磁共振影像學參數與乳腺癌患者腫瘤微血管密度及生物因子相關性以及對治療效果評估

魏 剛， 許保剛， 賀 朝， 黃瑞瑜， 劉 輝， 郭長義， 李 斌， 張 瑜， 張 婉

陜西中醫藥大學第二附屬醫院 影像中心，陜西 咸陽 712000

乳腺癌是近年來臨床上女性群體中容易被發現且發病率較高的腫瘤之一[1-4]。及時有效并準確地評估患者的病情，采取相應措施干預，可顯著降低乳腺癌患者的病死率[5]。有研究報道，采用磁共振成像(magnetic resonance imaging，MRI)實施乳腺檢測已成為當前臨床上最主要的乳腺癌高危群體篩選的手段之一，具有較高的臨床應用價值，也是指導臨床治療和預后輔助評估的重要方案[6]。MRI影像學檢查可通過清晰的圖像對乳腺病變形態學特點進行描述和分析，可有效實現通過增強后信號增高幅度反映病變組織內血管密度[7]。微血管密度(microvascular decompression，MVD)是定量的對腫瘤的新生血管能力方面的指標給予分析，可用于評估腫瘤相關的血管生成情況[8]。乳腺癌腫瘤MVD及多種生物學因子均與MRI表現密切相關，但MRI影像學參數與乳腺癌患者腫瘤MVD及生物因子的相關性及治療療效的評估仍有待深入挖掘分析。本研究以乳腺癌患者為研究對象，分析MRI影像學參數與乳腺癌患者腫瘤MVD及生物因子的相關性并評估治療效果。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2019年1月至2021年6月陜西中醫藥大學第二附屬醫院收治的104例乳腺癌患者為觀察組，均為女性；年齡29～78歲，平均年齡(49.82±12.91)歲；平均體質量指數(23.28±2.91)kg/m2；其中，導管原位癌10例，浸潤性導管癌84例，浸潤性小葉癌8例，導管原位癌伴浸潤2例。納入標準：(1)經病理學確診為乳腺癌[9]；(2)臨床均接受MRI掃描檢查；(3)入組前未行手術、靶向治療或放化療；(4)均接受《中國臨床腫瘤學會乳腺癌診療指南》[10]推薦的方案治療；(5)隨訪時間均>12個月，每3個月到院隨訪1次。排除標準：(1)MRI掃描檢查結果質量不佳；(2)臨床資料缺失；(3)治療后失訪。另選取同期于我院經病理學診斷確診為乳腺良性病變的80例患者為常規組，均為女性；年齡28～71歲，平均年齡(50.21±12.11)歲；平均體質量指數(23.37±2.87)kg/m2；其中，乳腺囊性增生38例，漿細胞性乳腺炎12例，乳腺分葉狀腫瘤13例，乳腺導管內的乳頭狀瘤10例，乳腺纖維腺瘤7例。兩組研究對象的一般資料比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審議并批準。所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 MRI檢查 所有研究對象均采用Avanto 1.5T(德國西門子)MRI掃描機進行掃描檢查。患者取俯臥位，采用乳腺專用的線圈實施掃描，FSE T2WI、T1WI加脂肪抑制序列實施橫斷位的掃描；采用自旋平面的回波成像序列實施橫斷位掃描，橫斷位的FLASH T1WI序列掃描層厚1.0 mm；注射對比劑前則實施蒙片掃描，后經肘正中靜脈以團注方式采用高壓注射器注入對比劑，然后行8期動態掃描，單期的掃描時長為55 s，層數為128層；采用的對比劑為釓噴酸葡胺注射液，注射速率2.0～2.5 ml/s，劑量0.2 mmol/kg，用量15～20 ml。然后，將所有圖像傳輸至配套工作站，并由7年以上醫師完成圖像處理及參數測量。

在乳腺MRI增強的第1期注入1 min內挑選適當的感興趣區(region of interest，ROI)，將病灶內出血、囊變、壞死區避開，選定病灶邊緣區域和中心作為ROI，測量ROI的信號強度，并計算早期增強率。經處理后生成自動偽彩灌注圖，勾畫并計算增強掃描達峰時間及映增強掃描強化曲線下面積。在病灶實性部分盡量避開壞死、囊變、出血區的灌注圖腫塊內選擇3個ROI，其中，ROI選取保持大小一致，記錄灌注圖參數并取3個ROI區域的均值作為各參數指標的評估結果。

1.2.2 免疫組織學檢測 采用SP法的免疫組織化學法對患者病理組織進行檢查，參照說明書進行操作，切取乳腺癌組織蠟塊后行脫蠟、水化，高壓將抗原修復后在過氧化氫室溫條件下孵育，然后分別滴加一抗和二抗，采用DAB顯色并利用蘇木素實施復染封片。參照Weidner法挑選微血管分布最密的位置，計算不重復的視野內具體的CD34染成棕色的血管條數，取其中的均值做為MVD。并采用SP法的免疫組織化學法檢測觀察組患者的人類表皮生長因子受體2(human epidermal receptor 2，HER-2)、雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)及Ki-67水平。HER-2定位于細胞膜，其余均定位于細胞核。按照陽性細胞占比與顏色深淺程度評分乘積作為結果判讀標準，0分判定為陰性，1～2分判定為弱陽性，3分及以上判定為強陽性。若患者出現病灶區長短徑之和增長>20%則判定為病情進展，否則判定為疾病控制即預后有效。

