56 006例女性人乳頭瘤病毒流行特征分析

趙 昕，龔致平，游海波，彭必江，聶 珂，陶 鳳

1.重慶大學附屬三峽醫院檢驗科，重慶 404000;2.重慶市長壽區中醫院院辦公室，重慶 401220;3.重慶市長壽區人民醫院檢驗科，重慶 401220;4.重慶市長壽區中醫院檢驗科，重慶 401220

宮頸癌是女性中第四常見的癌癥，是世界范圍內的主要公共衛生問題之一[1]。據報道2018年全球約有570 000例新發宮頸癌患者，311 000例患者死于該疾病，其中中國有106 000例新發宮頸癌患者，死亡48 000例[2]，并且全球每年有100萬例新的生殖器疣患者確診[3]。目前，已鑒定出的人乳頭瘤病毒(HPV)亞型超過200種，其中感染生殖道的HPV根據其與宮頸癌及其癌前病變發展的相關性進一步分為高危型和低危型。HPV不同型別與宮頸癌及癌前病變的相關程度有明顯區別，且HPV型別眾多，各地區各型別的流行率存在很大的差異。因此，本研究旨在分析萬州地區女性中HPV流行特征及其變化趨勢，為該地區HPV的預防策略制訂及治療提供理論依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年3 月至2020 年11 月在重慶大學附屬三峽醫院進行HPV檢查的門診就診、體檢、住院女性共56 006例為研究對象，年齡14～89歲，根據其年齡不同分為10組：<21、21～<26、26～<31、31～<36、36～<41、41～<46、46～<51、51～<56、56～<61、≥61歲組。所有研究對象或家屬均簽署知情同意書。本研究得到重慶大學附屬三峽醫院醫學倫理委員會的批準。

1.2儀器與試劑 PCR擴增儀(型號：ETC811)購自北京東勝創新生物科技有限公司；全自動核酸分子雜交儀(型號：YN-H48)、HPV DNA 基因分型檢測試劑盒均由深圳亞能生物技術有限公司提供。試劑盒可檢測出23種主要HPV型別，17種高危型(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73 和HPV82)和6種低危型(HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV81和HPV83)。

1.3方法 女性宮頸脫落細胞標本在陰道鏡下進行采集，保存在細胞保存液中，于-20 ℃冰箱儲存。采用PCR-反向點雜交法進行HPV檢測。試劑準備、標本處理、DNA提取、PCR擴增、擴增產物的雜交及結果分析均嚴格按照試劑盒及儀器說明書進行。

1.4統計學處理 采用SPSS25.0統計軟件進行數據處理及統計分析。計數資料以例數或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1不同年齡組女性HPV感染情況 HPV檢出率為27.80%(15 569/56 006)，各年齡組檢出率和多重感染率比較，差異有統計學意義(χ2=345.10；P<0.001和χ2=231.55；P<0.001)。檢出率和多重感染率較高的有<21歲組(分別為43.78%和22.49%)、≥61歲組(分別為39.33%和16.82%)及56～<61歲組(分別為38.71%和13.29%)。41～<46歲組 HPV陽性構成比最高，為22.48%。不同年齡組女性HPV感染情況見表1。

表1 不同年齡組女性HPV感染情況

2.2HPV感染種數及高低危型HPV感染構成情況 HPV單一感染的患者占72.28%(11 254/15 569)；HPV多重感染的患者占27.72%(4 315/15 569)，其中以兩種HPV型感染為主，占19.87%(3 093/15 569)；高危型感染率為23.52%(13 171/56 006)，其中單純高危型感染占72.55%(11 296/15 569)，高低危型混合感染占12.04%(1 875/15 569)；低危型感染率為4.28%(2 398/56 006)。單一感染以高危型為主(79.88%，8 990/11 254)，多重感染以單純高危型感染和高低危型混合感染為主(96.89%，4 181/4 315)；HPV感染種數及高低危型感染構成情況見表2。

表2 HPV感染種數及高低危型HPV感染構成情況[n(%)]

續表2 HPV感染種數及高低危型HPV感染構成情況[n(%)]

2.3各型別HPV在不同年齡組女性中的檢出情況 各型別HPV在各年齡組的分布，除了HPV83型在56～<61歲組未被檢出外，其余22種HPV型別在所有年齡組中均有檢出。檢出率居前5位的高危型HPV依次為HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV51，分別為6.03%、4.78%、3.12%、3.01%、2.14%；檢出率居前3位的低危型HPV依次為HPV81、HPV43、HPV6，分別為3.02%、1.61%、1.26%。檢出率居前5位的HPV型別依次為HPV52、HPV16、HPV58、HPV81、HPV53，高低危型均有。各型別HPV在不同年齡組女性中的檢出情況見表3。

表3 各型別HPV在不同年齡組女性中的檢出情況(n)

3 討 論

HPV是由7 320 bp組成的無包膜雙鏈環狀DNA病毒，其感染具有種屬和組織特異性，是常見的性傳播病毒，而高危型HPV持續感染是引發宮頸癌的主要原因[2]，低危型HPV感染與生殖器疣和低度宮頸上皮內瘤變發生有關，所以HPV分型檢測是預防宮頸癌的關鍵手段之一。本研究首次對萬州地區56 006例女性的HPV流行特征進行分析，對萬州地區HPV檢測、預防策略制訂和進化特征的研究有促進作用。

