女性生殖道沙眼衣原體、解脲支原體和淋球菌DNA定量檢測分析

許志定，林小玲

羅定市人民醫(yī)院檢驗科，廣東羅定 527200

沙眼衣原體（CT)、解脲支原體（UU）、淋病奈瑟菌（NG）感染是目前世界范圍內(nèi)引起性傳播感染的常見病原體。非淋菌（UU、CT 等）性尿道炎屬于我國重點監(jiān)測的傳染病，淋菌（NG）感染更是法定乙類傳染病。近年來，泌尿生殖道CT、UU 感染在我國呈逐年上升趨勢，淋病的發(fā)病率在以往逐年下降的基礎上近年來有起伏不定的趨勢［1］。早有研究認為CT、UU、NG 嚴重影響女性身心健康，可導致女性陰道炎、宮頸炎、盆腔炎等一系列嚴重炎癥和并發(fā)癥，影響患者的心理及家庭健康［2-3］，還可導致不良妊娠［4-5］，因此及時發(fā)現(xiàn)并有效治療隱匿的性傳播疾病十分重要。鑒于傳統(tǒng)的培養(yǎng)檢測、免疫學檢測等方法靈敏度低、準確率低等缺點，本研究采用實時熒光PCR（FQ-PCR）法定量檢測2 619例于2018年6月—2021年5月到該院就診女性的生殖道分泌物CT、UU和NG 的DNA，旨在準確了解該地區(qū)女性群體生殖道CT、UU、NG 的患病情況和特征，為臨床診斷治療及預防提供實驗室依據(jù)。現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取到本院婦科、產(chǎn)科、泌尿外科診治疑似泌尿生殖系感染的患者2 619例作為研究對象，就診者主訴為陰道分泌物異常或外陰癢，年齡8～76 歲，平均（35.51±9.95）歲。將本研究對象分為≤20 歲組168例，21～30歲組915例，31～40歲組961例，41～50歲組386 例，≥50 歲組189 例。采集其生殖道分泌物進行沙眼衣原體（CT)、解脲支原體（UU）、淋病奈瑟菌（NG）檢測，對CT、UU 和NG 檢測結(jié)果進行回顧性分析。

1.2 儀器與試劑

儀器為上海宏石醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的SLAN-96P 全自動醫(yī)用PCR 分析系統(tǒng)。試劑盒由上海科華生物工程股份有限公司提供。試劑使用均在有效期內(nèi)，實驗操作及結(jié)果判斷嚴格按照說明書進行。

1.3 標本采集收集

先將宮頸口過多的分泌物清潔，再用無菌棉拭子插入女性宮頸1.0～1.5 cm，稍用力轉(zhuǎn)動并停留數(shù)秒后取出，將標本均立即置入無菌專用試管加蓋密閉送檢。

1.4 觀察指標

①觀察研究對象性病總體感染率。②觀察研究對象沙眼衣原體（chlamydia trachomatis,CT)、解脲支原體（ureaplasma urealyticum, UU）及淋病奈瑟菌（neisseria gonorrhoeae, NG）單一病原體感染率。③比較觀察研究對象CT、UU 及NG 混合感染類型及感染率。④比較觀察研究對象CT、UU、NG 在不同年齡段及不同季節(jié)的感染率。

1.5 統(tǒng)計方法

應用SPSS 23.0 統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行描述性統(tǒng)計分析，符合正態(tài)分布的計量資料用(±s)表示；計數(shù)資料用頻數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 總體感染情況

2 619 例就診女性CT、UU、NG檢測中，性病感染者有822例，總感染率為31.4%（822/2 619）。感染者年齡最小12 歲，最大76 歲；其中淋球菌感染年齡最小為14歲，最大為76歲。

