乙肝病毒感染血清標志物的免疫檢驗方法對比研究

姚 輝 張 靜

(1 山東省濟南市第二人民醫院/檢驗科 山東 濟南 250021 2 山東省運動康復研究中心檢驗科 山東 濟南 250102)

乙肝病毒是乙型病毒性肝炎的病原體，還可導致肝硬化、肝癌等疾病，是現代人健康的重要威脅之一[1]。乙肝病毒對比一般病毒具有潛伏期長、病程長、發病緩慢，以及患者發病后期并發癥多等特點，并且乙肝病毒的傳播途徑廣、傳染性強，對此在乙肝病毒感染早期加強診斷，盡早進行處理和治療，對于改善患者預后，提高患者生活質量，具有重要的意義[2]。免疫檢查是臨床診斷乙型病毒感染的常規方法，一般有兩種方法即電化學發光法和酶聯免疫吸附法，兩種方法各具優勢，診斷效果具有明顯差異[3]。本文即擇選2018年2月至2021年9月我院收治的80例乙肝病毒感染患者為研究對象，就不同免疫檢驗方法在乙肝病毒感染血清標志物中的檢驗效果進行了分組對比研究，現作如下匯報：

1 資料與方法

1.1 一般資料

擇取我院2018年2月至2021年9月收治的乙肝病毒感染患者80例為研究對象，獲取其血液標本。80例患者中，男性43例，女性37例，年齡38～67歲，均值(51.14±12.06)歲。

納入標準：①80例患者均經臨床診斷和實驗室診斷確診為乙肝病毒感染患者；②患者基本資料完整；③患者了解本組研究全部內容，并在知情同意書上簽字。

排除標準：①排除合并心肺等臟器嚴重功能障礙患者；②排除資料不全者；③排除精神異常、意識不清者；④排除合并其他傳染病，或惡性腫瘤患者。

1.2 方法

標本采集，患者在術前和輸血前分別抽取靜脈血，血樣取肘靜脈血，體積為5.0ml，給予離心處理后，收集血清標本。血清標本共兩份，一份用于丙型肝炎RNA檢測，一份在-20℃條件保存，用于乙肝肝炎抗體和乙肝肝炎核心抗原檢測。

電化學發光法，使用全自動免疫分析儀進行檢測，試劑選擇原裝配套試劑。取患者外靜脈血標本，給予離心處理，3000轉/min，離心10min，取上層血清進行檢驗，各項檢驗操作嚴格遵守相關規定進行。如樣本A值與標準值對比高出，則表明為陽性。

酶聯免疫吸附法，使用全自動酶標分析儀完成檢驗，使用原裝配套試劑。取患者外靜脈血標本，給予離心處理，3000轉/min，離心10min，取上層血清進行檢驗，各項檢驗操作嚴格遵守相關規定進行。如樣本A值與臨界值對比高出，則表明為陽性。

80例患者均接受電化學發光法和酶聯免疫吸附法檢驗，兩組結果分別進行對比。

1.3 觀察指標

分別就兩組檢查結果進行對比，檢測血清標志物，包括HBeAg、HBsAg、HBeAb、HBcAb、HBsAb，計算診斷準確率和陽性率。

1.4 統計學方法

2 結果

兩組診斷準確率對比結果，見表1，差異有統計學意義(P<0.05)。

表1 兩組診斷準確率對比表(n，%)

兩組血清標志物陽性率對比結果，見表2，統計學有差異(P<0.05)。

表2 兩組血清標志物陽性率對比表(n，%)

3 討論

乙型肝炎病毒是一種嗜肝DNA病毒科病毒，是乙型肝炎的病原體，包含正嗜肝DNA病毒屬和禽嗜肝DNA病毒屬兩個屬，前者可以引起人體感染。乙肝病毒感染是全球性的重大公共衛生問題，近幾年隨著醫療事業不斷發展，以及乙肝疫苗的普及，乙肝病毒感染率已經有下降的趨勢，但由于乙肝病毒的傳染途徑豐富、傳染面廣，乙肝仍是現代人健康的重要威脅[4]。乙型肝炎是乙型肝炎病毒導致的病毒性肝炎，一般分為急性、慢性兩類，臨床提到的乙肝主要是指慢性乙型肝炎。慢性乙型肝炎具體是指乙型肝炎病毒感染持續時間6個月以上，且肝臟已經出現炎癥壞死，或肝纖維化病變的慢性疾病[5]。乙型肝炎病毒的流行是世界性流行，不同國家、不同地區的流行強度存在很大差異，根據世界衛生組織相關數據，全球慢性乙型肝炎患者接近3億，其中進70%的患者處于非洲和西太平洋地區，每年超過88萬人因乙型肝炎死亡。我國近幾年醫療事業發展迅速，乙肝疫苗普及良好，據中國疾病預防控制中心相關數據，在1～4歲、5～14歲、15～29歲人群中，目前乙肝的發病率已經對比1992年下降了30.2倍、11.5倍和2.2倍。乙型肝炎在國內的流星率約為5.0%～6.0%，我國慢性乙肝患者超過2000萬例[6]。總的來說，我國仍存在較高的乙肝風險，加強乙肝的早期診斷，提高早期診斷準確率，對于保障感染患者健康安全，改善預后，具有積極的作用和意義。

