蕪萍對羅非魚生長、肌肉營養與免疫指標的影響

秦志清，梁 萍，林建斌，王茂元，劉銀華，李學貴，邱曼麗，黃洪貴

（福建省淡水水產研究所，福建福州 350002）

蕪萍（Wolffia arrhiza）屬于浮萍科、蕪萍屬的多年生飄浮植物，又名無根萍、瓢莎和粒萍等（黃斌，2011），細小如沙，為世界上最小的種子植物。蕪萍生長快、適應性強、分布很廣，除了北極和沙漠地區外全球各地水域均有分布，我國各省（區）亦有分布（印萬芬，1998）。其營養豐富，氨基酸組分平衡性好，特別是畜禽、水產飼料中幾種主要限制性氨基酸（蛋氨酸、賴氨酸、蘇氨酸和色氨酸等）含量均較高（黃斌，2011）；同時易被消化吸收，適口性好，有望成為植物性蛋白源及活性黃酮類成分的新來源。

在我國傳統養魚學中，蕪萍被用作天然生物餌料來養魚的歷史很悠久，但將其作為飼料原料添加到配合飼料中，以驗證其功效的研究是20世紀末才開始。陳永安等（1999）開展了蕪萍配合飼料網箱養魚試驗；黃斌（2011a）在基礎日糧中添加蕪萍，結果表明其對泥鰍的生長有顯著影響；黃斌等（2011b）還探討了日糧添加蕪萍對紅色草金魚生長及體色的影響，認為蕪萍不但能影響紅色草金魚的生長性能，而且還能顯著改善其體色；季鵬飛等（2012）分析了不同蕪萍餌料組分對兩種社群規模的鰲蝦生長影響。但目前蕪萍作為主要飼料原料養殖羅非魚的研究鮮見報道。本研究擬在基礎飼料中添加不同比例的蕪萍粉，探討其對羅非魚生長、肌肉營養及免疫指標的影響，旨在開發新的飼料原料，并為羅非魚肌肉品質改良提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 材料來源 試驗用羅非魚為福建省淡水水產研究所榕橋試驗基地繁育，平均體重172 g左右。蕪萍來源于福建省閩侯縣某漁場，使用前經去雜、濾水、晾曬、烘干、粉碎后，過60目篩獲得蕪萍粉。其質量要求為：色澤一致，呈黃色或淺黃色粉狀；無其他污染及金屬雜質（雜質≤0.5%）；有青草氣味；無發酵、霉變、結塊蟲蛀及異味異嗅。

基礎料的常規營養成分為水分 （9.85±0.07）%、粗灰分（14.35±0.07）%、粗蛋白質（32.07±0.64）%、粗脂肪（5.72±0.13）%。在基礎料中分別添加0、5%、10%、20%的蕪萍粉 （分別記為A、B、C、D組），混勻后用軟顆粒機制成4種顆粒飼料，經晾曬后儲存備用。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗魚養殖管理 試驗在福建省淡水水產研究所榕橋試驗基地進行。停食24 h后，從水泥池挑選規格基本一致、健康無傷的羅非魚，放入室內循環水系統中（試驗桶直徑1.0 m，水深0.8 m），每桶15尾。試驗分4個組（1個對照組、3個試驗組），每組3個平行。試驗用水為曝氣后的自來水，試驗期間水溫25～30℃、溶解氧≥5.0 mg/L、pH 6.9～7.2。循環效率為2 h/全循環，前期每隔1星期排污1次，后期每星期1次。投餌采取飽食投喂法，2次/d（上午8:00～9:00，下午3:00～4:00），以30 min內攝食完為準。試驗周期8周 （56 d），從2020年7月20日至9月13日。

1.2.2 生長指標測定 試驗結束后，試驗魚停食24 h后測定各生長指標。計算公式如下：

增重率/%＝（增重/始重）×100；

飼料系數＝總投餌量/總增重；

成活率/%＝（試驗結束魚尾數/試驗開始魚尾數）×100；

臟體比/%＝內臟重/魚體重×100；

肝體比/%＝肝胰臟重/魚體重×100；

肥滿度＝體重×100/體長3。

1.2.3 肌肉營養測定 飼養試驗結束后，每個試驗組各取4尾魚，各取背部肌肉50 g，去皮，-20℃下冷凍備用。肌肉的水分測定參照GB 5009.3-2016常壓恒溫干燥法進行；粗灰分測定參照GB 5009.4-2016 550℃干法灰分法進行；粗蛋白質含量測定參照GB 5009.5-2016凱氏定氮法進行；粗脂肪測定參照GB 5009.6-2016索氏提取法進行；氨基酸組成與含量 （除色氨酸外）參照GB 5009.124-2016鹽酸水解法使用氨基酸自動分析儀測定。

1.2.4 血清免疫指標測定 每個試驗桶另隨機取5尾魚，采用尾靜脈取血，4℃離心（3000 r/min，10 min）后取血清于-80℃冰箱保存待測。血清中總超氧化物歧化酶（T-SOD）、堿性磷酸酶（AKP）、溶菌酶（LZM）活性及丙二醛（MDA）含量均采用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒進行測定。TSOD、AKP活性和MDA含量利用酶標儀（TECAN 200PRO，瑞士）測定，而LZM活性則用紫外可見分光光度計（UV-1601型，北京瑞利分析儀器有限公司）進行測定。