2.2 CT、UU、NG單一病原體感染情況

UU-DNA感染率最高為41.7%，CT-DNA感染率為10.2%，NG-DNA檢出率為4.8%。見表1。

表1 CT、UU及NG單一病原體感染情況

2.3 NG、CT、UU混合感染類型及分布

存在多種混合感染現(xiàn)象，混合感染中CT+UU 的陽性率為6.7%，相對高于其他混合感染類型，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 CT、UU及NG混合感染類型及分布

2.4 年齡分析

CT 感染患者≤20歲最高，達23.4%；21～30歲和≥50 歲組感染率分別為12.7%和10.3%。UU 感染患者≤20 歲為主，感染率為47.5%，隨年齡增加呈遞減趨勢。NG 感染患者以≥50 歲組為主，感染率為11.7%，其次為41～50 歲為6.8%。上述組間比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 CT、UU、NG不同年齡段分布情況

2.5 季節(jié)性分析

女性CT、UU、NG 總體感染率以冬春季最高為21.6%和20.1%；UU 感染率以冬季最高為56.4%，其次為春季50.3%；NG 感染率以秋季最高8.2%，春季最低1.9%，上述季節(jié)間差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。CT 感染在春夏秋冬差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表4。

表4 不同季節(jié)CT、UU、NG感染情況

3 討論

CT、UU 和NG 是我國性病實驗室檢查的主要項目。傳統(tǒng)的檢測方法包括培養(yǎng)法檢測、形態(tài)檢測和免疫方法檢測，其中形態(tài)學檢查靈敏度低、準確率低，易造成誤診和漏診；培養(yǎng)法檢測作為檢測的“金標準”，檢測特異度高，但存在檢測周期長及某些病原體較難培養(yǎng)的問題。在目前所有檢測方法中，F(xiàn)Q-PCR 檢測技術(shù)將基因擴增、特異分子雜交、化學熒光相結(jié)合，具有操作簡便、靈敏性、特異性和準確性高等優(yōu)點［6］，檢測所得結(jié)果可靠，可及時有效地為臨床提高準確判斷病情的依據(jù)；而且只要取材一次就能對CT、UU、NG 項目同時進行檢測，使用該法檢測快速、簡便、敏感、特異、廉價，大大節(jié)省時間，提高檢測效率。

研究顯示，本省各個地區(qū)性病疫情近年呈上升趨勢，防控形勢依然嚴峻［7］。本研究采用實時熒光定量PCR 方法對女性生殖道標本進行CT、NG、UU的DNA 檢測結(jié)果顯示，該地區(qū)總體陽性率為31.4%，低于廣西彭契六等［8］、廣東深圳宗曾艷等［9］、廣東茂名車漢榮等［10］采用相同方法對女性生殖道標本進行CT、NG、UU 的DNA 檢測所報道的總陽性率43.4%（2 562/5 897）、57.4%（2 104/3 506）、70.3%（23 100/32 853），其中廣西、深圳報道UU 的陽性率遠高CT和NG 的陽性率。茂名車漢榮等報道UU 的陽性率與CT 和NG 的陽性率接近，而該地區(qū)UU 的檢出率（41.7%）遠高于CT（10.2%）和NG（4.8%）的檢出率。這可能是由于地域差異，導致對這些病原體感染率的報道并不一致。盡管該地區(qū)CT、UU、NG 總體檢出率低于某些地區(qū)，但仍需要重視控制傳染源、切斷傳播途徑及保護易感人群，尤其需重視對UU 感染者檢測和治療。

沙眼衣原體（CT）可通過性接觸和母嬰傳播，感染后可導致眼、生殖道、腸道等多器官發(fā)病，CT 感染已成為全球公共衛(wèi)生問題，被WTO 在全球“Towards Ending STIs”“全民健康覆蓋”戰(zhàn)略中提出將其納入2016—2030 降低90%性傳播疾病發(fā)病率的實施戰(zhàn)略中［11］。熊明洲等[7]報道稱，本省（廣東省）生殖道沙眼衣原體感染發(fā)病率居于高位為72.2/10 萬，女性增長尤其明顯。本研究對納入患者的感染情況進行分析發(fā)現(xiàn)，CT 陽性率為10.2%，與廣西彭契六等（陽性率8.84%）、廣東深圳宗曾艷等（陽性率9.27%）、四川省劉玉林[12]（陽性率11.0%）報道的檢測結(jié)果較接近，遠高于上海陳佳婕等[13]（陽性率7.51%）、廣東揭西丘玉輝等[14]報道的檢測結(jié)果。鑒于CT 在本地區(qū)、本省、全國乃至全球的高感染率，應持續(xù)加大女性對衣原體感染的認識，加大篩查和檢測發(fā)現(xiàn)的力度，力求早期發(fā)現(xiàn)、及時治療。