乙肝病毒感染是慢性乙型肝炎的根本病因，乙肝病毒具有對低溫、高溫、干燥、紫外線、一般濃度消毒劑的良好耐受能力，抵抗力強，可通過血液、母嬰、性接觸、皮膚黏膜等途徑傳播，乙型肝炎患者和乙肝病毒攜帶者是乙型肝炎的主要傳染源[7]。乙肝病毒不會通過消化道和呼吸道傳播，一些吸血昆蟲，如蚊子、臭蟲等也基本不會傳播乙肝病毒。血液、體液傳播是乙肝病毒的主要傳播渠道，如果受污染的血液或體液進入健康人體內，及時劑量極少，也會導致乙肝病毒感染。近幾年，我國在獻血員管理方面采取了諸多有效措施，通過嚴格篩查，血液傳播導致的乙肝病毒感染已經明顯減少，但血液傳播以及風險注射仍是乙肝病毒傳播的主要途徑。母嬰傳播是血液傳播外第二大傳播途徑，包括宮內感染、圍生期傳播、分娩后傳播等。從癥狀來看，慢性乙型肝炎患者在發病早期各項癥狀并不明顯，一般以頭暈、乏力、食欲減退為主，隨著癥狀的加重，患者可能出現蜘蛛痣、肝掌、肝脾重大等癥狀，如病情進一步惡化，還會出現失代償期肝硬化、肝功能嚴重損害等癥狀。具體來說，乙型肝炎在輕度階段，癥狀一般較輕，且不具有典型性，常見癥狀包括食欲減退、乏力、頭暈、尿黃、肝區不適等，部分患者會有失眠、睡眠質量下降、肝區輕微觸痛等癥狀。如果癥狀發展至重度階段，患者則會有明顯的肝炎癥狀，包括食欲減退、乏力、尿黃、腹脹、稀便等。面容會有臉色發黑、面色暗沉、皮膚干燥粗糙、嚴重者還會有古銅色表現。肝掌，患者手掌會有明顯變大表現，存在紅色斑點，按壓后會變白。蜘蛛痣，中心為紅色，周邊會有放射性狀的毛細血管癥狀，整體形狀與蜘蛛類似[8]。鑒于乙型肝炎的危害性和危險性，在乙型肝炎早期加強診斷對于疾病控制具有積極的意義，但由于乙型肝炎早期癥狀不明顯，其臨床診斷也存在著一定的困難。

乙肝病毒血清標志物與機體免疫反應之間有著密切的聯系。HBsAg是乙肝病毒外殼蛋白，不具備傳染性，如患者感染乙肝病毒，則HBsAg水平明顯升高，因此該指標也常用于乙肝病毒感染的診斷[9]。HBsAg會在患者感染乙肝病毒后2周內出現，一般在6個月內會有明顯的升高表現，多數患者會有持續的陽性狀態。受HBsAg升高影響，HBsAb水平也會明顯升高，該物質可與HBsAg相結合，通過一系列免疫過程清除乙肝病毒，進而完成對乙肝病毒感染的控制。HBsAb是一種中和抗體，其水平高低可以評估機體感染乙肝病毒后的免疫情況，如HBsAb水平升高，證明機體受乙肝病毒感染后免疫力存在，血清HBsAg轉陰后約兩周可以檢出。HBeAg是乙肝病毒核心顆粒可溶性蛋白質，存在于HBcAg內，后者在裂解后，HBeAg可以融入血清內。HBeAg也是乙肝病毒感染的重要評判標準，其檢測結果為陽性，則正在此時的傳染性強，是乙肝病毒的活躍期。HBeAg證明乙肝病毒的復制已經處于相對靜止狀態，傳染性降至較低水平，病情得到一定控制。HBcAb是肝細胞在乙型肝炎核心抗原刺激作用下產生的免疫球蛋白，與乙肝病毒復制活躍度正相關，無保護機體的作用，水平升高則表明病毒傳染性增強[10]。通過以上分析可知，乙肝病毒血清標志物與乙肝病毒感染關系密切，由此可了解機體感染和免疫情況。

現階段，血清標志物的臨床檢測和診斷主要采用電化學發光法和酶聯免疫吸附法兩種方法。酶聯免疫吸附法又稱酶標抗體法，是借助酶對抗原和抗體進行標注，并實施檢測的一種免疫學標記技術。促使目標抗體或抗原與固相載體表面結合，保留其免疫活性，以酶活性作為目標抗體的檢測信號，是酶聯免疫吸附法的基本操作原理。這種技術的優勢在于靈敏度高、特異性好，檢測速度快，在大批量樣本檢測應用中有著優異表現。電化學發光法是分子發光光譜分析法的一種，是借助化學檢測體系包含的待測物濃度，與體系化學發光強度在某種條件下呈現線性定量關系理論，通過儀器對待測物含量進行測定的痕量分析方法。與酶聯免疫吸附法相比，電化學發光法更為先進，在臨床檢驗準確率方面更具有優勢，并且具有自動重復、自動稀釋等優勢技術，可在提高檢測準確率的基礎上，縮短檢測時間。

本組研究結果顯示，診斷準確率方面，研究組準確率高達92.5%，而對照組僅有72.5%，差異有統計學意義(P<0.05)。研究組在HBeAg陽性率、HBsAg陽性率和HBeAb陽性率方面高于對照組，差異統計學有意義P<0.05，而在HBcAb陽性率和HBsAb陽性率方面兩組差異無統計學意義P>0.05。

4 結語：

乙肝病毒感染免疫檢驗中，電化學發光法對比酶聯免疫吸附法具有更高的準確率，HBeAg陽性率、HBsAg陽性率和HBeAb陽性率明顯優于后者，值得臨床推廣和應用。