雅士勇制劑對夏季公豬精液保存時間的影響

趙勤輝，黃文輝，郭承建

（意大利亞士可化工大藥廠，上海 201100）

引言

豬的繁殖性能受到環境、疾病、營養及管理等各方面的影響，其中環境的影響，尤其是夏季高溫高濕的影響巨大，并且已經有大量的研究報道，熱應激對公豬、母豬的繁殖和育肥豬的生長產生負面的影響。熱應激會造成公豬性欲下降，精液品質降低；后備母豬初情期延遲，初情率低；斷奶母豬發情率低，斷配間隔延長；哺乳母豬采食量下降，哺乳能力下降；育肥豬采食量下降，料重比升高，生長緩慢等問題。所以一到夏季，防暑降溫工作是豬場日常工作的重中之重。

左旋肉堿是由賴氨酸和蛋氨酸等組成的天然物質，在肝臟、腎臟中合成。動物能夠部分合成自己所需的左旋肉堿，但它的主要來源是日常攝入。左旋肉堿在脂質代謝中非常重要，它將長鏈脂肪酸帶入線粒體進行β氧化，從而產生正常精子功能所必需的能量（ATP）。左旋肉堿對生物體的解毒也非常重要，它可以清除線粒體乙酰輔酶A，過量的乙酰輔酶A對生物體是有害的。左旋肉堿還在抗氧化中發揮重要作用，因為它避免了由多不飽和脂肪酸過氧化引起的細胞膜氧化損傷。雄性生殖系統暴露于氧化應激下會導致精子損傷和線粒體完整性喪失。

在許多文獻中可以找到關于左旋肉堿對精子積極作用的信息，Jeulin等人的研究表明，肉堿在附睪液中的含量很高，附睪尾部中左旋肉堿的含量遠遠高于附睪頭部，并且隨著精子在附睪中的逐漸發育成熟，精子中左旋肉堿的水平也在逐步提高，附睪中左旋肉堿的水平與精子的成熟有密切的關系。Claudette等人的研究表明，附睪不同區域段精子活力與左旋肉堿的濃度存在明顯的正相關，左旋肉堿在精子的活化以及提升其運動性能中起到了重要作用。Yang等人的研究表明，在17℃常溫保存公豬精液時，添加左旋肉堿可有效維持公豬精子活力。在冷藏精液中，左旋肉堿對公豬精子質量的影響主要是通過提高精子質膜完整性，提升抗氧化能力和提高線粒體活性來實現的。呂艷秋等人的研究表明， 添加肉堿可以改善凍融豬精子的抗凋亡能力和精卵結合能力。

為研究左旋肉堿營養液“雅士勇”制劑對夏季公豬精液的保存時間，抗凋亡能力的影響，特開展此項研究。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

左旋肉堿營養液 “雅士勇”制劑由意大利亞士可化工大藥廠生產。

1.2 試驗動物

本試驗于2021年7—8月在廣東某現代化公豬站進行，選取30頭1～2歲長白公豬做研究，試驗組和對照組各15頭。試驗組在基礎日糧上，每天每頭公豬飼喂雅士勇30 mL，對照組飼喂基礎日糧。其他按正常的公豬站管理，采精頻率相同，每2周采精3次。連續飼喂45 d后采取每頭公豬的精液稀釋后做對比觀察，一直到第7天。

1.3 精液稀釋和評估

精液稀釋粉采用全能健Z，購自中國牧工商集團有限公司。稀釋后每劑精子規格定為80 mL，有效精子數30億。稀釋后在室溫下放置1 h后放入17℃儲藏，采用目測法，分別在稀釋后0 h、12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h、第7天（168 h）后，每份精液樣品采20 μL在38℃恒溫加 熱 板 回溫2 min，之后在16×10倍顯微鏡下觀察精子的活力，對照組和試驗組的精子評分由同一人、同一標準進行盲評。所有精液每12 h輕輕搖勻并翻轉1次。

