單純化療與免疫聯合化療對非小細胞肺癌患者炎性因子及免疫細胞的影響

趙景景 李 玲 譚于飛 趙 兵

肺癌作為臨床常見的呼吸系統惡性腫瘤，發病率和死亡率發病率和死亡率均高，嚴重威脅人類生命健康[1-2]。其中非小細胞癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是主要的肺癌類型之一，大約占所有肺癌類型的85%[3]。通常臨床上采用全身化療的治療手段抑制腫瘤細胞的復制，然而化療易引起患者出現一系列并發癥，包括出現感染、骨髓抑制、免疫功能降低等[4-5]。腫瘤細胞能被包括樹突狀細胞(DC)、細胞因子活化殺傷細胞(CIK)等在內的免疫細胞所殺傷，CIK還可增強化療療效[6]。因此細胞免疫治療手段可用于治療不能耐受化療或化療失敗的患者，免疫細胞聯合化療方案還可治療晚期肺癌患者[7-8]。因此，本研究觀察了DC、CIK聯合化療治療NSCLC患者的近期臨床效果。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選2018年1月至2020年1月于本院診治的NSCLC患者88例，年齡24～71歲，平均(57.32±7.64)歲。納入標準：①患者符合《中華醫學會肺癌臨床診療指南(2018版)》[9]中關于NSCLC診斷標準，經病理診斷確診為NSCLC；②無化療、DC/CIK治療禁忌；③患者及家屬自愿簽署受試同意書。排除標準：①合并其他器官嚴重性病變患者；②合并其他惡性腫瘤患者。

1.2 分組

隨機將患者分為觀察組(n=44)和對照組(n=44)。①對照組：采用單純化療治療方案，肺腺癌化療方案：第1 d，培美曲塞(國藥準字H20123010，上海凱茂生物醫藥有限公司) 500 mg/m2，靜脈滴注1 h；第1～3 d，順鉑(國藥準字H53021740，云南植物藥業有限公司)75 mg/m2，靜脈滴注1 h。肺鱗癌化療方案，第1、8 d，吉西他濱(國藥準字H20113286，齊魯制藥有限公司) 1250 mg/m2，靜脈滴注1 h；第1～3 d，順鉑以75 mg/m2的劑量靜脈滴注1 h。1個周期化療為21～28 d，依據不同的獲益及耐受情況，行6～8個周期化療。②觀察組：采用免疫聯合化療方案，在單純化療方案的基礎上行DC/CIK免疫治療，治療前1 d采集患者外周血單個核細胞，體外分離培養DC和CIK，第 8天進行收集回輸。將DC分成兩部分，其中一部分與CIK混合后加入含有1500 U/ml IL-2 和1%白蛋白的生理鹽水中，靜脈回輸入患者體內；另一部分用1.5 ml生理鹽水懸浮，皮下注入肺癌轉移途徑的引流淋巴結。1個免疫治療周期為2周內重復回輸3～5次，每3 個月進行1次DC、CIK免疫治療，共治療2次。

1.3 隨訪及療效、不良反應評估

(1)通過患者定期入院及電話咨詢方式隨訪，末次隨訪時間為2021年2月1日。(2)療效評價采用實體瘤療效評估標準1.1版(RECIST v1.1)[10]。完全緩解(CR)：目標病灶已完全消失；部分緩解(PR)：目標病灶體積縮小超過75%；穩定(SD)：目標病灶體積縮小50%～75%；進展(PD)：腫瘤病灶增加20%或有新的病灶出現。有效率(ORR)為CR和PR所占總例數的比率；疾病控制率(DCR)為CR、PR、SD所占總例數的比率。(3)參照WHO急性與亞急性不良反應觀察[11]，采用Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度評定，包括腎功能損害、惡心嘔吐、白細胞減少、血紅蛋白下降、血小板減少等。

1.4 血清炎性因子和免疫細胞水平

(1)分別于治療前、治療6 w后抽取患者空腹靜脈血3 ml，3000 rpm離心10 min，于-80℃冰箱保存。通過雙抗夾心酶聯免疫吸附法檢測血清白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-1β(IL-6)、白細胞介素-6(IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平。其中酶標儀型號為美國Hyperion MR Ⅲ型，ELISA試劑盒產自南京建成生物工程研究所。(2)于治療前、治療后抽取患者靜脈血5 ml，應用Beckmna Coulter 公司流式細胞儀測定CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等T細胞亞群水平。

