冠心病患者NLR及BMP4、ANGPLT8水平檢測(cè)的臨床意義

于艷華，謝文瑞

延安大學(xué)咸陽(yáng)醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西咸陽(yáng) 712000

冠心病是一類(lèi)由于冠狀動(dòng)脈出現(xiàn)粥樣硬化而導(dǎo)致血管狹窄、閉塞的心臟疾病，最終可由于心肌細(xì)胞缺血而發(fā)生缺氧、壞死導(dǎo)致心血管不良事件[1-2]，威脅人類(lèi)健康。世界衛(wèi)生組織發(fā)布數(shù)據(jù)表明，冠心病已成為全球范圍內(nèi)病死率最高的疾病。因此，如何早期診斷、早期治療及實(shí)施有效的預(yù)防措施對(duì)于降低冠心病病死率具有重要意義。近年來(lái)，臨床研究者們致力于尋找與冠心病發(fā)病相關(guān)的標(biāo)志物，以期通過(guò)檢測(cè)標(biāo)志物在機(jī)體內(nèi)的表達(dá)水平預(yù)測(cè)冠心病，并提出有效的防治措施。然而，目前常用的血清標(biāo)志物C反應(yīng)蛋白(CRP)、白細(xì)胞介素等雖在冠心病發(fā)病時(shí)表達(dá)水平升高，但對(duì)于冠心病的預(yù)測(cè)不具有特異性，故尋找特異性較強(qiáng)的血清標(biāo)志物對(duì)提高冠心病診療效果具有重要意義。本研究探討了中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值(NLR)、血清骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(BMP4)和血管生成素樣蛋白8(ANGPLT8)水平與冠心病的相關(guān)性，旨在為冠心病的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、病情預(yù)測(cè)等提供一定的參考，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年1月至2021年6月73例因胸痛于本院心血管內(nèi)科就診的冠心病患者納入冠心病組，其中男33例，女40例；平均年齡(52.26±7.45)歲。選擇同期主訴為胸痛于本院就診的116例疑似冠心病患者為對(duì)照組，其中男65例，女51例；平均年齡(51.59±6.78)歲。兩組患者性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)冠心病組患者有冠心病臨床癥狀和體征，且符合原衛(wèi)生部發(fā)布的《冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病診斷標(biāo)準(zhǔn)》[3]；(2)年齡35～75歲；(3)入院后行冠狀動(dòng)脈造影檢查；(4)臨床病歷資料記錄完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有先天性心臟病、高血壓心臟病、陳舊性心肌梗死、心力衰竭、心臟瓣膜病等心臟病史；(2)既往有支架介入手術(shù)史或冠狀動(dòng)脈搭橋手術(shù)史；(3)既往有腦卒中病史；(4)合并肝腎功能障礙、血液系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌疾病；(5)近期內(nèi)有急性感染史；(6)近期內(nèi)有抗血小板聚集類(lèi)藥物、抗凝藥物、非甾體類(lèi)抗炎藥物或他汀類(lèi)、貝特類(lèi)血脂調(diào)節(jié)藥物用藥史。

1.2方法 收集并記錄所有患者的一般資料，包括性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、吸煙史、飲酒史、糖尿病病史、高血壓病史及心血管疾病家族病史等，其中吸煙史標(biāo)準(zhǔn)為每日吸煙≥1支且連續(xù)吸煙超過(guò)1年，戒煙者戒煙時(shí)間不超過(guò)6個(gè)月仍記為有吸煙史；飲酒史標(biāo)準(zhǔn)為男性每周飲酒折合乙醇>140 g，女性每周>70 g；糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)為伴有糖尿病典型癥狀，包含多飲、多食、多尿和不明原因的體質(zhì)量下降，且隨機(jī)血糖水平≥11.1 mmol/L，或空腹血糖水平≥7.0 mmol/L，或餐后2 h血糖水平≥11.1 mmol/L，無(wú)糖尿病4項(xiàng)典型癥狀的患者需隔日復(fù)查血糖以確診；高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)為體循環(huán)動(dòng)脈血壓升高，未應(yīng)用任何降壓藥物時(shí)收縮壓≥140 mm Hg和(或)舒張壓≥90 mm Hg；心血管疾病家族病史以一級(jí)親屬患有心血管疾病為標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.1常規(guī)生化指標(biāo)檢測(cè) 檢測(cè)所有患者NLR、血脂四項(xiàng)[總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)]水平。

