2017—2021 年日照市規模雞場雞白痢凈化監測情況分析

許崇友 韓勇

(1.山東省日照市東港區動物疫病預防控制中心，山東日照 276800；2.山東省日照市動物疫病預防控制中心，山東日照 276800）

雞白痢是由雞白痢沙門氏菌引起的雞細菌性疫病，在雞群中廣泛存在[1-2]。雞白痢沙門氏菌感染可造成雛雞嚴重白痢，有的呈急性敗血癥，發病率和死亡率較高。成年雞感染后多呈慢性或隱性感染，可長期帶菌[3]。雞白痢既可水平傳播，也可垂直傳播，不僅給家禽養殖業帶來嚴重危害和經濟損失[4-5]，而且威脅到畜產品質量安全和公共衛生安全[6]。目前，國內規模雞場雞白痢感染水平較高，2017—2019 年李照偉等選取31個規模化雞場抽檢1340 份雞血清樣品，采用雞白痢抗體平板凝集試驗，結合雞場生物安全措施及凈化情況，開展了雞白痢血清學調查，結果顯示，雞白痢平均場群陽性率為83.87%，個體陽性率為13.43%[7]，感染情況嚴重。

日照市家禽種業豐富，既有日照麻雞優良地方品種，又有白羽肉雞等引進品種，雞白痢凈化難度較大。為了解日照市日照麻雞和白羽肉雞的雞白痢流行狀況，為凈化提供技術支撐。本研究對全市種雞場和規模場開展了基礎調查，建立了全市抽樣框。對雞場分類建立檔案，每個場建立凈化方案，推進雞白痢凈化工作。自2017—2021 年連續開展雞白痢流行病學調查，采用流行病學采樣方式，對全市的原種雞場、祖代場、父母代和規模場進行抽樣檢測，掌握了雞白痢的流行狀況。

1 材料與方法

1.1 抽樣框的建立

依托膠東半島和山東省高致病禽流感無疫區建設，對全市禽場進行摸底調查，對種雞場、規模雞場和養雞戶建立抽樣框。

1.2 樣品及抽檢方法

根據建立的抽樣框，將全市雞場按照原種、祖代、父母代、商品代進行建檔，原種和祖代場群全部抽樣，商品代場隨機抽樣。場群確定后群內采用流行病學抽樣方式，由于采用實驗室檢測，考慮檢測方法的敏感性，即檢測到陽性動物，按照中國動物衛生與流行病學中心設計的Epi Sampling Calculator 軟件，以估計流行率的抽樣方法進行抽樣檢測，抽樣樣本量計算公式[8]為：

式中n 為抽樣個數，CL 為置信水平，D 為群中的陽性動物數（等于群內個體數與預定流行率的乘積），N 為群內個體數，Se 為檢測方法的敏感性。

每個場點按照群內陽性率10%，置信水平95%，每個場點隨機抽樣30 份。由于原種場陽性率較低，擴大了抽樣數量，每個場隨機抽樣100 份。

2017—2021 年，在日照市采集20 個雞場樣品進行檢測，其中包括原種雞場2 個、祖代/父母代場6 個、商品代場12 個，采樣情況見表1。

表1 日照市種雞場和規模場采樣情況

1.3 檢測試劑與儀器

平板凝集試驗抗原及陽性、陰性血清購自哈爾濱國生生物科技股份有限公司。生物安全柜購自新西蘭公司，超純水純化系統（Cascada）購自美國PALL 公司，移液器購自Eppendorf公司。

1.4 實驗室檢測方法

1.4.1 樣品采集用酒精棉球或碘酒進行消毒后，用針頭刺破雞的肱靜脈、雞翅靜脈或冠尖，用移液器或針管取血適量進行試驗。

1.4.2 檢測方法

用移液器吸取抗原0.05mL，垂直滴于玻板上，然后取血0.05mL，與抗原混合均勻，并涂散至直徑2cm 的液面，2min內判定結果。發生50%（++）以上凝集者為陽性，不發生凝集者為陰性，介于上述兩者之間者為可疑。同時設陽性、陰性血清對照，分別滴加抗原混勻，在2min 內，陽性血清應出現凝集，陰性血清應不凝集。