2 結果

2.1 兩組患者MRI影像學參數檢測結果 觀察組患者對比劑的速率常數(Kep)及容量轉移常數(Ktrans)分別為(2.67±0.51)、(1.31±0.33)，常規組患者的Kep及Ktrans分別為(1.82±0.32)、(0.83±0.12)。觀察組患者的Kep及Ktrans均高于常規組，差異均有統計學意義(P<0.05)。觀察組和常規組的血管外細胞外間隙容積比(Ve)分別為(0.53±0.17)、(0.51±0.19)，組間比較，差異無統計學意義(P>0.05)。觀察組典型病例見圖1。

2.2 觀察組患者MVD及生物因子檢測結果 觀察組患者的MVD為(54.39±5.12)，HER-2、ER、PR及Ki-67的強陽性率分別為46.15%、44.23%、47.12%及41.35%。觀察組患者的免疫組化染色結果見圖2。

2.3 不同生物因子檢測結果患者的MRI影像學參數檢測結果 HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性及預后病情進展患者的Kep及Ktrans均高于各指標弱陽性及陰性，且差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 不同生物因子檢測結果患者的MRI影像學參數檢測結果

2.4 MRI影像學參數與乳腺癌患者腫瘤MVD的相關性分析 乳腺癌患者腫瘤MVD與Kep及Ktrans均呈顯著正相關，其中，腫瘤MVD與Kep相關性模型為Y=9.314 3x+29.059(R2=0.975 6，r=0.987 7)，MVD與Ktrans相關性模型為Y=15.486x+35.119(R2=0.979 9，r=0.989 9)。

2.5 MRI影像學參數與不同生物因子檢測結果的相關性分析 乳腺癌患者的HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性以及預后病情進展與Kep均呈顯著正相關，相關系數分別為0.643、0.593、0.609、0.615、0.674(P<0.05)。乳腺癌患者的HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性以及預后病情進展與Ktrans均呈顯著正相關，相關系數分別為0.598、0.611、0.608、0.643、0.625(P<0.05)。

3 討論

目前，臨床上主要利用MVD的數量定量分析乳腺癌新生血管的情況，并用于分析血管生成程度[10]。腫瘤的血管生成和乳腺癌MVD關系密切，低MVD則被認為腫瘤的血供不好，腫瘤組織可能發生了緩慢生長或壞死的情況[11]。而高MVD值則被認為腫瘤的血供較良好，通常情況下提示腫瘤生長活躍，癌細胞易進入微循環，并可能導致腫瘤遠處轉移[12]。目前，臨床上通過免疫組織化學法檢測腫瘤組織樣本內的MVD水平，其結果只能反映腫瘤組織極個別位置血管的生成的具體情況，并無法有效實現對腫瘤整體血管生成狀態的評估[13]。乳腺MRI掃描檢查屬于經典的無創檢查方法，可有效實現活體狀態下反映腫瘤血管的生成狀況，對乳腺癌的臨床評估和分析具有十分重要的意義[14]。

有研究報道，乳腺癌患者的預后質量和生物學相關特點關系密切，通過檢測受試者病灶組織中ER、Ki-67、PR及HER-2等生物學指標有助于選擇合理的治療方案，并可用于指導患者的臨床預后判斷及內分泌治療[15]。MRI掃描是經典的無創灌注成像，可有效提供血管滲透性等指標，用于評估患者病灶區血流動力學情況，反映組織血管化程度及微血管灌注情況，為腫瘤的臨床分級診斷、腫瘤定性及臨床治療方案的確定提供數據支持和依據[16]。PR是細胞中重要的類固醇激素受體蛋白，也是常用的乳腺癌預后評估指標，PR及ER陽性乳腺癌患者病變程度惡性較低，存活期長，激素治療效果好[17]。本研究結果顯示，隨著患者組織中PR水平升高，Kep和Ktrans水平也隨之升高，筆者分析認為，隨著乳腺癌患者組織中PR水平的降低，多提示腫瘤分化差、生長迅速、細胞合成技術受體能力降低。PR陰性或弱陽性患者腫瘤生長速度更為迅速，且新生血管更為豐富，內部細胞不完整，因此導致局部微血管血流狀態及滲透性增強。此外，乳腺癌患者惡性程度顯著升高，會導致血流速度加快，增強細胞生長旺盛程度，加快對比劑通過速度，與Kep水平升高密切相關。HER-2在體內過表達會導致血管內皮生長因子合成和釋放，并可起到促進腫瘤新生血管生成的作用。HER-2高表達多提示腫瘤細胞血液灌注豐富，對內分泌治療反應差，惡性程度高，隨HER-2水平升高，多伴隨出現血流灌注豐富程度提高，Kep和Ktrans水平也隨之升高[18-19]。本研究結果顯示，觀察組Kep及Ktrans均高于常規組，觀察組患者MVD為(54.39±5.12)，HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性率均>40%。筆者進一步分析發現，HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性及預后病情進展患者的Kep及Ktrans均高于弱陽性及陰性。采用相關性分析結果顯示，乳腺癌患者腫瘤MVD與Kep及Ktrans均呈顯著正相關關系，乳腺癌患者HER-2、ER、PR及Ki-67強陽性及預后病情進展與Kep及Ktrans均呈顯著正相關關系。筆者分析認為，臨床中可通過MRI掃描檢查評估受試者Kep及Ktrans指標，并可有效間接反映受試者的血流灌注情況，用于評估乳腺癌的惡性程度。

綜上所述，MRI影像學參數與乳腺癌患者腫瘤MVD及生物因子均呈現顯著相關關系，并可作為評估臨床治療療效的潛在方法。但本研究入組臨床樣本數較少，且并未對患者進行長期隨訪和追蹤，有待后續深入研究和分析。