1.2.2BMP4和ANGPLT8檢測(cè) 取患者空腹肘靜脈血4 mL，以3 000 r/min離心10 min，取上清液低溫冷凍保存。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)BMP4和ANGPLT8水平，其中BMP4試劑盒購(gòu)自英國(guó)Abcam公司(批號(hào)ab231930)，ANGPLT8試劑盒購(gòu)自上海一研生物科技有限公司(批號(hào)EY4123)，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.3冠狀動(dòng)脈狹窄程度評(píng)估 對(duì)所有患者行冠狀動(dòng)脈造影檢查，由兩位具有高級(jí)職稱(chēng)的心血管主治醫(yī)師進(jìn)行共同閱片，并采用Gensini積分法評(píng)估冠狀動(dòng)脈病變程度，病變血管評(píng)分為所在病變部位的狹窄程度及所對(duì)應(yīng)的分?jǐn)?shù)與該段血管的權(quán)重系數(shù)之積，將各段血管評(píng)分相加即為該支血管評(píng)分，將各支血管評(píng)分相加即為該患者Gensini積分。其中病變血管狹窄程度評(píng)分中，無(wú)狹窄記為0分，狹窄程度≤25%記為1分，狹窄程度26%～50%記為2分，狹窄程度51%～75%記為4分，狹窄程度76%～90%記為8分，狹窄程度91%～99%記為16分，狹窄程度100%記為32分；病變血管部分權(quán)重系數(shù)中，左主干系數(shù)為5.0，左前降支近段系數(shù)為2.5，左前降支中段系數(shù)為1.5，左前降支遠(yuǎn)段系數(shù)為1.0，第一對(duì)角支系數(shù)為1.0，第二對(duì)角支系數(shù)為0.5，左回旋支近段系數(shù)為2.5，左回旋支中段系數(shù)為1.5，左回旋支遠(yuǎn)段系數(shù)為1.0，左回旋支后降支系數(shù)為1.0，左回旋支后側(cè)支系數(shù)為0.5，右冠狀動(dòng)脈近段、中段、遠(yuǎn)段、后降支系數(shù)均為1.0。根據(jù)Gensini積分對(duì)冠心病患者冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度進(jìn)行分級(jí)，其中Gensini積分<30分為輕度冠狀動(dòng)脈病變組，Gensini積分≥30分為重度冠狀動(dòng)脈病變組。根據(jù)不同血管病變支數(shù)將冠心病患者分為單支病變組、雙支病變組、三支病變組。

2 結(jié) 果

2.1冠心病組與對(duì)照組基線資料比較 冠心病組與對(duì)照組心血管疾病家族病史、TC、LDL-C比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；冠心病組BMI、NLR、TG、BMP4、ANGPLT8水平，有吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病病史的患者人數(shù)比例均明顯高于對(duì)照組，冠心病組HDL-C水平明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 冠心病與對(duì)照組基線資料比較

組別nTC(x±s,mmol/L)HDL-C(x±s,mmol/L)LDL-C(x±s,mmol/L)TG(x±s,mmol/L)BMP4(x±s,mg/L)ANGPLT8(x±s,pg/mL)Gensini積分(x±s,分)對(duì)照組1164.25±1.061.04±0.232.62±0.511.46±0.353.86±0.91566.49±97.58—冠心病組734.52±1.130.96±0.212.78±0.581.69±0.416.88±1.34818.05±136.2726.63±4.94χ2/t1.6622.4071.9914.11418.44914.765—P0.0980.0170.058<0.001<0.001<0.001—