2 結果與分析

2.1 監測總體情況

2017—2021 年，連續對全市20 個種雞場開展監測，其中日照麻雞場9 個，白羽肉雞11 個。結果顯示，經過多年持續的凈化，雞白痢總體感染率呈明顯下降趨勢，但部分祖代和父母代雞場陽性率仍較高，仍需繼續堅持凈化。

2.2 日照麻雞和白羽肉雞雞白痢檢測情況

2017—2021 年，對9 個日照麻雞場和11 個白羽肉雞場進行監測，雞白痢群體陽性率和個體陽性率呈明顯下降趨勢，凈化成效顯著。但日照麻雞的感染情況較白羽肉雞嚴重，提示應需繼續加強凈化力度。

經過多年的監測凈化，日照麻雞原種場在2021 年未檢測出雞白痢，凈化成效明顯，但日照麻雞祖代/父母代、商品代場的陽性率仍較高，個體陽性率均超過5%，感染情況不容樂觀。白羽肉雞的雞白痢感染情況較日照麻雞輕，但商品代場的個體陽性率也接近5%，感染情況也較嚴重（見表2、表3）。

表2 2017—2021 年日照麻雞和白羽肉雞群體陽性率檢測情況

表3 2017—2021 年日照麻雞和白羽肉雞個體陽性率檢測情況

3 結論與討論

雞白痢既可水平傳播，也可垂直傳播，其中垂直傳播方式隨種群繁育會造成病原擴散，造成危害擴大的繼代效應。因此，種禽場的凈化顯得尤為重要。日照市種禽場品種資源豐富，既有地方優良品種日照麻雞，又有白羽肉雞等引進品種，雞白痢凈化任務難度較大。為做好日照市雞白痢凈化工作，2017—2021 年課題組采用流行病學抽樣方式，考慮檢測方法的敏感性，以估計流行率的抽樣方法，抽檢20 個養禽場開展凈化監測。結果表明，日照市雞白痢總體感染率呈明顯下降趨勢，表明凈化成效顯著。但部分祖代和父母代雞場陽性率仍較高，尤其是日照麻雞的祖代和父母代場陽性率較高，仍需繼續加大凈化力度。

日照麻雞是山東省地方優良品種，抗病力強、耐粗飼、肉質風味好、產蛋多，屬肉蛋兼用型品種，深受廣大消費者的歡迎。1978 年，被列為山東地方家禽良種，2009 年被山東省畜牧獸醫局列入《山東省畜禽遺傳資源保護名錄》[9]。日照市政府高度重視日照麻雞的保種和推廣工作，投入大量資金用于日照麻雞核心群的發展建設，目前日照麻雞存欄原種5000 余只，祖代雞3 萬套，年產父母代雞苗100 萬套，配套品種接近20 個。20 世紀八九十年代，由于外來品種的引進和雜交改良，日照麻雞感染雞白痢的病例報道逐漸增多，凈化工作刻不容緩。本次監測也發現日照麻雞的雞白痢感染率比白羽肉雞要高，尤其祖代/父母代、商品代場的個體陽性率均超過5%，在今后的凈化工作中要加強種源凈化，盡早解決雞白痢對日照麻雞這一優良地方品種的威脅，達到國家凈化標準。

雞白痢不但可以垂直傳播，也可以水平傳播，因此，在做好種源凈化的基礎上，還應在孵化期間減少種蛋在孵化過程中污染風險，同時在運輸期間加強消毒滅源，在飼養環節中強化人員、物資、籠具、飲水、飼料的管理以及消毒滅源等風險環節的管控[10]。