HPV檢出率在不同地域和不同人群中差異較大，而本研究顯示萬州地區門診就診、體檢、住院的女性HPV檢出率為27.80%，與常規篩查女性相比，其HPV檢出率與剛果(28.2%)[4]接近，高于西班牙(8.3%)[5]，低于哈薩克斯坦(43.8%～55.8%)[6]；在中國，略高于四川(24.1%)[7]，明顯高于河南鄭州(12.09%)[8]、上海(18.98%)[9]、貴州遵義(16.95%)[3]等地區HPV檢出率，但低于江蘇泰州(34.58%)地區[10]；宮頸病變患者的HPV感染率明顯高于普通人群，且存在明顯的地區差異[11]。與有明顯宮頸病變女性相比，本研究中HPV檢出率低于河南省宮頸上皮內瘤變1級(CIN1)、CIN2/3、宮頸癌患者的HPV檢出率(分別為62.64%、86.91%、89.21%)[12]。總體而言本研究HPV檢出率介于國內外HPV檢出率范圍內，介于普通女性與宮頸有明顯病變女性之間，屬于正常范圍。而本研究的檢出率仍然提示了萬州地區女性存在較高的HPV感染風險。

全球宮頸癌的平均診斷年齡為53歲，死于宮頸癌的女性平均年齡為59歲[13]，從HPV感染到發展為宮頸癌，需要10～15年時間，同時，HPV是一種性傳播病毒，性活躍是HPV感染最重要的因素。國內外多項研究表明，HPV檢出率按年齡呈“雙峰”分布，且每個地區的雙峰年齡有差異[4,14]。本研究HPV檢出率顯示出兩個高峰，分別是<21歲(43.78%)和≥56歲(38.71%+39.33%)兩個年齡段；并且多重感染率在<21歲(22.49)和≥56歲(13.29%+16.82%)兩個年齡段也呈“雙峰”分布。第一個高峰可能與年輕女性性生活相對頻繁有關，第二個高峰可能與55歲以上女性絕經后，隨著年齡的增長，靠自身清除病毒的能力逐漸減弱，繼發HPV持續感染的機會越高有關。此外，本研究還發現HPV陽性構成比最高的年齡在41～<46歲(22.48%)，與中國最近的幾項研究類似[15-16]，雖然年齡是HPV自然轉歸的影響因素，但>45歲女性HPV感染后自然清除率低，持續感染率高，進展率也較高。雖然本研究結果提示HPV的整體防控重點應該放在<21歲和≥56歲女性中，但在患有婦科疾病的女性中，41～<46歲年齡段女性更應加強HPV的檢測。與單一感染的女性相比，涉及多種致癌類型HPV的多重感染女性發生CIN2、宮頸高級別鱗狀上皮內病變及以上病變(HSIL+)的風險明顯增加。雖然本研究中HPV感染以單一感染為主(72.28%)，但卻以高危型為主(79.88%)；HPV多重感染患者占27.72%，以兩種HPV型感染為主(19.87%)；在多重感染中，以單純高危型感染和高低危型混合感染為主(96.89%)。該研究表明本地區感染HPV患者中高危型HPV感染的人數比例較大，從而患HSIL+和CIN2/3的風險較大，所以更應該加強本地區HPV的檢測及預防工作。

研究顯示中國女性約98%的宮頸癌由高危型 HPV導致，其中高危型HPV16、HPV18可以導致約69%的宮頸癌，高危型HPV31、HPV33、HPV45、HPV52、HPV58可以導致約23%的宮頸癌，其他高危型HPV感染則可以導致約6%的宮頸癌，不同HPV型別導致宮頸癌的概率不同；而低危型如HPV6、HPV11則可能造成約90%的生殖器疣[16-17]。本研究顯示，除了HPV83型在56～<61歲組未被檢出外，其余22種HPV型別在所有年齡組中均有檢出，最常見的高危型是HPV52，其次是HPV16、HPV58、HPV53、HPV51，與國內相關研究基本一致[11,18]。 在本研究中HPV18檢出率在高危型HPV中僅排名第七，而HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV51、HPV68卻更常見，與其他地區不同[11]，提示HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV51、HPV68在本地區適應能力可能更強，在制訂診斷和預防措施時應加以考慮。世界范圍內HPV6和HPV11是最常見的低危型HPV，本研究發現最常見的低危型是HPV81，然后是HPV43、HPV6和HPV11。HPV81在HPV預防中并不是重要的型別，但是就本研究結果來看本地區對HPV81的重視程度需要提高。

本研究分析了萬州地區門診就診、體檢、住院女性中HPV的分布狀況，總體而言萬州地區HPV的分布特征大體上與國內外主流研究結果相似，但也存在一些差異，本地區HPV的檢測、預防策略及宮頸癌的篩查策略可能需要根據本地區HPV的流行特征進行制訂。