肉羊首次、二次輸卵管沖胚效果分析

陳童 玉山江

（新疆畜牧科學院畜牧研究所 830011)

薩福克肉羊是目前世界上著名的優良肉用品種，具有體格大、體質強壯、性成熟早、繁殖率高、產肉性能好、生長快、適應性強及雜交效果好等特點，是良好的雜交父本。但良種薩福克公羊數量有限，僅靠其自然繁殖無法滿足本地羊雜交改良需要。因此，為了提高供體羊利用率，發揮優良品種生產性能，追求更高的經濟效益，在經過第一次超排處理后，間隔一定時間對母羊再次進行超排處理。本試驗對薩福克肉羊進行第一次和第二次超排處理，胚胎移植技術進行研究，以降低良種繁殖、養殖成本，提高經濟效益。

1 材料和方法

1.1 供體羊選擇

選擇身體健康、膘情中上等、無遺傳和繁殖疾病、健康狀況良好的年齡在2～5 周歲的黑頭薩福克母羊，在超排前兩個月加強飼養管理，并進行必要的防疫、檢疫和驅蟲工作。

1.2 受體羊選擇

本地土種羊均為經產母羊，生殖系統正常，空胎，體重在45kg 以上。

1.3 藥物選擇

促卵泡激素(FSH)，浙江省寧波市激素制品廠生產，凍干粉末，安瓿包裝，規格100IU/安瓿，4℃冰箱保存，用前用10mL 生理鹽水稀釋。促黃體素(LH)，浙江省寧波市激素制品廠生產，凍干粉末，安瓿包裝，規格每安瓿200IU/，4℃冰箱保存，用前用2mL 生理鹽水稀釋。氯前列烯醇(PGF2a)，浙江省寧波市激素制品廠生產，規格為每支0.2mg/2mL。CIDR 和孕酮海綿陰道栓，進口。

2 方法

2.1 供受體母羊的管理

供、受體母羊均經2～3 個情期觀察，發情正常，并進行編號，實行分群飼養管理。

2.2 供受體母羊的分組

供體羊采用第二情期超排和埋栓超排兩套方案。受體母羊均埋入孕酮栓，供受體母羊相互對應，按照1:6 進行數量分配（即1 只供體，配6 只受體）。

2.3 供體羊超排

2.3.1 第二情期超排

自然發情供體羊從發情后的第12～13 天開始用FSH 進行超排，以遞減劑量連續注射3d，共6 次，每次間隔12h，FSH 總劑量為180IU/只。當FSH 注射到第5 和第6 針時分別注射1次PGF2a，0.lmg/只，促其發情。

2.3.2 埋栓處理

沒有自然發情的供體進行埋栓處理，埋栓后第9 天用FSH進行超排處理，以遞減劑量連續注射3d，共6 次，每次間隔12h，FSH 總劑量為180IU/只。當FSH 注射第5 針時撤栓，同時注射1 次PGF2a，0.lmg/只，撤栓后用生理鹽水沖洗陰道，注射第6 針FSH 時再注射1 次PG，0.lmg/只。

2.4 供體羊的發情及配種

供體羊采取公羊試情法進行發情鑒定。發情同時肌肉注射LH，120IU/只。發情后12h、24h 分別進行兩次配種，配種均以公羊本交的方式進行。

2.5 胚胎的回收及鑒定

供體羊從第一次配種的時間開始計算，65～72h 后采用輸卵管采胚法回收胚胎，在術前24h 開始禁飼[1]。刮毛、清洗消毒完全后打開腹腔，牽拉出子宮和卵巢，對黃體進行計數，將沖胚管一端由輸卵管傘部喇叭口插入約2cm 左右深處（打活結或用手指捏緊固定），另一側接集卵皿。用注射器吸取37℃地沖卵液5mL，在子宮角靠近輸卵管的部位，將針頭朝輸卵管方向扎入，一只手的手指在針頭后方捏緊子宮角，另一只手推注射器，沖卵液由宮管結合部流入輸卵管，經輸卵管流入集卵皿。回收的胚胎根據形態特征分為A，B，C，D 4 個等級[2]，A,B級胚胎作為可用胚，用于鮮胚移植。

2.6 受體羊移植

受體羊卵巢必須有正常黃體存在，無黃體或黃體過小的受體不用于移植。且受體羊與供體羊發情同步差不能超過12h。移植位置與胚胎回收位置相對應[3]。

3 結果與分析

百分數之間的比較采用卡方檢驗。平均數之間的比較采用T 檢驗。

3.1 首次超排與二次超排各項指標比較

由表1 可知，首次超排和二次超排處理的供體羊平均黃體數和胚胎可用率差異不顯著(p＞0.05)；但二者胚胎回收率差異顯著（p＜0.05），說明超排處理對首次超排和二次超排的超排效果沒有影響，但由于第二次超排的供體羊存在輸卵管傘或輸卵管粘連的情況，可能會造成回收率降低。

表1 首次超排與二次超排對超排效果的影響

3.2 第二情期超排處理各項指標比較

由表2 可知，首次超排和二次超排處理后的胚胎回收率分別為93.1%和80.5%，兩者差異顯著（p＜0.05）。二者可用率分別為89.0%和88.4%，差異不顯著(p＞0.05)。利用第二情期超排處理沒有造成二者黃體數的明顯差異。

表2 第二情期超排處理對超排效果的影響

3.3 埋栓超排處理各項指標比較

由表3 可知，首次超排和二次超排處理的供體羊胚胎回收率分別為84.4%和76.3%，兩者差異顯著（p＜0.05）。二者可用率分別為86.9%和88.9%，差異不顯著(p＞0.05)。埋栓超排處理沒有對二者黃體數造成顯著差異。

表3 埋栓超排處理對超排效果的影響

4 討論

（1）重復超排使優質供體羊的利用率大幅增加，但不可避免的粘連情況使回收率明顯降低，粘連嚴重者只能淘汰。

（2）輸卵管法回收胚胎對母羊造成的損傷較大，極易造成粘連，這可能因為輸卵管是生殖系統中比較纖細的一段，手術中需將整個輸卵管連同卵巢拉出腹腔，術中易造成卵巢、輸卵管等組織損傷。

（3）在沖胚過程中，總結出手術沖胚時手術處周圍羊毛要刮凈，嚴格消毒，以防產生炎癥；沖胚時手術動作要輕、要細致，防止輸卵管、輸卵管傘及其他部位出血，造成粘連、堵塞；手術時用生理鹽水加入青霉素和鏈霉素沖洗傷口和血液，沖胚結束后用普魯卡因油劑青霉素涂抹子宮、卵巢及輸卵管防止發生粘連。只要手術規范，一般不至于發生粘連，可反復使用，節約成本。