膠質瘤組織TMEM168的表達與病人預后的關系

馬 鵬 王建村 黃 杰 薛 強

膠質瘤是最常見的顱內原發性惡性腫瘤，其發病機制尚不清楚，即使采用手術聯合術后放化療等綜合治療，預后較差。跨膜蛋白（transmembrane protein，TMEM）家族參與多種病理生理過程，包括細胞信號轉導、細胞趨化、粘附、凋亡和自噬。Xu等[發現，TMEM168在膠質母細胞瘤細胞中高表達，通過Wnt/β-Catenin 信號通路促進細胞增殖和侵襲。本文探討膠質瘤組織TMEM168 表達水平及其與病人預后的關系。

1 資料與方法

1.1 病例選擇標準 納入標準：年齡≥18歲；臨床資料完整；術后病理證實為腦膠質瘤；術前未接受放、化療。排除標準：合并其他部位腫瘤；合并急慢性感染；合并嚴重心肝腎等臟器疾病；合并內分泌疾病。

1.2 標本來源 選取2014 年6 月至2016 年9 月手術切除的符合標準的腦膠質瘤140例，其中男88例，女52例；年齡23～78歲，平均（53.01±8.23）歲；高級別膠質瘤76例（WHO分級Ⅲ級26例，Ⅳ級50例），低級別膠質瘤64 例（WHO 分級Ⅰ級12 例，Ⅱ級52 例）。選取顱腦損傷內減壓術中切取的非腫瘤腦組織50 例為對照，其中男29 例，女21 例；年齡29～65 歲，平均（54.13±5.54）歲。

1.3 免疫組化染色檢測TMEM168 的表達 組織標本石蠟包埋，制備切片（4 μm）。根據免疫組化染色試劑盒（泉州市睿信生物科技有限公司）說明書進行操作。切片脫蠟、水化后，進行抗原修復。用封閉液封閉2 h，加入兔抗人TMEM168一抗（1:1 000，美國Sigma公司）溫室孵育2 h，PBS洗滌2次，加入二抗室溫孵育30 min。用DAB顯色、蘇木精復染，最后封片顯微鏡下觀察，TMEM168 蛋白定位于細胞質內（圖1）。每張切片隨機選擇5個高倍（×200）視野進行評分：染色評分由染色強度評分（無著色0分，淺棕色1分，中棕色2分，深棕色3分）和染色細胞百分比評分（無染色為0 分；……