飼料中添加魚蛋白水解物對三疣梭子蟹仔蟹生長性能的影響

類成通

（日照市東港區漁業技術推廣站，山東日照 276800）

蛋白質在水生生物的生長發育中發揮著重要作用，水產飼料主要確定不同種類及同種水生生物不同發育階段的蛋白質及氨基酸的需求量及需求模式。魚蛋白水解物（FPH）是由魚粉經過蛋白酶水解后加工制得，其中含有大量的小分子肽及游離氨基酸。衛育良等研究表明，水解魚蛋白的適量添加能夠促進仔稚魚腸道上皮細胞的發育和成熟，提高氨基酸利用效率，并通過對膽囊收縮素、小肽轉運載體和胰蛋白酶活性的調節，來增加對蛋白質的消化和吸收，從而促進仔稚魚的生長和發育。相似的研究結果，也有金頭鯛（Sparus aurata）、大西洋鱈（Gadus morhua）等種類的仔稚魚的相關報道。目前有關三疣梭子蟹對蛋白質和必需氨基酸方面的研究報道相對較少?，F以三疣梭子蟹為研究對象，在飼料中添加魚蛋白水解物，探究其對三疣梭子蟹仔蟹生長、存活及體組成的影響，為三疣梭子蟹仔蟹培育、優質人工飼料的研制提供基礎數據。

1 材料與方法

1.1 地點、時間和材料

試驗地點位于浙江漁業科技島海水增養殖重點實驗室。試驗系統由小蟹籠和中型的水泥池（5 m×5 m×1 m）組成。試驗所用的三疣梭子蟹[（8.4±0.1）mg]來自浙江漁業科技島海水增養殖場。試驗時間為8 周。

1.2 試驗設計

將三疣梭子蟹仔蟹分為3 個處理組（對照組FH0、處理組FH5 和FH10），每組30 只三疣梭子蟹，分別投喂含有添加0%，5%和10%的魚蛋白水解物的微顆粒飼料，每種飼料設3 個重復組。

1.3 試驗飼料制備

試驗飼料為3 組等脂肪（10.00%）、等蛋白的半純化飼料。魚粉和蛋白水解物作為蛋白源，玉米淀粉作為糖源，魚油作為脂肪源。飼料組成（干質量）見表1。將各種原料粉按表1 配方，在孔徑為0.250 mm 的攪拌機中充分攪拌，再添加淀粉和適宜的水混勻至面團狀。通過雙螺桿擠出機（華南理工大學科技實業總廠，CD4XITS 型多功能成型機）分別擠出直徑為1.5 和2.5 mm 的顆粒飼料，經50 ℃負壓（0.097 mPa）干燥，破碎，過篩，于-20 ℃冰箱中備用。

表1 飼料組成（干質量） %

續表

1.4 試驗方法

在試驗開始前，將三疣梭子蟹放在試驗環境中養殖1 周，其間投喂三疣梭子蟹暫養飼料。在試驗開始前，挑選體格相近，身體健康的三疣梭子蟹稱質量并記錄，隨機分配到蟹籠中。每個蟹籠放一個梭子蟹，避免其自相殘殺。所有三疣梭子蟹每天09：30和16：30 各投喂1 次，投喂量大約占體質量的8%。每隔2 個星期稱體質量1 次，稱質量后的投喂量也隨體質量調整。整個試驗期間每天清理蟹籠，檢查蟹籠的完整性，防止逃跑；持續充氧，換水量為池水量的15%。每天記錄梭子蟹蛻殼的殼長和死亡數，水溫25～32℃，ρ（溶解氧）>7 mg/L，pH 值6.7～7.3，整個過程梭子蟹生長良好。試驗結束時，樣品采集前停止投喂24 h。統計塑料筐中的梭子蟹數量并稱質量，然后用液氮冷凍后于-80 ℃保存，待分析。

