宮頸細胞DNA倍體定量分析聯合液基薄層細胞學檢查在宮頸癌早期篩查中的應用價值

周艷，陳曉西

上海市長寧區婦幼保健院婦產科，上海 200050

宮頸癌是目前較為常見的婦科惡性腫瘤，對女性的生命健康造成嚴重威脅。近年來宮頸癌的發病率明顯提高，且呈年輕化趨勢。宮頸癌病情發展是漸變式的連續過程，由宮頸上皮內瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）→浸潤癌逐步進展，早期宮頸癌無顯著的臨床癥狀，患者確診時病情已進一步發展。因此，加強早期宮頸癌的篩查是預防宮頸癌進展的有效手段[1-2]。在婦科疾病的臨床篩查中，宮頸液基細胞學的應用范圍與頻率均有所提升，尤其是在宮頸癌癌前病變篩查中，效果較為顯著。液基薄層細胞學檢查（thin-prep cytology test，TCT）是篩查宮頸癌的主要技術之一，但對于不能明確意義的非典型鱗狀上皮細胞等需在DNA水平上進一步分析確定[3-4]。本研究探討TCT聯合宮頸細胞DNA倍體定量分析在宮頸癌早期篩查中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2020年1月至2021年11月于上海市長寧區婦幼保健院接受早期宮頸癌篩查患者的病歷資料。納入標準：①無癥狀或存在宮頸病變臨床表現；②未合并其他器官嚴重病變；③意識清楚；④具備完整的診療資料。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②合并急危重癥；③無法耐受相關檢查；④既往有宮頸手術史。依據納入和排除標準，本研究共納入100例患者，年齡25～55歲，平均（32.25±4.25）歲。本研究經醫院倫理委員會審批通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢查方法

1.2.1 標本收集 按標準要求刷取并收集患者宮頸口以及宮頸管部位脫落上皮細胞，立即將其放入固定液，重復采集2次，制作細胞薄片，共2份，分別進行宮頸細胞DNA倍體定量分析和TCT。

1.2.2 宮頸細胞DNA倍體定量分析 選取制作完成的細胞薄片，應用全自動圖像分析系統進行定量分析。將DNA指數＞2.50的細胞判定為病變細胞。正常受試者：細胞薄片內以正常細胞為主，未觀察到病變細胞，或者疑似病變細胞及增生細胞比例＜5%；可疑受試者：觀察到1～2個病變細胞，或者疑似病變細胞及增生細胞比例為5%～10%；陽性患者：觀察到≥3個病變細胞，或者疑似病變細胞及增生細胞比例＞10%。正常和可疑受試者均判定為宮頸細胞DNA倍體定量分析結果陰性。

1.2.3 TCT 選取制作完成的宮頸細胞涂片并進行閱片，診斷結果包括無上皮內病變或惡性病變（negative for intraepithelial lesion or malignancy，NILM）、意義不明的非典型鱗狀細胞（atypical squamous cells of undetermined significance，ASCUS）、低度鱗狀上皮內病變（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）、高度鱗狀上皮內病變（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）、鱗狀細胞癌以及腺癌。ASC-US及以上病變為陽性結果。

1.2.4 陰道鏡活檢及病理檢查 所有患者均接受病理檢查，結果分為陰性（正常、宮頸炎性病變、CINⅠ級）、陽性（CINⅡ級、CINⅢ級、宮頸癌）。

1.3 觀察指標

對比宮頸細胞DNA倍體定量分析、TCT及病理檢查結果。分析宮頸細胞DNA倍體定量分析、TCT單獨及聯合檢查對早期宮頸癌的診斷價值。宮頸細胞DNA倍體定量分析聯合TCT診斷時，兩項結果均為陽性則判定為陽性。

1.4 統計學分析

采用SPSS 19.0軟件對數據進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 早期宮頸癌篩查結果

宮頸細胞DNA倍體定量分析的陽性率為30%（30/100），TCT的陽性率為32%（32/100），差異無統計學意義（P＞0.05）。

2.2 宮頸細胞DNA倍體定量分析、TCT單獨及聯合檢查對早期宮頸癌的診斷價值

宮頸細胞DNA倍體定量分析診斷早期宮頸癌的靈敏度為75.00%（12/16），特異度為78.57%（66/84）；TCT診斷早期宮頸癌的靈敏度為56.25%（9/16），特異度為72.62%（61/84）；兩種方式聯合診斷早期宮頸癌的靈敏度為93.75%（15/16），特異度為88.10%（74/84）。（表1～表3）

