檢驗科微生物檢驗質量與病原菌耐藥性臨床研究

紀建粉，楊超，鞏美伶

（山東省臨沭縣人民醫院 檢驗科，山東 臨沂 276700）

0 引言

微生物感染是很多疾病的主要致病因素，特別是對于感染性疾病而言，微生物檢驗是臨床診斷的重要途徑之一。血液、痰液、尿液及分泌物等是臨床送檢的常見微生物標本，從標本采集到檢驗，任何一個環節出現偏差則很可能會降低檢驗結果準確率[1]。近些年，廣譜抗菌藥物在臨床上廣泛應用，使病原菌耐藥性也相應增加，可能會增加感染性疾病治療難度。鑒于此，疾病治療階段要謹慎選用抗生素藥物，并對微生物檢驗質量嚴格把關[2]。采集120例山東省臨沭縣人民醫院進行微生物檢驗的標本為研究對象，分析影響檢驗質量的因素及研究病原菌的耐藥性，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采集120例患者的微生物檢測標本進行分析，時間為2018年8月-2019年8月所有病例均符合感染性疾病的診斷標準，本次研究通過醫院倫理委會批準，患者及其家屬知情參與。排除合并其他嚴重疾病、臨床資料不完整者。其中男76例，女44例，年齡18～74歲，平均（47.8±3.0）歲。

1.2 方法

有效利用檢驗報告，對影響微生物檢驗質量的因素加以調查分析，測算檢驗報告的準確性。針對納入本次研究的標本進行藥敏試驗研究：嚴格遵循無菌操作規程，分離、培養及鑒定病原菌，采用K-B試紙擴散法檢測微生物的藥敏性。

1.3 觀察指標

觀察并統計微生物各項指標檢測的臨床總準確率；分析影響檢驗結果的因素；對比格蘭陽、陰性菌對常用抗生素表現出的耐藥性。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 檢驗準確率

納入本次研究的120例患者的微生物檢驗報告的準確率為83.3%（100/120），其中尿常規報告的準確率最高，其次為腦脊液試驗與蛋白含量檢測，血常規檢測的準確率最低。具體情況見表1。

表1 120例患者樣本微生物檢測準確率統計[n（%）]

2.2 影響微生物檢驗質量的因素分析

采集20例試驗調查中的誤差報告，其中2018年12份、2019年8份。統計影響檢驗質量的因素后，發現人員、標本因素為主要的影響因素，操作因素緊跟其次。具體見表2。

表2 影響微生物檢驗質量的因素分析[n（%）]

2.3 病原菌的耐藥性檢測情況

藥敏試驗結果表明，金葡菌對紅霉素、喹諾類等藥物的耐藥性較強；大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌對喹喏酮、頭孢類藥物的耐藥性較強。具體見表3。

表3 病原菌的耐藥性檢測情況統計（n，%）

3 討論

近些年來，因病原菌引起的感染類疾病依然是危害人們身體健康的常見因素之一，國內外臨床成功研發出很多抗菌類藥物，其在降低傳染性疾病發生率、死亡率等方面表現出良好效能，但病原菌耐藥性問題的出現及蔓延在很大程度上影響著抗感染治療效果。伴隨經濟貿易的全球化。病原菌耐藥性現象也呈現出全球化趨勢。在這樣的背景下，各級醫院應主動開展病原菌耐藥性檢測以及研究活動。

微生物被定義成一群個體微小、結構簡單、肉眼無法觀察到的微小生物的總稱。既往國內外有大量的研究表明，大部分微生物對人體與動植物健康時有益處的，一些還是不可或缺的。寄生在人體的微生物主要有如下幾類：一是正常菌群，不僅無害，還能協助人體抵抗某些病原維生素及提供營養；二是條件致病菌，當菌群紊亂、人體抵抗力降低、寄居位置發生改變或者失衡時則就會致病，當下臨床上抗生素濫用使其表現出更加明顯的致病性特點；三是病原維生素，即導致人類與動植物發病的一類維生素，是當前臨床醫學微生物研究領域的主體。

微生物檢驗是臨床診斷感染性疾病的常用手段之一，有檢測有效、準確度較高等優勢[3]。基于臨床微生物檢驗，能使疾病診斷獲得更可靠憑據，也為流行病學等研究工作開展提供參照。但微生物臨床檢驗實踐中，影響檢驗質量的因素較多，在本次研究中，人員、標本因素是影響檢驗質量的主要因素，操作因素次之。2018年的占比分別是33.3%、33.3%、25.0%，2019年依次是37.5%、37.5%、12.5%。其中標本質量主要表現在采集標準是否被污染、標本中微生物活性等方面，而標本采集、保存及運送等環節若出現問題，則均可能降低標本檢測質量；在人員因素方面，主要是部分操作人員責任性不強、對微生物檢驗工作重視度不夠、專業技能與知識匱乏、新型醫療儀器不能嫻熟操作等；操作因素主要是檢驗操作規范性欠缺、相關檢驗試劑及培養基等登記工作不及時、各種試劑未進行標簽與分類等，正是因為臨床檢驗人員沒有規范地執行各項操作，會對檢驗結果的精準性形成直接影響。納入本次研究的120例患者的微生物檢驗報告的準確率為83.3%（100/120），其中尿常規報告的準確率最高，其次為腦脊液實驗（87.5%）與蛋白含量檢測（81.3%），血常規檢測的準確率最低（76.4%）。