2.2不同血管病變支數(shù)的冠心病患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 單支病變組、雙支病變組、三支病變組NLR、BMP4、ANGPLT8及Gensini積分比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。三支病變組NLR、BMP4、ANGPLT8和Gensini積分均明顯高于單支病變組和雙支病變組，雙支病變組NLR、BMP4、ANGPLT8和Gensini積分均明顯高于單支病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 不同血管病變支數(shù)的冠心病患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.3不同冠狀動(dòng)脈病變程度的冠心病患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 重度冠狀動(dòng)脈病變組NLR、BMP4、ANGPLT8水平均明顯高于輕度冠狀動(dòng)脈病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 不同冠狀動(dòng)脈病變程度的冠心病患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.4Logistic回歸分析冠心病發(fā)病的影響因素 以冠心病發(fā)病為因變量，將冠心病組和對(duì)照組比較中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)作為自變量進(jìn)行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示HDL-C降低，TG、NLR、BMP4、ANGPLT8升高是影響冠心病發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 Logistic回歸分析冠心病發(fā)病的影響因素

2.5Logistic回歸分析冠心病嚴(yán)重程度的影響因素 以是否為重度冠狀動(dòng)脈病變?yōu)橐蜃兞浚瑢LR、BMP4、ANGPLT8 作為自變量進(jìn)行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示NLR、BMP4、ANGPLT8升高是影響冠心病嚴(yán)重程度的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見(jiàn)表5。

表5 Logistic回歸分析冠心病嚴(yán)重程度的影響因素

3 討 論

冠心病是一類(lèi)與動(dòng)脈粥樣硬化具有高度相關(guān)性的疾病，而動(dòng)脈粥樣硬化是一類(lèi)炎癥性疾病，動(dòng)脈局部炎性反應(yīng)活躍狀態(tài)是影響動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程的重要標(biāo)志[4]。因此推測(cè)，與炎性反應(yīng)相關(guān)的細(xì)胞因子標(biāo)志物表達(dá)水平可能與冠心病的發(fā)生具有一定的聯(lián)系。本研究通過(guò)對(duì)73例冠心病患者(冠心病組)和116例疑似冠心病患者(對(duì)照組)進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)，冠心病組NLR水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，而Logistic回歸分析顯示，NLR每增加1，患者冠心病發(fā)病率可增加至1.163倍，提示中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞參與冠心病的發(fā)病進(jìn)程，也提示NLR對(duì)于冠心病發(fā)病的預(yù)測(cè)價(jià)值。本研究結(jié)果表明，NLR越高則冠心病發(fā)病率越高，其有可能的表現(xiàn)形式為中性粒細(xì)胞表達(dá)增加及淋巴細(xì)胞表達(dá)減少，其中中性粒細(xì)胞屬于吞噬細(xì)胞中的一種，對(duì)于抵御病原體入侵具有重要的作用[5-7]，同時(shí)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究也證實(shí)其在炎癥誘導(dǎo)和免疫應(yīng)答方面也具有重要作用[8]。中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞均參與機(jī)體的免疫反應(yīng)，中性粒細(xì)胞以非特異性免疫反應(yīng)為主，主要分泌氧自由基及彈性蛋白酶等炎性物質(zhì)，正常生理狀態(tài)下中性粒細(xì)胞壽命較短，但在炎性反應(yīng)刺激下可促進(jìn)中性粒細(xì)胞增殖分化，并導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂，進(jìn)一步加重了炎性反應(yīng)，故在冠心病患者機(jī)體內(nèi)表現(xiàn)為中性粒細(xì)胞數(shù)量增加；淋巴細(xì)胞代表了免疫系統(tǒng)的調(diào)控，動(dòng)脈血管病變的發(fā)生對(duì)于機(jī)體是一類(lèi)應(yīng)激信號(hào)，人體的下丘腦-垂體-腎上腺軸在應(yīng)激反應(yīng)的調(diào)控下激活分泌皮質(zhì)醇，而內(nèi)源性皮質(zhì)醇水平的升高可導(dǎo)致淋巴細(xì)胞表達(dá)減少，相應(yīng)的NLR在冠心病患者血清中水平升高。NLR最早用于評(píng)價(jià)機(jī)體的免疫炎癥狀態(tài)，近年來(lái)臨床研究發(fā)現(xiàn)NLR在預(yù)測(cè)冠心病和動(dòng)脈病變程度中有較好的應(yīng)用價(jià)值[9]。王媛等[10]研究報(bào)道，對(duì)247例冠心病患者行冠狀動(dòng)脈造影檢查，并進(jìn)行外周血血細(xì)胞計(jì)數(shù)，計(jì)算NLR并分析其診斷冠心病的受試者工作特征(ROC)曲線發(fā)現(xiàn)，NLR的ROC曲線下面積為0.761，當(dāng)cut-off值取2.28時(shí)，其診斷冠心病的靈敏度和特異度分別達(dá)到74.1%和63.5%，是預(yù)測(cè)冠心病的良好指標(biāo)。VERDOIA等[11]檢測(cè)了3 738例冠狀動(dòng)脈疾病患者的NLR水平，發(fā)現(xiàn)NLR與冠狀動(dòng)脈疾病發(fā)病率相關(guān)，且與多支血管病變和冠狀動(dòng)脈鈣化程度獨(dú)立相關(guān)，本研究結(jié)果也顯示，單支病變組、雙支病變組、三支病變組NLR比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中三支病變組NLR明顯高于單支病變組和雙支病變組(P<0.05)，雙支病變組NLR明顯高于單支病變組(P<0.05)，均提示NLR是冠心病發(fā)病和嚴(yán)重程度的有效預(yù)測(cè)因子。