UU 是常見的生殖道病原體，是一種條件致病菌，需要結(jié)合臨床癥狀評估患者感染風險，確定是否需要治療[15]，但UU 容易反復及交叉感染，仍然會危害患者健康。該地區(qū)UU 陽性率為41.7%，低于廣西彭契六等(58.20%)、廣東深圳宗曾艷等(62.54%)、四川劉玉林等(64.1%)、上海陳佳婕等(71.27%)、廣東揭西丘玉輝(52.20%)報道的情況，這可能與本地區(qū)女性群體對該病原體感染的認識相對不足、檢測發(fā)現(xiàn)的力度不夠有關(guān)，仍待進一步揭示。

淋球菌（NG）感染又稱淋病，淋球菌感染患者會瘙癢、灼熱感、排尿疼痛等，會造成尿道、陰道化膿性感染，破壞患者尿道、陰道黏膜，如果不及時治療會形成瘢痕和不育等。大多是由不潔性生活感染引起。本地區(qū)NG 陽性率為4.8%，遠高于廣西彭契六等(2.45%)、廣東深圳宗曾艷等(1.25%)、上海陳佳婕等(1.47%）發(fā)現(xiàn)報道的情況，也遠低于上述廣東茂名車漢榮等（24.44%）、四川劉玉林等（9.0%）報道的情況。這說明衛(wèi)生知識宣教的覆蓋率還是不很夠，力度還需要加強，性衛(wèi)生知識方面的教育也有待提高。如何讓所有的女性了解更多的衛(wèi)生知識，更好地保護自己是一項很重要、很必要的工程，有待醫(yī)務人員的努力。值得重視的是，淋球菌除對常規(guī)抗生素產(chǎn)生普遍耐藥外，在全球多個地區(qū)出現(xiàn)對頭孢曲松耐藥的菌株，這是淋病診療工作的巨大挑戰(zhàn)［16］。

混合感染CT、UU、NG 對患者的危害比單一感染更嚴重，可導致患者病情反復、遷延、久治不愈。該研究發(fā)現(xiàn)，混合感染有138 例，其中CT+UU 最常見，三重感染率為0.8%，臨床治療應注意應精準用藥，減少抗生素濫用和過度治療。

不同年齡段的感染情況分析顯示，CT 陽性率以小于20歲為主，40歲以下是UU高感染率階段，提示性活躍階段CT、UU 感染水平相對高。然而分析發(fā)現(xiàn)，該地區(qū)50 歲以上的中老年人CT 感染率也不低，甚至NG 感染率（11.7%）比其他年齡段要高，這可能是50 歲以上者，尤其老年人缺乏性教育和自我保護意識，防治工作中對此類人群重點關(guān)注。

本研究結(jié)果顯示，CT 檢出率季節(jié)差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但UU、NG 檢出結(jié)果提示感染有季節(jié)性特點，冬春兩季UU 檢出率最高；NG 在秋季檢出率最高，其次為夏季，與廣西報道的情況存在一定的差異。這可能與冬春氣溫較低，人們衛(wèi)生保暖意識有關(guān)，以及夏秋季氣溫更適合NG 生長繁殖有關(guān)。

綜上所述，地區(qū)CT、UU 和NG 的感染情況不容忽視，檢出率具有明顯的地區(qū)、年齡和季節(jié)差異。