離子色譜法測定復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散中氯離子及硫酸根

胡小燕，周娜，薛允寧

離子色譜法測定復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散中氯離子及硫酸根

胡小燕，周娜，薛允寧

（沈陽新馬藥業(yè)有限公司，遼寧 沈陽 110102）

建立復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散中氯離子和硫酸根的離子色譜測定方法。色譜柱：Dionex IonPac AS11-HC陰離子分析柱（4 mm ×250 mm，4 μm），淋洗液：KOH，流速：1.0 mL·min-1，進(jìn)樣量：10 μL，檢測器：電導(dǎo)檢測器，抑制器：Dionex AERS 500（4 mm），抑制電流：50 mA。經(jīng)驗(yàn)證，該方法專屬性、線性、重復(fù)性、準(zhǔn)確度、耐用性均良好。該方法適用于聚乙二醇電解質(zhì)散劑中氯離子和硫酸根的檢測。

離子色譜法；復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散；氯離子；硫酸根

復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散用于大腸內(nèi)窺鏡檢查和大腸手術(shù)前處置時的腸道內(nèi)容物的清除[1-5]。本品為復(fù)方制劑，其組成為聚乙二醇4000、無水硫酸鈉、氯化鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉。聚乙二醇4000為長鏈線性聚合物，口服后幾乎不吸收，不分解，以氫鍵結(jié)合水分子，有效增加腸道體液成分，刺激腸蠕動，引起水樣腹瀉，達(dá)到清洗腸管的目的。處方中無機(jī)鹽成分與服用的適量水分，保證了腸道與體液之間的水、電解質(zhì)交換平衡。該品種的原研藥品為1999年1月法國IPSEN PHARMA公司的FORTRANS，規(guī)格73.690 g（含聚乙二醇64.0 g）。目前，已進(jìn)口到國內(nèi)，商品名福靜清。

該藥品為進(jìn)口藥品，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)未收載在中國藥典中，可參考的僅為進(jìn)口藥品注冊標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)號JX20170220）。該標(biāo)準(zhǔn)中氯化物的含量測定采用滴定法，熒光黃作指示液，用硝酸銀滴定液滴定，由于滴定過程中生成的氯化銀沉淀為白色帶有乳光的膠裝物質(zhì)，對背景顏色有干擾，影響滴定終點(diǎn)的判斷；硫酸鈉含量測定采用重量法，先將藥品溶解后，加入化學(xué)沉淀試劑生成沉淀，洗滌后在850～900 ℃熾灼至恒重，計(jì)算后即得，該檢測方法操作繁瑣耗時，操作不當(dāng)引入誤差較大。本文參考文獻(xiàn)方法[6-8]，采用離子色譜法檢測該藥品中氯離子和硫酸根含量，離子色譜法具有選擇性強(qiáng)、穩(wěn)定性高、操作方便快速等特點(diǎn)[9]。因此本文作者采用離子色譜法測定復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散中的氯離子和硫酸根。經(jīng)規(guī)范的方法驗(yàn)證[10-12]，本法適合復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散中氯離子和硫酸根的測定。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器

BP211D型電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；DIONEX ICS-900離子色譜儀；Dionex IonPac AS11-HC，陰離子分析柱（4 mm×250 mm，4 μm）；Dionex AERS 500（4 mm）陰離子抑制器，Chromeleon7 色譜工作站。

1.2 試劑

復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散（批號：M22564、P05573、P22816，BEAUFOUR IPSEN Industrie）。

聚乙二醇4000（原料藥，遼寧奧克醫(yī)藥輔料股份有限公司）；氯化鈉（藥用輔料，天津海光藥業(yè)股份有限公司）；氯化鉀（藥用輔料，天津海光藥業(yè)股份有限公司）；碳酸氫鈉（藥用輔料，南昌白云藥業(yè)有限公司）；硫酸鈉（藥用輔料，江蘇省勤奮藥業(yè)有限公司）。

氯化鈉對照品（100376-201703，中國食品藥品檢定研究院）；硫酸鈉對照品（20200302，百靈威科技有限公司）。

氫氧化鉀淋洗液（DIONEX，EGC Ⅲ KOH，Eluent Generator Cartridge）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜條件：采用Dionex IonPac AS11-HC，陰離子分析柱（4 mm×250 mm，4 μm）；以水和KOH淋洗液為流動相，20 mmol等度洗脫；流速為每分鐘1.0 mL；電導(dǎo)檢測器；抑制器：Dionex AERS 500（4 mm），抑制電流：50 mA，進(jìn)樣體積為10μL。