1.5 計算及統計方法

質量增加率（%）=（W-W/W×100；

成活率（%）=n/n×100；

特定生長率（%·d）=（1nW-lnW/t×100；

飼料轉化率（%）=Q/（W-W×100；

全蟹水分（%）=m/m。

式中：W——試驗末均質量，mg；

W——試驗初均質量，mg；

n——試驗驗初數量，只；

n——試驗驗初數量，只；

t——試驗時間，d；

Q——消耗的飼料量，mg；

m——樣品烘干前質量，mg；

m——樣品烘干恒重后的質量，mg。

試驗結果以飼料魚蛋白水解物為獨立變量進行回歸分析?；谌嗨笞有返馁|量增加率，運用SPSS 18.0（IBM.Chicago, USA）的統計方法中的二階多項式回歸模型，測定魚蛋白水解物水平，P<0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

不同水平魚蛋白水解物對三疣梭子蟹仔蟹生長，存活及體組成的影響見表2。

表2 不同水平魚蛋白水解物對三疣梭子蟹仔蟹生長，存活及體組成的影響①

由表2 可見，FH0 組三疣梭子蟹仔蟹質量增加率顯著高于其他2 個處理組（P<0.05），而FH5 組和FH10 組之間沒有差異（P>0.05）；同樣的FH0 組三疣梭子蟹仔蟹特定生長率顯著高于其他2 個處理組（P<0.05），而FH5 組和FH10 組之間特定生長率沒有差異（P>0.05）；3 個處理組之間比較得出三疣梭子蟹仔蟹存活率沒有顯著差異（P>0.05），而FH0 組和FH10明顯高于FH5 組。體組成檢測結果顯示，FH0 組三疣梭子蟹全蟹水分含量顯著低于其他2 個處理組（P<0.05），而FH5 組和FH10 組之間沒有差異（P>0.05）。

3 討論

水產動物幼體前期被發現消化酶活性不及成魚，對完整蛋白的利用能力不高。魚粉經蛋白酶水解后產生小分子肽以及游離氨基酸，有利于水產動物的消化吸收，并提高飼料的利用效率。文獻[4-5]研究發現，魚蛋白水解物的過量添加會導致仔稚魚生長受限。

本研究結果顯示，FH5 組和FH10 組三疣梭子蟹仔蟹的質量增加率以及特定生長率均顯著低于FH0組（P<0.05），說明三疣梭子蟹仔蟹無法及時吸收魚粉經水解產生的小分子肽及游離氨基酸，引起營養缺乏導致生長性能下降。FH0 組三疣梭子蟹全蟹水分含量顯著低于其他2 個處理組（P<0.05），表明飼料中魚蛋白水解物的添加不利于三疣梭子蟹仔蟹體內營養物質的積累。甲殼動物生長有蛻殼的過程，而體內物質的積累速度與蛻殼的頻率直接相關，因此魚蛋白水解物的添加不利于三疣梭子蟹仔蟹的生長。Zheng 等通過比較不同分子質量的魚蛋白水解物在微顆粒飼料中的應用，發現大分子質量的魚蛋白水解物更有利于大菱鲆（Scophthalmusmaximus）稚魚的生長及飼料利用。而通過大黃魚（Larimichthys crocea）稚魚的一項營養研究結果表明，相對于水解魚粉超濾保留物和未處理的魚蛋白水解物，經過超濾的魚蛋白水解物更易于消化吸收，并促進消化酶相關基因的表達。

本試驗中，FH0 組生長性能最好，表明三疣梭子蟹仔蟹的消化酶能較好地適應完整蛋白，而不是小分子肽及游離氨基酸。魚蛋白水解物的添加能影響仔稚魚體能生長因子（IGF-1）的表達量，從而影響其生長發育。Cai 等研究結果發現，由于分子質量的不同，魚蛋白水解物對消化酶的活性及其表達量具有很大的影響。這或許是魚蛋白水解物對仔稚魚生長發育以及消化吸收能力影響的主要原因。但在本研究中，添加魚蛋白水解物反而影響了三疣梭子蟹仔蟹的生長，或許是甲殼動物的酶系統與魚類有所不同，具有較強的消化完整蛋白的能力。

4 結論

試驗結果表明，飼料中魚蛋白水解物的添加不利于三疣梭子蟹仔蟹的生長發育，但對其存活沒有明顯的影響，魚蛋白水解物在三疣梭子蟹仔蟹的人工飼料中使用效率不高。