1.5 統計學分析

2 結果

2.1 兩組基線資料比較

兩組患者基線資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。

表1 兩組患者臨床資料比較/例

2.2 兩組近期臨床療效比較

治療后觀察組ORR、DCR均高于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組近期療效比較/例

2.3 兩組患者血清IL-6、IL-1β和TNF-α水平比較

治療前兩組IL-6、IL-1β和TNF-α水平比較無顯著性差異(P>0.05)；治療后兩組患者IL-6、IL-1β和TNF-α水平出現顯著下降，且觀察組低于對照組(P<0.05)，見表3。

表3 兩組患者血清IL-6、IL-1β和TNF-α水平比較

2.4 兩組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平變化

治療前兩組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平差異無統計學意義(P>0.05)；治療后兩組水平出現上升，觀察組CD4+、CD4+/CD8+水平高于對照組(P<0.05)，見表4。

表4 兩組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較

2.5 兩組患者不良反應發生情況

兩組不良反應發生多為Ⅰ～Ⅱ度，包括血紅蛋白下降、腎功能損害、惡心嘔吐、白細胞減少、血小板減少等，均可耐受。對照組不良反應發生率顯著高于觀察組(P<0.05)。見表 5。

表5 兩組不良反應情況比較(例，%)

3 討論

肺癌患者常用的治療手段為化療，化療可以通過殺滅腫瘤細胞活性，從而阻止腫瘤病情的發展，但其不良反應嚴重，免疫抑制反應加重，易產生一系列并發癥，包括骨髓抑制、消化道反應、肝腎功能受損等，同時也會對化療的整體療效進一步削弱[12-13]。目前臨床針對腫瘤免疫逃逸機制研究已不斷深入，免疫細胞生物學和免疫分子生物學方面的發展也在不斷加快，腫瘤生物治療已成為臨床研究熱點[14]。目前常用的細胞免疫治療包括DCs、CIK細胞和DCs-CIK細胞等多種治療手段[15]。有研究證實DCs屬于抗原遞呈細胞，功能強大，可以通過激活幼稚T淋巴細胞以此誘導初次免疫應答，CIK細胞具有強增殖能力和高殺傷作用等特征[16]。研究證實DCs與CIK聯合治療腫瘤患者可提高患者T細胞的免疫功能，達到協同抗腫瘤的作用的目的[17-18]，因此DCs-CIK細胞免疫治療可在臨床上進行推廣應用。研究證實，DCs-CIK細胞免疫治療聯合化療可提高NSCLC患者的免疫功能和DCR，減少不良反應的發生率[19-21]。本研究結果顯示，觀察組ORR、DCR均高于對照組，提示免疫聯合化療治療可有效提高療效。觀察組患者不良反應發生率偏低，提示免疫聯合化療治療可有效降低治療過程中的不良反應的發生率。 腫瘤患者的炎癥因子水平通常較高，主要是由于腫瘤細胞翻譯炎性因子和患者存在心理應激，導致腫瘤生長的微環境失衡，從而引起患者貧血、神經軸功能紊亂等并發癥[22]。其中肺癌患者常見特異性炎癥因子包括IL-1β、IL-6、TNF-α等[23]，本研究結果發現，觀察組患者血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平低于對照組，提示免疫治療可能有抑制腫瘤細胞活性的作用，從而改善患者全身微環境，促使炎癥因子水平下降。 化療在一定程度上會損傷全身各臟器組織功能，主要表現為免疫功能抑制，造成患者出現骨髓抑制和感染等不良反應[24]。研究報道，與肺癌的發病機制有關，肺癌患者淋巴細胞亞群CD4+、CD4+/CD8+水平會出現下降[25]。本研究結果顯示，觀察組CD4+、CD4+/CD8+水平高于對照組，提示免疫治療可以一定程度上提高肺癌患者免疫功能。

綜上所述，免疫治療聯合化療可促使肺癌患者炎性因子水平下降，改善患者的免疫功能，從而達到提高療效的目的，且安全性高。但本研究存在局限性，樣本對象來源中心單一以及樣本數量不足，缺少關于炎性因子、免疫功能的動態分析，可能導致結果存在偏差，因此需要進一步擴大規模來驗證此結果。