表1 宮頸細胞DNA倍體定量分析診斷早期宮頸癌與病理結果的對照

表2 TCT診斷早期宮頸癌與病理結果的對照

表3 宮頸細胞DNA倍體定量分析聯合TCT診斷早期宮頸癌與病理結果的對照

3 討論

早期宮頸癌缺乏特異性表現，且大眾缺乏準確認知，導致診斷難度較高，確診時病情發展迅速，錯過了最佳治療時機[5-6]。以往宮頸癌早期篩查多數選擇宮頸液基細胞學檢查，此技術可在基層開展，對宮頸癌進行大規模防控篩查。但長時間應用后發現，宮頸液基細胞學檢查中細胞丟失的可能性較高，且制片技術要求嚴格，因此其靈敏度并不理想[7-8]。宮頸細胞DNA倍體定量分析逐漸應用于宮頸癌的篩查，且效果較為理想，此種檢查方式是通過對細胞核內的DNA含量或染色體倍數進行檢測，評估細胞的整體生長狀態。細胞在增殖、生長的過程中均會出現DNA含量及結構的變化，因此可通過適合的技術評估細胞變化，若是出現DNA含量異常，則可明確機體組織出現病變[9]。因此，對細胞核內的DNA含量進行檢測有助于了解機體代謝狀態，并將其作為判定腫瘤的指標。目前宮頸癌早期篩查中，部分患者接受單一DNA含量分析，然而其效果并不顯著，需要聯合液基細胞學檢查，兩種篩查方式優勢互補，必要時還需進行陰道鏡檢查，最終獲得更加準確的結果，為患者后續診療提供依據[3,10]。

TCT是通過液基薄層細胞檢測系統對采集處理后的宮頸細胞進行診斷、分類，從而掌握患者病情的一種檢查方式，其有效提高了宮頸異常細胞的檢出率。TCT的操作較為簡單，不會造成較大創傷，相比于傳統檢查方式，無論是標本采集接受度，還是基層大面積篩查工作，均具備一定優勢，但也存在一定的不足，包括細胞易丟失、標本制片難度高以及工作量大等[11]。研究發現，TCT診斷高級別宮頸病變的靈敏度較低，細胞學檢查基于細胞形態學，其結果受臨床醫師經驗水平的影響，缺乏客觀判斷標準，存在較大的誤診可能性[12]。宮頸細胞DNA倍體定量分析需要通過計算機輔助進行自動化閱片，操作更加簡便、速度，也可避免TCT檢查的大量鑒別工作，在宮頸癌早期篩查中具有較高的應用價值。研究指出，正常狀態下人體細胞為二倍體，其細胞核內DNA倍體含量較為穩定，而病變組織增殖和生長后會導致細胞核內DNA含量明顯增加，因此對機體細胞核內DNA含量進行檢測，可以對細胞性質進行辨別，并確定是否有惡性增殖出現[13-14]。有學者認為，在宮頸癌發展過程中，病變組織DNA含量增加，異常染色體出現時間早于TCT細胞形態學的變化時間，但應用單一檢查在宮頸癌的早期診斷中價值有限[15]。本研究結果顯示，宮頸細胞DNA倍體定量分析的陽性率為30%，TCT的陽性率為32%。宮頸細胞DNA倍體定量分析診斷早期宮頸癌的靈敏度為75.00%，特異度為78.57%；TCT診斷早期宮頸癌的靈敏度為56.25%，特異度為72.62%；兩種方式聯合診斷早期宮頸癌的靈敏度為93.75%，特異度為88.10%。表明宮頸細胞DNA倍體定量分析及TCT聯合可發揮互補作用，有效提高早期宮頸癌的檢出率。相對于傳統檢測，TCT在取材、制作方面均具有一定改進，從而加強了宮頸癌、癌前病變的診斷準確率，但受不同閱片醫師的專業和經驗等因素影響，導致TCT結果可重復性較低，且存在假陽性的可能[16]。細胞DNA倍體定量分析系統可彌補TCT檢查的不足，兩者聯合篩查早期宮頸癌具有較高的應用價值。關于早期宮頸癌的篩查，細胞DNA倍體定量分析的準確度高于TCT檢查，這是因為細胞核DNA含量能夠反映腫瘤細胞的增殖能力，可通過檢測細胞核DNA含量對宮頸癌進行早期篩查[17-18]。

綜上所述，宮頸細胞DNA倍體定量分析聯合TCT診斷宮頸癌具有較高的靈敏度和特異度，可為宮頸癌的診療提供依據。