酒泉市肅州區生豬屠宰場沙門氏菌污染情況調查與分析

夏冰芝，王志龍

（1.酒泉職業技術學院，甘肅 酒泉 735000；2.酒泉市畜牧獸醫總站，甘肅 酒泉 735000）

沙門氏菌屬革蘭氏陰性菌，在自然界廣泛分布且種類眾多，目前已知的2 600多種血清型中有部分血清型沙門氏菌（如腸炎沙門氏菌）可感染人，嚴重時可危及患者生命[1]。人類接觸被沙門氏菌污染的水源、食物和糞便等可感染該病，主要臨床癥狀包括急性胃腸炎（如嘔吐、腹瀉等）、敗血癥及副傷寒等[2]。誠然，沙門氏菌病是重要的食源性細菌病，對消費者健康造成巨大的威脅。

消費者接觸該病原主要是與食用或接觸被該病原污染的肉類相關[3-4]。豬肉產品進入市場的第一步是屠宰與加工，而生豬在屠宰和加工過程中容易受食源性病原菌污染。邱燕等調查結果發現，貴州地區屠宰場新鮮豬肉樣品沙門氏菌污染率達14.0%（7/50）[5]；韓依辛等調查結果發現，廣東10個屠宰場來源豬肉樣品沙門氏菌檢出率為14.06%（70/498）[6]；周政對湘潭市部分屠宰場來源豬肉和環境樣品的檢測結果表明，90份豬肉或環境樣品沙門氏菌檢出率為10.0%，其中環境樣品的檢出率（15.6%）較豬肉樣品的檢出率（6.9%）更高[7]。以上文獻數據表明當前部分地區屠宰場來源豬肉樣品沙門氏菌污染情況較為嚴重，同時環境樣品中細菌污染也不能被忽視。為了解酒泉肅州區部分屠宰場沙門氏菌污染情況，從肅州區2個屠宰場采集屠宰豬肉組織、屠宰器具和環境樣品共210份進行檢測，并對分離菌血清型和耐藥情況進行試驗與分析。

1 材料與方法

1.1 樣品來源與采集方法

2021年4—9月從酒泉市肅州區2個生豬屠宰場采集豬肉組織樣品（105份）、器具樣品（42份）和環境樣品（63份）共210份。其中豬肉樣品包括肺臟、淋巴結和扁桃體等，分別切取少量以上組織樣品共約50 g，標記后保存于無菌封口袋；器具主要包括殺豬刀、刮毛刀、運輸豬肉或生豬移動車等；環境樣品主要包括生豬剖殺臺和豬肉分割臺。用蘸取少量PBS或生理鹽水溶液的棉球在環境或器具樣品表面反復涂抹，標記后置于封口袋內。所有樣品低溫送至酒泉職業技術學院，保存于4 ℃，待檢。

1.2 沙門氏菌分離與鑒定

取少量組織樣品（肺臟、淋巴結和扁桃體混合物）勻漿；將環境或器具樣品所用棉簽與少量PBS混勻。使用滅菌接種環蘸取少量勻漿液或混合液后在鮮血瓊脂培養基進行平板劃線，在適宜環境（37 ℃恒溫箱）下培養。其后挑選疑似沙門氏菌菌落在麥康凱培養基表面進行劃線，37 ℃恒溫箱培養24 h，挑取疑似沙門氏菌進行革蘭氏染色和16S rRNA基因序列擴增、測序與分子鑒定[7]。

1.3 沙門氏菌分離株血清型鑒定

將獲得的沙門氏菌分離株接種于LB固體和半固體培養基，參照相關國家標準（GB 4789.4—2016）和White-Kauffmann抗原表使用玻板凝集試驗對分離株血清型進行鑒定。

1.4 藥敏試驗

選擇15種臨床常用抗生素藥物（阿莫西林、氨芐西林、氨曲南、頭孢他啶、頭孢唑林、頭孢噻肟、慶大霉素、鏈霉素、大觀霉素、四環素、磺胺甲氧嘧啶、環丙沙星、氯霉素、呋喃唑酮和呋喃妥因），使用藥敏紙片瓊脂擴散法對本試驗獲得沙門氏菌分離株進行藥物敏感試驗[4]。