2.2 溶液的制備

空白溶液：超純水。

氯化鈉儲備液：精密稱取氯化鈉適量，加水溶解并稀釋制成每1 mL中約含氯化鈉30μg的溶液，即得。

硫酸鈉儲備液：精密稱取硫酸鈉適量，加水溶解并稀釋制成每1 mL中約含硫酸鈉80μg的溶液，即得。

碳酸氫鈉儲備液：精密稱取碳酸氫鈉適量，加水溶解并稀釋制成每1 mL中約含碳酸氫鈉20μg的溶液，即得。

聚乙二醇4000儲備液：精密稱取聚乙二醇4000適量，加水溶液并稀釋制成每1 mL中約聚乙二醇4000 800μg的溶液，即得。

硫酸根陰性溶液：取氯化鈉儲備液10 mL，碳酸氫鈉儲備液10 mL，聚乙二醇4000儲備液10 mL，置同一量瓶中，加水稀釋并定容至100 mL，即得。

氯離子陰性溶液：取碳酸氫鈉儲備液10 mL，硫酸根儲備液10 mL，聚乙二醇4000儲備液10 mL，置同一量瓶中，加水稀釋并定容至100 mL，即得。

氯化鈉對照品溶液：精密稱取氯化鈉對照品，加水溶解并稀釋制成每1 mL中約含氯化鈉100μg的溶液，作為氯化鈉對照品儲備液，取1 mL，加水稀釋至10 mL，即得。

硫酸鈉對照品溶液：精密稱取硫酸鈉對照品，加水溶解并稀釋制成每1 mL中約含硫酸鈉100μg的溶液，取1 mL，加水稀釋至10 mL，即得。

混合對照品溶液：分別取氯化鈉儲備液5 mL，硫酸鈉儲備液5 mL，置同一量瓶中，加水稀釋并定容至50 mL，即得。

供試品溶液：取本品3袋內(nèi)容物，精密稱定，置200 mL量瓶中，加水適量，超聲使溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，取5 mL置預(yù)先用甲醇活化處理的SPE-C18固相萃取柱中，用水沖洗20 mL后，定容至50量瓶中，即得。

2.3 專屬性考察

分別取空白溶液、氯化鈉對照品溶液、硫酸鈉對照品溶液、混合對照品溶液、硫酸根陰性溶液、氯離子陰性溶液、供試品溶液，按“2.1”色譜條件分別進(jìn)樣分析，記錄色譜圖，空白溶劑、陰性溶液及供試品溶液均不干擾氯離子和硫酸根檢測，此法專屬性良好，典型色譜圖見圖1。

2.4 線性關(guān)系考察

氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密稱量氯化鈉對照品適量，用水制成含氯化鈉質(zhì)量濃度分別為5.02、8.032、10.04、12.048、15.06 μg·mL-1的溶液，按照“2.1”色譜條件進(jìn)樣檢測，記錄色譜圖。以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：=0.079 6-0.064 6（=0.999）。氯化鈉在5.02 ～15.06 μg·mL-1質(zhì)量濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

硫酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密稱量硫酸鈉對照品適量，用水制成含硫酸鈉質(zhì)量濃度分別為4.994、7.990 4、9.988、11.985 6、14.982 μg·mL-1的溶液，按照“2.1”色譜條件進(jìn)樣檢測，記錄色譜圖。以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：=0.041 1- 0.029 5（=0.999）。硫酸根在4.994 ～14.982 μg·mL-1濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度考察

取供試品溶液，按照“2.1”色譜條件進(jìn)樣檢測，記錄色譜圖。平行配制6份，計(jì)算氯離子及硫酸根含量的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，分別為0.6%、0.3%。以上結(jié)果均符合方法驗(yàn)證要求，方法精密度良好。

2.6 準(zhǔn)確度考察

取“2.2”項(xiàng)下聚乙二醇4000儲備液5 mL，分別加入氯化鈉對照品儲備液4 mL、硫酸鈉對照品儲備液4 mL，加水定容至50 mL，制備含氯化鈉、硫酸鈉分別為80%的回收率用供試品溶液，以此類推，制備含氯化鈉、硫酸鈉分別為100%、120%的回收率用供試品溶液，按照“2.1”色譜條件進(jìn)樣檢測，記錄色譜圖。計(jì)算氯離子回收率為99.37%～ 101.93%，RSD%為1.3%；硫酸根回收率為98.66%～ 102.16%，RSD%為2.0%。以上結(jié)果均符合方法驗(yàn)證要求，方法準(zhǔn)確度良好。

2.7 穩(wěn)定性考察

取“2.2”項(xiàng)下供試品溶液及混合對照品溶液，按照“2.1”色譜條件進(jìn)樣檢測，分別在0、2、4、6 h測定各峰峰面積。混合對照品中氯離子、硫酸根峰面積的RSD分別為0.7%、0.4%；供試品溶液中氯離子、硫酸根峰面積的RSD分別為1.3%、0.9%。以上結(jié)果均符合方法驗(yàn)證要求，對照品溶液及供試品溶液室溫6 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 樣品中氯離子及硫酸根檢測

按照“2.2”項(xiàng)下方法配制供試品溶液與對照溶液，按照“2.1”色譜條件進(jìn)樣檢測，記錄色譜圖，計(jì)算原研藥品供試品溶液中氯離子及硫酸根含量。結(jié)果見表1。

