下調lncRNA-MALAT1表達對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的保護作用

樊帥帥 宋磊軍 藺 聰 劉 揚

新生兒缺氧缺血性腦損傷（hypoxic-ischaemic brain damage,HIBD）是臨床常見病，預后較差。研究發現，lncRNA肺腺癌轉移相關轉錄子1（metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1，lncRNA-MALAT1）下調明顯促進小鼠缺血性腦卒中后血管新生[1]。腦源性神經營養因子（brainderived neurotrophic factor，BDNF）及其受體原肌球蛋白相關激酶B（tropomyosin-related kinase B，TrkB）信號通路與神經細胞生長、凋亡密切相關，且該通路已被證實參與HIBD的調控[2]。本研究抑制lncRNAMALAT1表達新生大鼠HIBD模型的影響及其作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組SPF級7 d齡SD大鼠40只（雌雄各半，體質量在12～16 g），購自鄭州大學實驗動物中心[許可證號SCXK（豫）20180001，倫理批號IACUC20190525001]。將大鼠隨機分為假手術組、模型組、lncRNA對照組、silncMALAT1組，每組10只。

1.2 模型制作 以Rice-Vannucci法建立新生大鼠HIBD模型[3]。吸入2%七氟醚維持麻醉，永久結扎左側頸總動脈（假手術組僅穿線不結扎），蘇醒后繼續喂養2 h，置于有機玻璃缺氧箱，持續輸入含8%O2、92%N2的混合氣體，缺氧2 h，觀察大鼠行為，出現夾尾、尖叫、自發左轉圈，則建模成功。模型組造模失敗2只，lncRNA組失敗2只，silncMALAT1組失敗1只，最終35只大鼠納入研究：假手術組10只，模型組8只，lncRNA對照組8只，silncMALAT1組9只。

1.3 給藥方法 建模成功后2 h，2%七氟醚麻醉，大鼠腦立體定位儀標記左側側腦室[4]。lncRNA對照組、silncMALAT1組緩慢推注空載體重組腺病毒、silnc-MALAT1各5μl（病毒滴度為2.5 ×1013pfu/L，上海吉瑪制藥技術有限公司提供）。假手術組、模型組推注5μl生理鹽水。停針1 min后緩慢退針，骨臘封閉。

1.4 Morris水迷宮試驗評估空間學習和記憶能力[5]造模后7 d進行1次適應性訓練，造模后8～11 d進行定位巡航試驗，記錄90 s內登陸安全平臺的時間即為逃避潛伏期，若90 s內未找到則引導至安全平臺，停留30 s，記錄為90 s?！?br>