷發展［13］。

ENS 不僅是一種可抑制內皮細胞增殖和轉移的因子，同時對新生血管生成也有一定的抑制作用。有研究通過動物實驗發現，使用重組人內皮抑素對動物模型進行治療后，EMS 模型鼠病灶重量及體積均明顯降低，且其病灶內血管密度也呈逐漸降低的趨勢；通過進行病理組織切片檢查顯示，在使用內皮抑素后，異位內膜病灶內的血管生成被抑制，在光鏡下觀察可見到治療后的病灶腺體明顯萎縮，且間質出現不同程度的壞死，結構被破壞［14］。此研究結果證實內皮抑素可有效抑制EMS 患者病灶內部的血管生成，從而阻止患者病情進展。本研究發現，EMS 患者中ENS 水平明顯升高，且隨著R-AFS 分期增高、痛經程度增加其表達也逐漸升高，說明EMS 患者存在血管形成因子以及抑制因子異常的現象，兩者作者用失衡進而引發患者異位內膜進一步生長、種植［15］。

綜上所述，LXA4、Ang-2 及ENS 可能參與EMS的病理、生理過程，且三者與患者痛經、R-AFS 分期之間密切相關，可為EMS 臨床診斷及病情評估提供一定的參考價值。