基于離子淌度質譜研究低濃度甘油對蛋白質結構的影響

何源峰，朱龍平，苗 慧，陳 寶

(中山大學藥學院，廣東 廣州 510006)

甘油是一種簡單的多元醇化合物，與水混合后，具有許多生物和工業應用。甘油能在極端條件下穩定蛋白質，如熱應激、冷沖擊、高壓等[1-4]。大多數蛋白質在純化后通常保存在含有甘油的緩沖體系中，以保持其生物活性的穩定性[5]。目前，關于甘油對蛋白質的保護作用機制仍存在爭議，大部分研究主要著眼于高濃度甘油對蛋白質結構的影響[1,5-6]，而對低濃度甘油的研究則較少。因此，深入了解低濃度甘油對蛋白質結構的影響，有利于蛋白質的相關研究和應用。

電噴霧電離質譜(ESI-MS)是研究蛋白質結構和功能的常用技術，具有可靠、省時的特點[7-8]。當ESI-MS與離子淌度(ion mobility spectrometry, IMS)相結合時，可以更詳細地描述蛋白質的構象變化[9-14]。當不同尺寸、電荷和形狀的離子穿過離子淌度腔室時，會根據碰撞截面積(CCS)的大小在中性介質中遷移并分離。通過測量蛋白質的分子質量、電荷態分布、漂移時間和CCS值，可以得到蛋白質的結構變化信息。

本研究以牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)為模型蛋白，采用離子淌度質譜(IM-MS)技術考察低濃度甘油對蛋白質結構的影響，并探討其可能的機制。采用動態光散射法驗證液體狀態下低濃度甘油對蛋白質粒徑的影響，同時利用碰撞誘導去折疊指紋圖譜研究其對蛋白質穩定性的影響，以期進一步了解甘油穩定蛋白質的機制，為蛋白質的相關研究和開發提供參考。

1 實驗部分

1.1 儀器與裝置

Synapt G2-Si HDMS電噴霧-四極桿-行波離子淌度-飛行時間質譜儀：美國Waters公司產品；……