健康體檢女性HPV感染和細胞學結果分析

朱杰 董世雷 張科技

宮頸癌（uterine cervical carcinoma，UCC）是嚴重威脅女性健康的生殖系統惡性腫瘤之一，研究發現，其發病與人類乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染密切相關［1］。其中，持續感染高危型HPV在宮頸上皮內瘤樣病變和侵襲性UCC的發展過程中起到了關鍵作用［2-4］。細胞學檢查是UCC篩查的主要手段，液基薄層細胞檢測（thin prepcytological test，TCT）是臨床常用方法之一。目前，HPV檢測與TCT細胞學檢查相結合是UCC的最佳篩查方案。HPV的感染率和基因型在不同地區分布差異變化巨大，調查特定區域健康體檢女性宮頸脫落細胞的HPV分型結合TCT細胞學檢查結果，可以更好地為該地區HPV疫苗的接種和UCC防治提供科學依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2013年8月至2019年4月在浙江醫院體檢中心進行婦科檢查（包括HPV基因分型檢測和TCT檢測）的女性。所有入選病例均為女性健康體檢者，并剔除了二次復查者。所有受試者無心、肝、腎等重要臟器嚴重疾病。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，所有患者簽署知情同意書。

1.2 主要試劑與儀器 HPV基因分型試劑盒（上海透景生物技術有限公司）使用儀器為基因擴增儀（杭州博日生物技術有限公司，型號：Lifelong）、流式熒光點陣分析儀（美國Luminex公司，型號：LumineX200）。TCT液基薄層細胞處理試劑盒TCT10A（南寧松景天倫生物科技有限公司）。

1.3 研究方法 標本采集由浙江醫院婦科醫師采集宮頸脫落細胞，將標本置于保存液中送檢驗科和病理科進行相關檢測。

1.4 HPV基因檢測 所有操作均由專業技術人員嚴格按照說明書進行。分為核酸提取、核酸擴增、HPV DNA變性及雜交及流式熒光點陣分析。本研究檢測HPV基因型21種，高危型（16種）：HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、CP3804。低 危 型（5種）：HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44。

1.5 統計學方法 采用Prisim5.0統計軟件。計數資料以［n（%）］表示。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 研究對象的HPV感染情況 共納入10,248例健康體檢女性進行研究，年齡分布為21～81歲。在所有HPV感染者中，單一感染占比最高，其次為雙重感染、三重感染及四重感染及以上。按年齡分組的結果顯示：21～30歲占比最高，其次為51～60歲、＞60歲、31～40歲及41～50歲。見表1。

表1 健康體檢女性HPV感染情況［n（%）］

2.2 研究對象的病理TCT檢測情況 按年齡分組的ASCUS結果顯示：41～50歲占比最高（0.55%），其次為51～60歲、21～30歲、＞60歲及31～40歲。見表2。

表2 健康體檢女性病理TCT檢測情況（n）

2.3 研究對象的HPV感染基因型分布與病理TCT結果的關系 95.9%的研究對象TCT檢查結果為未見上皮內病變與腫瘤細胞。在TCT結果為不典型鱗狀細胞（ASCUS）的研究對象中，HPV感染率為100%。其中，高危型占比95.23%，最常見的6個亞型為HR16、HR52、HR58、HR53、HR39和HR18。見表3。

表3 研究對象的HPV感染基因型分布與病理TCT結果的情況

2.4 單一或多重HPV感染在各個年齡段的情況 在942人單一感染者中根據年齡段分布各個HPV基因型情況，見表4。根據感染人數從高到低分布依次為：HR52 148例（41～50歲感染率最高），HR16 142例（41～50歲感染率最高），HR58 117例（51～60歲感染率最高），HR53 99例（41～50歲感染率最高），HR39 70例（31～40歲感染率最高），HR18 58例（41～50歲感染率最高）。根據感染在153人多重感染者中根據年齡段分布各個HPV基因型情況，見表5。根據感染人數從高到低分布依次為：HR16 43例（51～60歲感染率最高），HR58 43例（51～60歲感染率最高），HR53 35例（51～60歲感染率最高），HR39 26例（41～50歲感染率最高），HR18 19例（51～60歲感染率最高），HR51 18例（31～40歲感染率最高）。

表4 研究對象各年齡段單一感染HPV基因分布情況

表5 研究對象各年齡段多重感染HPV基因分布情況

3 討論

本文以本院2013年8月至2019年4月健康體檢婦女為研究對象，分析了HPV感染亞型和TCT細胞學檢測的情況。結果表明HPV的整體感染率為10.68%，高危HPV的感染率為7.88%，顯著低于楊煉［5］報道華西地區數據，這可能與研究人群生活水平、衛生條件等有關。其中，最常見的6個亞型是HR16、HR52、HR58、HR53、HR39、HR18。WHO公布的正常女性中最常見的亞型是HR16、HR18、HR31、HR58。在我國，正常女性中最常見的亞型是HR16、HR52、HR18、HR51［6］。本研究結果與WHO和我國范圍內的數據相比有出入，HR31和HR51并非最常見的類型，而HR53和HR39在本研究中較為常見，這與趙麗等［7］研究結果較為一致，而與馮余寬［8］研究結果較大，這可能與研究人群差異有關。TCT結果為ASCUS的研究對象中，HPV感染率為100%，其中高危型占比為95.23%，最常見的6個亞型中，除HR16、HR58和HR52占比最高外，其余亞型的TCT差異不大。

不同年齡組患者的HPV感染不同［9-11］。筆者團隊研究顯示21～30歲HPV感染率最高為14.20%，這可能與該年齡段婦女性活動度比較高有關。同時，按年齡分組的TCT中ASCUS結果表明41～50歲占比最高，然后依次為51～60歲、，21～30歲、＞60歲和31～40歲。因此，有必要在中老年婦女中宣講有關宮頸疾病的相關知識，并且對該年齡段人群進行UCC篩查尤為重要。

本研究表明，21～30歲、51～60歲和＞60歲年齡段研究對象中，單一和多重HPV感染率均較高，這與WANG等［12］研究結果相符。年輕女性生殖道抗感染能力弱，宮頸上皮細胞較敏感，容易受HPV感染。同時，51～60歲這一年齡段圍絕經期激素波動引起生理及免疫失調，從而導致HPV單一和多重HPV感染率增高。60歲以后，隨著年齡的增長，機體免疫能力逐漸降低，HPV感染風險增加。因此，有性生活后的女性均有必要進行HPV分型檢測并定期進行TCT篩查。