2 結果

2.1 肅州區屠宰場來源樣品沙門氏菌污染情況調查結果

由表1可知，小型屠宰場來源樣品沙門氏菌檢出率超過大型屠宰場檢出率近1倍，分別為12.05%（10/83）和6.30%（8/127）；不同來源樣品檢出率差異較大，其中環境樣品檢出率最高，為14.28%（9/63），器具樣品和豬肉樣品檢出率稍低，分別為4.76%（2/42）和6.67%（7/105）。

表1 肅州區屠宰場來源樣品沙門氏菌污染情況調查結果

2.2 沙門氏菌分離株血清型鑒定結果

對獲得的18個沙門氏菌分離株進行血清型鑒定，結果發現，18個分離株中共鑒定到5種血清型，其中鼠傷寒沙門氏菌最常見，其所占比例為33.33%（6/18）；其次為羅森沙門氏菌和倫敦型沙門氏菌，所占比例均為22.22%（4/18），而腸炎沙門氏菌和德比型沙門氏菌分離菌數量分別為3株和1株，所占比例分別為16.67%（3/18）和5.55%（1/18）。

2.3 沙門氏菌藥敏試驗統計結果

對分離的18個菌株進行耐藥性試驗，發現不同菌株耐藥譜存在差異。如表2所示，超過50%菌株對阿莫西林、氨芐西林、大觀霉素、氯霉素、磺胺甲氧嘧啶和四環素具有耐藥性；大部分菌株對氨曲南（94.45%）、頭孢他啶（94.45%）、呋喃妥因（94.45%）、頭孢唑林（83.33%）、呋喃唑酮（83.33%）和頭孢噻肟（77.78%）敏感。

表2 沙門氏菌分離株耐藥性檢測結果

3 討論

生豬在飼養、屠宰和運輸等過程中容易受到病原菌污染，部分病原菌甚至可感染人，如沙門氏菌和大腸桿菌等，這對消費者和生豬養殖、屠宰和銷售等相關人員健康造成巨大的威脅。沙門氏菌屬于重要食源性致病菌，該病原在豬場環境中廣泛分布。肥育豬感染沙門氏菌可處于隱性感染階段（不發病但可帶毒），在此類肥豬屠宰和售賣過程中，消費者和相關工作人員食用或接觸被沙門氏菌污染的肉類可能感染該病。

已有文獻表明，屠宰場來源豬肉沙門氏菌污染較為嚴重，甚至屠宰場環境樣品中也分布著沙門氏菌，這對食品衛生威脅較大[5-7]。為初步調查酒泉市肅州區屠宰場沙門氏菌污染情況，筆者從該地區2個屠宰場采集豬肉組織、環境樣品和器具樣品共210份進行沙門氏菌的分離與鑒定，并分析其血清型和耐藥性。結果發現該地區屠宰場來源樣品沙門氏菌檢出率為8.57%（18/210），其中小型屠宰場來源樣品檢出率（12.05%）較大型屠宰場檢出率（6.30%）高，這可能與小型屠宰場衛生環境較差、生豬收購來源不穩定和屠宰場工作人員疏于對食源性細菌疾病的防控等有關；進一步分析發現，屠宰場環境、器具和豬肉組織樣品沙門氏菌檢出率分別為14.28%（9/63）、4.76%（2/42）和6.67%（7/105），可見屠宰場應提高衛生管理水平，如定期對環境進行消殺，將屠宰器具反復清洗和消毒等。

在分離的18個沙門氏菌分離株中共檢測到5種血清型，其中鼠傷寒沙門氏菌（6株）、羅森沙門氏菌（4株）和倫敦型沙門氏菌（4株）較為常見，而鼠傷寒沙門氏菌屬于重要的人畜共患性病原，這也說明該地區屠宰場分布的部分沙門氏菌的確會對公共衛生造成威脅。耐藥性試驗結果發現，大部分菌株對阿莫西林、氨芐西林、大觀霉素和磺胺甲氧嘧啶等具有耐藥性，但對頭孢類藥物相對敏感，如頭孢他啶和頭孢唑林等，提示豬場對于該病的防治應提前對分離株進行耐藥性抗生素篩選，避免藥物濫用。