1.4 數據分析

數據采用Excel（2010）軟件進行整理，利用GraphPad Prism 5軟件進行統計分析，進行單因素方差分析。精子活力是指直線運動精子所占百分率，100%為1分，90%為0.9分，以此類推；精子存活率是指各時間點精子活力/稀釋后0 h精子活力×100%。

2 結果

2.1 雅士勇制劑對不同儲存時間下精子活力的影響

雅士勇制劑對不同儲存時間下精子活力的影響見圖1。

從圖1可以看出，雅士勇制劑組在各個時間點精子活力都優于對照組，在稀釋后0 h、12 h、60 h后兩組之間精子活力差異顯著（P＜0.05），稀釋后24 h、36 h、48 h后兩組之間精子活力差異極顯著（P＜0.01）。試驗組到第7天精液活力還高于0.6，符合配種標準。

圖1 雅士勇對不同儲存時間下精子活力的影響

2.2 雅士勇制劑對不同儲存時間下精子存活率的影響

雅士勇制劑對不同存儲時間下精子存活率的影響見表1。

從表1可以看出，雅士勇組各個時間點的精子存活率均優于對照組，其中稀釋后36 h、48 h精子存活率差異顯著。說明雅士勇組相比對照組在48 h內精子細胞凋亡較慢，精子細胞抗逆性強于對照組。

表1 雅士勇對不同存儲時間下精子存活率的影響 %

3 討論

夏季公豬精液質量差是當前豬場普遍面臨的一個問題。公豬的理想環境溫度是18～20℃，超過27℃，公豬的體溫和呼吸頻率顯著增加，精子畸形率增加。McNitt等人的研究表明，將公豬飼養在33℃、50%濕度的環境下72 h，精子畸形率急劇上升。Suriyasomboon等人的研究表明，將杜洛克公豬飼養在濕度大于75%、溫度持續26～29℃超過4周或以上，公豬精子畸形率顯著提高。所以，如何在夏季做好防暑降溫工作是公豬飼養管理的重點工作。從一年四季上看，夏秋季公豬精液對冷藏保存更加敏感、抗逆性差。

目前豬場的主要通風降溫方式有空調、風機、水簾、噴霧等。在炎熱的夏季，常規的通風降溫系統因受制于風機可靠性、空氣濕度、水簾水的供應壓力、水簾墻通風率、成本因素等一些客觀因素的影響，降溫效果不理想，所以，公豬熱應激還是非常普遍，經常出現因熱應激而導致的精液品質下降問題。

當前豬集中供精站蔚然成風，行業內有一些優秀的商品化供精站。從母豬場的角度來看，外購豬精最擔心的是經過物流、顛簸、檢測、消毒、備貨等環節或原因，豬精到使用的時候精子活力指標能不能達標的問題，如不能達標，則影響豬場正常的生產工作。

雅士勇制劑含左旋肉堿、氨基酸、維生素、山梨糖醇等多種成分，可以提升精子細胞對脂肪酸的利用，增加精子細胞活力，增加公豬食欲和性欲，促進激素的合成，增加豬只抗逆性，通腎利尿。從本次研究來看，該公豬站通風降溫系統設備先進，熱應激不是很嚴重，但雅士勇制劑還是可以極顯著提升稀釋后24～48 h精子活力，顯著提升稀釋后24～36 h精子的存活率。出現以上現象的機制可能是雅士勇制劑中含有的左旋肉堿等成分促進精子細胞脂肪酸的利用，清除線粒體乙酰輔酶A，抗氧化，提高精子質膜完整性和線粒體活性等綜合因素作用的結果。在豬場實際配種生產中，使用稀釋后48 h內的精液進行配種的比例很高。這個研究為解決夏季公豬精液活力低，畸形率高，保存時間短提供了一個很好的參考。

4 結論

在夏季，公豬連續飼喂45 d左旋肉堿營養液雅士勇制劑后可延長公豬精液的保存時間，提升精子細胞的抗凋亡能力。