為優化微生物檢驗質量，結合影響因素，可以從如下幾方面作出改進[4]。

（1）標本管理：嚴格依照標準操作規程采集標準，落實分類、編號。醫護人員認真審核患者姓名、病床號。痰液、血液是常見的送檢標本，采集痰液標本前要囑患者漱口，并盡量用力咳出深部痰液。盡量在患者體溫上升期抽血，采樣操作均要做到無菌化，減少標本受污情況。采集后在低溫環境下保存標本，若受檢病例可能感染了特殊菌種，則要于特殊條件下保存，總保存時間≤8h[5]。總之，要嚴格依照國家衛生部等相關規定采集樣本，這是能檢測到高質量標本的重要基礎，運送、儲存等過程中均要嚴格按照樣品所屬類型進行區別對待。如果面對的對象是培養基、試劑等實驗必需材料時，均要符合設計要求，在試驗前一定要全面了解材料是否過期，樣品采集、設備實際等一定要符合ICFMH的質控標準。

（2）提升操作人員職業素養：定期對檢驗科人員進行專業知識培訓，可通過網絡、機體授課等形式，培訓內容有常見疾病的感染菌知識、微生物檢驗相關知識、醫療儀器操作知識等。針對實驗室內的各位工作人員，均要進行十分嚴格的崗前培訓，務必要詳細記錄試驗過程中所得數據，具備嚴謹、細致的工作態度，深度分析試驗結果的能力，并且在各個環境內均要認真遵守有關標準的實施覺悟與意識。建設考評機制，調動工作人員學習專業知識、規范操作的積極性。實際微生物檢測過程中出現罕見菌種及既往沒有見過的藥敏表型，對于有強烈質控意識的工作人員通常會盡早進行研究和糾偏，將實際誤差發生率降到最低。

（3）完善檢測方法：對病原微生物采用的檢驗方法，一定要優選選擇使用國際標準或者國家標準，具體選擇環節上應遵照如下三點：一是做出平行樣，確保最后所得結果具有較高的可比性；二是創設出空白對照組，借此方式能較有效的排解掉因污染引起的不精準現象；三是編制科學、可行的質控標準。

（4）操作管理過程的規范化：要求實驗室環境必須無菌、無塵，工作人員嫻熟操作無菌隔離系統，定期檢查檢驗儀器性能、滅菌消毒；嚴格依照設備說明書操作，以防因操作失誤而使結果存在偏差，儀器使用后按時清潔、養護。定期更換鑒定板，更換完成后使用標準菌株予以質控；針對檢測后的標本進行殺菌處理，以防污染實驗室環境，通常使用高壓濕熱滅菌器完成，滅菌階段需聯合使用化學試紙檢測滅菌效果。針對實驗室內采用的所有試劑與培養基，一定要詳細記錄，使用試劑前觀察其顏色與厚度等指標，使用鑒定板、培養基前，觀察外包裝狀態及是否處于使用期限中[6-7]。

金葡菌、大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌是常見的臨床分離株，以上菌株對臨床常用抗生素藥物表現出不同的耐藥性。在本次研究中，金葡菌對青霉素、頭孢噻吩及四環素的耐藥性分別為22.4%、17.2%、13.8%；大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌均是革蘭陰性菌，既往有研究發現[8-9]，以上兩種致病菌對二、三代頭孢菌素及喹諾酮類藥物的耐藥率相對較高，但是對四代頭孢菌素等維持較高的敏感性，這可能和不規范使用抗菌藥物之間存在一定關聯性。在本次研究中，大腸埃希菌對頭孢噻吩、克林霉素、四環素的耐藥性分別為21.6%、32.4%、18.9%；肺炎克雷伯菌對青霉素、頭孢噻吩及慶大霉素的耐藥性分別為20.0%、24.0%、20.0%。郭赟[10]檢測了6600里患者的微生物指標，統計結果發現，一共檢出2651例致病菌，陽性率達到了40.17%，引起檢測結果出現誤差的因素有操作、樣本以及人員因素等；在2651例陽性樣本中，革蘭陰、陽性菌分別有1319株、971株，占比分別是49.75%、36.63%，真菌占比13.62%。經藥敏檢測發現，金黃色葡萄球菌對紅霉素、喹諾酮等藥物表現出較強的耐受性，耐藥率均在50.00%以上；而肺炎克雷伯菌、大腸埃希類均對喹諾酮、頭孢類等藥物的耐受性較強，耐受率高于50.00%。郭赟指出，臨床微生物檢測實踐中，操作者一定要認真遵守規范程序、合理開展各項操作活動，主動提升技能，取得高質量標準，始終堅持規范化用藥，借此方式削弱病原菌群對部分藥物的耐受性，本文與其觀點相近。

臨床醫護人員應積極了解不同病原菌的耐藥性，以更好地規范抗菌類藥物使用過程，減少產生耐藥性。特別是在面對感染性疾病患者時，醫生更要盡早采集標本，盡早檢測病原菌，明確引起患者發生感染的具體病菌，這是提升疾病臨床治療效果及促進患者早日康復出院的重要一環。

綜上所述，影響微生物檢驗質量的因素較多，臨床應加強管控，并積極落實病原菌藥敏試驗，促進抗菌藥物規范使用過程。