1.3 數據處理 試驗數據采用SPSS軟件處理，統計值采用“平均值±標準差”表示。

2 結果

2.1 蕪萍對羅非魚生長性能的影響 由表1可知，各組的增重率以C組最高，達到72.64%，顯著高于其他各組（P＜0.05），比對照組增加26.60%，并隨著蕪萍添加比例增加呈現出先上升后下降的趨勢，D組顯著低于其他組（P＜0.05），比對照組降低18.75%。飼料系數以D組最高，為3.10，顯著高于其他組（P＜0.05），其他各組之間差異不顯著（P＞0.05）。形體指標方面，臟體比和肥滿度在A組與B組之間、C組與D組之間差異不顯著（P＞0.05），但A、B組與C、D組之間差異顯著 （P＜0.05）；各組間的肝體比和成活率均沒有顯著差異（P＞0.05）。

表1 蕪萍對羅非魚生長性能的影響

2.2 蕪萍對羅非魚肌肉營養的影響

2.2.1 蕪萍對羅非魚肌肉常規營養成分的影響由表2可知，隨著蕪萍添加比例的上升，羅非魚肌肉的水分含量略有下降，其中C組最低并與其他各組差異顯著（P＜0.05）；灰分以D組含量最高（1.33%），并呈現隨蕪萍添加比例的上升而逐步增加趨勢；粗蛋白質含量也有逐步上升的趨勢，D組含量最高（23.15%），但與試驗B組、C組無顯著差異（P＞0.05）；粗脂肪含量方面，B組與對照組（A組）基本一致，C組含量最高（1.23%），且與A組和B組存在顯著差異（P＜0.05）。

表2 蕪萍對羅非魚肌肉常規營養成分的影響 %

2.2.2 蕪萍對羅非魚肌肉氨基酸含量的影響 由表3可知，肌肉的總氨基酸（TAA）、必需氨基酸（EAA）和鮮味氨基酸（UAA）的含量、WEAA/WTAA與WEAA/WNEAA比值均以C組為最高，分別達到21.14%、8.64%、8.08%、40.87%和81.59%，但與其他各組沒有顯著差異（P＞0.05）。

表3 蕪萍對羅非魚肌肉氨基酸含量的影響 %

2.3 蕪萍對羅非魚免疫指標的影響 由表4可知，T-SOD、LZM及MDA均隨蕪萍添加比例的上升呈現先升后降的趨勢，其中C組的T-SOD活性顯著高于其他各組 （P＜0.05），MDA含量則以D組為最低，但試驗各組與對照組相比均差異不顯著；而AKP活性隨著蕪萍添加比例的上升而逐步升高，D組顯著高于對照組（P＜0.05）。

表4 蕪萍對羅非魚血清免疫指標的影響

3 討論

蕪萍的營養豐富，利用歷史悠久，用途廣泛，既有藥用價值（利尿、抗菌、解毒等作用），也可直接食用（作為蔬菜食用），同時還可作為畜禽、魚類的優質餌料（印萬芬，1998），特別是在草魚苗種培育中應用較多 （劉松巖，2012；葉華，2011；朱久遠，2001）。有研究表明，蕪萍含高質量的蛋白質，且其特性接近動物蛋白和大豆蛋白（Skillicorn，1993），這為蕪萍應用于動物飼料提供了方向和理論依據。

陳永安等（1999）探討了蕪萍配合飼料的養魚效果，分別在配合飼料中加入30%或40%蕪萍干粉養殖草魚，或加入20%～30%蕪萍干粉養殖鯉魚、工程鯽、淡水白鯧，結果表明其增重率明顯高于對照組，而飼料系數則明顯低于對照組。黃斌（2011）也證明在日糧中添加10%～30%的蕪萍對泥鰍的生長有正向促進作用。本研究結果表明，各試驗組羅非魚的增重率和飼料效率隨著蕪萍添加比例增加呈現出先上升后下降的趨勢，以10%添加組（C組）最高，分別達到77.12%和58.86%，顯著高于對照組及其他試驗組（P＜0.05）。這再次證明了蕪萍具有明顯的促生長作用。但添加量過高（20%添加組）反而會抑制羅非魚的生長性能，這可能是由于蕪萍添加比例增高時，其所含某些化學成分影響了羅非魚腸道對營養物質的吸收利用，具體原因有待于進一步的研究；而飼料系數的上升可能與蕪萍添加比例增加導致試驗飼料水中穩定性降低有關。

在基礎飼料中添加不同比例的蕪萍干粉，對羅非魚的肌肉營養有一定影響。肌肉中的粗灰分和粗蛋白質含量隨蕪萍添加比例的上升呈現逐步增加趨勢，而粗脂肪含量則以C組最高，達到1.23%；其肌肉的TAA、EAA和UAA的含量、WEAA/WTAA與WEAA/WNEAA比值均以C組為最高，但與其他各組差異不顯著（P＞0.05）。分析認為，這可能與蕪萍的氨基酸組分平衡性好，特別是水產飼料中幾種主要限制性氨基酸（蛋氨酸、賴氨酸、蘇氨酸和色氨酸等）含量均較高有關。試驗結果還表明，羅非魚血清的T-SOD和LZM活性及MDA含量均隨蕪萍添加比例的上升呈現先升后降的趨勢，其中C組的T-SOD活性顯著高于其他各組（P＜0.05）。說明在配合飼料中添加一定比例的蕪萍，可提高羅非魚的機體免疫力。

4 小結

在羅非魚基礎飼料中添加10%的蕪萍粉具有明顯促生長、提高免疫力的效果，同時對其肌肉的營養也有一定改善作用。