王美菊,馬 萍
(天水市動物疫病預防控制中心,甘肅 天水 741000)
禽白血病(avian leucosis,AL) 是由禽白血病病毒(Avian Leucosis Virus,ALV)引起的家禽傳染性腫瘤性疾病的統稱,在國外已有一百多年的流行歷史,自20 多年前傳入我國,目前各地地方品系的雞和進口的雞幾乎都受到禽白血病病毒不同程度的感染。該病毒可通過垂直和水平兩種途徑傳播,傳染性強。雞感染該病毒后,可造成多組織、多器官發生腫瘤,甚至引起死亡?;疾‰u還表現為形體消瘦、發育遲緩,蛋雞發病后會出現生產性能下降,如產蛋率下降,蛋品質變差,另外產蛋初期和高峰期的蛋雞具有較高的陽性率[1]。肉雞感染該病后,由于發生白血病腫瘤,導致死亡率明顯升高[2]。禽白血病屬于免疫抑制性疾病,雞感染后會出現免疫力下降,對其他疾病的抵抗力降低;另外,患病雞對疫苗的應答能力減弱,從而引發免疫失敗[3]。近年來,由禽白血病造成的經濟損失逐年增加,成為危害養雞業的主要疾病之一。為了解該病毒在甘肅省天水市的流行情況,本研究對近2 年來天水市養殖密集區的雞場進行流行病學調查,為該病的凈化和有效防控提供參考。
1.1.1 檢測樣品
2020 年10 月至2021 年5 月選取天水市秦州區、麥積區、武山縣、甘谷縣和秦安縣5 個主要養雞縣區,從每個縣區中隨機抽取存欄5 000 羽以上的規?;u場4~6 家,合計24 家,每家雞場隨機采集雞泄殖腔拭子20 份,共計480 份。
1.1.2 主要儀器試劑
熒光PCR 儀為ABI 公司生產的Thermofisher 7500 Real-Time 定量PCR 儀,A Ⅱ級生物安全柜選用上海力康醫療設備有限公司生產的HFsafe-1200LC;禽白血病病毒實時熒光PCR 檢測試劑盒、柱式DNA 核酸提取試劑盒均購自哈爾濱世紀元亨生物藥業有限公司。
利用吸附柱法提取禽白血病病毒DNA,以提取的DNA 為模板配制PCR 反應體系。反應體系為20 μL:無菌無核酸酶水5.9 μL,PCR 反應液10 μL,熒光探針2.1 μL,模板DNA 2 μL。反應條件為:95 ℃ 2 min;循環95 ℃ 5 s,60 ℃ 35 s,共40 次,每次循環的第二步(60 ℃ 35 s)收集熒光信號。
天水市規?;u場雞禽白血病熒光PCR 檢測結果見表1。在本次抽檢的24 個場中,陽性雞場為18 家,雞場陽性率為73.33%;在采集的480 份樣品中,陽性樣品共203 份,樣品陽性率為42.29%。其中秦州區、武山縣和甘谷縣的陽性雞場比例最高,達80%,樣品陽性率也較高,分別為57.5%、47.5%和42.5%;秦安縣陽性雞場比例為66.67%,陽性率也較高,但樣品陽性率最低,為25.83%。結果表明,天水市規模化雞場禽白血病的流行相當普遍,抽檢的5 個縣區都有禽白血病流行,且5 個縣區的雞場陽性率和樣品陽性率都存在顯著差異。
不同種類雞禽白血病感染見表2。由表2可知,在禽白血病的感染率上,24 家規模化雞場不同用途雞存在差異,蛋雞的感染率為38.33%,肉雞的感染率為54.17%,蛋雞的感染率明顯低于肉雞的。
本次調查發現,天水市規模化雞場普遍存在禽白血病流行現象,73.33%的規?;u場存在禽白血病病毒污染,且天水市主要養雞區的5 個縣區的規?;u場都具有較高的禽白血病的感染率,且集中在60%~80%之間。天水市肉雞飼養規模小,約占全市養雞規模的四分之一,但從調查數據可以看出,肉雞的禽白血病感染率明顯高于蛋雞的,與文獻報道的其他地區的感染情況相似[4-6]。
目前,針對禽白血病的預防和治療尚無商品化的疫苗和有效藥物,各國主要通過檢測禽白血病病毒以及淘汰帶毒種雞控制該病[7]。天水市的養雞方式主要以中小規模雞場為主,存在資金短缺、經營管理水平不高以及防疫體系不健全的缺點[8]。結合禽白血病的流行特點,建議規模化雞場從以下幾個方面著手,防止禽白血病的侵入、傳播和流行,實現該病的防控:一是加強引種,阻斷病毒的傳染源。研究表明,種雞感染ALV 后能顯著影響商品代蛋雞的生產性能[9]。二是加強生物安全,健全防疫制度,提高雞場、雞舍及周邊地區的衛生條件,完善消毒體系,合理改造雞舍的設施設備,以減少雞群與禽白血病病毒的接觸,避免病毒污染飲水、飼料和用具等,從而切斷傳播途徑。三是合理飼喂,減少雞的應激反應,增強它們的體質,提高雞自身免疫力,減少易感動物。研究表明,采用免疫增強劑——黃芪多糖能促進雞的免疫器官發育,增強免疫功能[10-11]。

天水市規?;u場禽白血病感染范圍廣,幾乎遍布大多數規?;u場,且感染率高。大部分規?;u場對禽白血病的特點和危害性認識不足,飼養期的前期表現出的亞臨床癥狀沒有引起規?;u場獸醫的重視,飼養期的中后期一旦發病,所產生的經濟損失不可挽回,因此畜牧獸醫主管部門應加強對禽白血病流行特點和防控知識的宣傳,同時對禽白血病的凈化迫在眉睫。