BMP4是骨形態(tài)發(fā)生蛋白家族成員，可與異二聚體復(fù)合物絲氨酸/蘇氨酸酶受體結(jié)合并控制信號(hào)的傳遞過(guò)程。魏曉等[12]研究表明，大鼠主動(dòng)脈BMP4表達(dá)水平越高，經(jīng)茜素紅染色法顯示的動(dòng)脈血管鈣化程度也越高，提示BMP4參與冠狀動(dòng)脈疾病的發(fā)病過(guò)程。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為，BMP4可在冠狀動(dòng)脈血管鈣化部位表達(dá)進(jìn)而激活轉(zhuǎn)錄程序，促進(jìn)成軟骨基因及成骨樣基因的表達(dá)，加重血管鈣化程度并加快心血管疾病進(jìn)程[13]。

冠心病的發(fā)病與脂代謝紊亂有關(guān)，本研究結(jié)果顯示，TG升高，HDL-C降低均為影響冠心病發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。ANGPLT8是一類(lèi)分泌蛋白，主要在肝臟和脂肪組織中表達(dá)，也可在血漿中檢測(cè)到，WANG等[14]的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)報(bào)道，敲除ANGPLT8基因的小鼠體質(zhì)量增加速度相較于正常野生同窩小鼠慢，且血漿中TG水平與禁食動(dòng)物接近，提示ANGPLT8基因與TG的代謝有關(guān)。MYSORE等[15]的研究表明，ANGPLT8參與抑制機(jī)體循環(huán)中的脂肪分解過(guò)程及餐后脂肪的儲(chǔ)存，提示ANGPLT8水平與血脂水平相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)冠心病組HDL-C水平明顯低于對(duì)照組，而TG水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。由于ANGPLT8作為ANGPLT家族的非典型成員，其缺少C端的纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域，但與ANGPLT3和ANGPLT4基因結(jié)構(gòu)相似，可協(xié)同參與調(diào)節(jié)血脂代謝繼而影響動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程。

綜上所述，NLR、BMP4、ANGPLT8升高是冠心病發(fā)病和嚴(yán)重程度的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，NLR、BMP4、ANGPLT8檢測(cè)可能有助于冠心病早期診斷及病情預(yù)測(cè)。