表1 原研藥品中氯離子及硫酸根含量

3 討論

本品樣品中含有的聚乙二醇4000為高分子物質(zhì)，不能直接進(jìn)樣離子色譜柱，需要建立樣品處理方法將樣品中聚乙二醇4000除掉，采用SPE固相萃取小柱富集樣品中聚乙二醇4000，考察了洗脫溶劑，洗脫體積，上樣濃度等，建立了樣品處理方法為：甲醇活化處理SPE小柱，取樣品溶液5 mL，上樣后用20 mL水洗脫至50 mL量瓶中，定容即得。

4 結(jié) 論

本文建立了離子色譜法檢測復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散中氯離子和硫酸根含量的方法，3批原研藥品中氯離子及硫酸根含量與處方量基本吻合。該方法經(jīng)驗(yàn)證，專屬性、線性、精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性均良好，本方法適用于復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散中氯離子及硫酸根的檢測，替代了原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的化學(xué)滴定法和化學(xué)沉淀法。

［1］黃惠娟，江林澤. 聚乙二醇電解質(zhì)散劑在結(jié)腸鏡術(shù)前腸道準(zhǔn)備中的療效觀察[J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2020，20 (84)：163-164.

［2］張淑芬，薛揮. 聚乙二醇電解質(zhì)散劑聯(lián)合二甲硅油在結(jié)腸鏡檢查腸道準(zhǔn)備中的應(yīng)用效果觀察[J]. 陜西醫(yī)學(xué)雜志，2020，49 (2): 227-230.

［3］傅才招，林美英. 復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散劑聯(lián)合二甲硅油散的腸道準(zhǔn)備效果[J]. 中國老年保健醫(yī)學(xué)，2019，17 (5)：67-68.

［4］王偉，劉俊梅，鄒琴. 復(fù)方聚乙二醇電解質(zhì)散劑與甘露醇清潔腸道的臨床觀察[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2009，6 (12)：993-994.

［5］唐學(xué)萍. 聚乙二醇電解質(zhì)散劑不同口服方法在結(jié)直腸癌術(shù)前腸道準(zhǔn)備中的效果[J]. 中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥，2017，24 (21): 12-13.

［6］王丕波，曾艷敏，閆晶, 等. 離子色譜法測定海水中氯離子和硫酸根離子[J]. 海洋科學(xué)，2020， 44 (11): 52-56.

［7］趙畫，梁波. 離子色譜法測定氫氧化鈉中3種典型陰離子[J]. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2021， 52 (6): 842-845.

［8］孫善德，彭雪彥. 離子色譜法在飲用水痕量氯離子檢測中的應(yīng)用[J]. 環(huán)境與發(fā)展，2019，31 (4)：124-125.

［9］PANG X H. Ion chromatography and its application in drug analysis [C]// Chinese Journal of Histochemistry and Cytochemistry Clinical Symposium(中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志臨床研討會)，2017.

［10］國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》課題研究組，《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》[EB]. 2005年3月18日,https://www.cde.org.cn/zdyz/domesticinfopage? zdyzIdCODE=d5e37f20dbe191fdaa2e1543a3d82c0c.

［11］國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心《化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則》課題研究組《化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則》[EB].2005年3月18日,https://www.cde.org.cn/ zdyz/domesticinfopage?zdyzIdCODE=6fec13ef2fbb3a186e41a5fd7be41bfe.

［12］劉佳欣，賀夢瑤，湯興楠，等. 離子交換色譜法測定牛初乳中乳鐵蛋白的質(zhì)量濃度[J]. 遼寧化工，2021（3）：419-422.

Determination of Chloride Ion and Sulfate Ion in Polyethylene Glycol Electrolytes Powder by Ion Chromatography

（Shenyang Xinma Pharmaceutical Co., Ltd., Shenyang Liaoning 110102, China）

Determination method of chloride ion and sulfate ion in polyethylene glycol electrolytes powder by ion chromatography was established. Chromatographic column was Dionex IonPac AS11-HC anion analysis column (250 mm×4 mm,4 μm) , eluent was KOH, flow rate was 1.0 mL·min-1, injection volume was 10 μL, detector was conductivity detector, suppressor was Dionex AERS 500 (4 mm), suppression current was 50 mA. After verification, the specificity, linearity, repeatability, accuracy and durability of the method were good. The method is suitable for determination of chloride ion and sulfate ion in polyethylene glycol electrolytes powder.

Ion chromatography; Polyethylene glycol electrolytes powder; Chloride ion; Sulfate ion

TQ0657

A

1004-0935（2022）06-0874-04

2021-12-06

胡小燕（1981-），女，工程師，碩士研究生，黑龍江省雙鴨山市人，2006年畢業(yè)于沈陽藥科大學(xué)中藥學(xué)院天然藥物化學(xué)專業(yè)，研究方向：藥品質(zhì)量研究。