用液相色譜—質譜聯用法測滅多威、多菌靈及嘧霉胺等20種農藥殘留

楊琳琳

（鞍山市檢驗檢測認證中心，遼寧鞍山 114000）

1 試劑及樣品前處理的原理

1.1 原理

試樣用色譜純乙腈提取，提取液經過分散固相萃取凈化處理過后，用Waters TQD檢測，外標法（標準曲線）定量。

1.2 藥品

水：在實驗中水為GB/T 6682規定的一級水。乙腈：色譜純。甲酸：色譜純。提取鹽包內含4 g無水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸三鈉二水合物、0.5 g檸檬酸二鈉倍半水合物。含除水劑和凈化材料的塑料離心管：提取液使用無水硫酸鎂150 mg/ml、PSA 25 mg/ml和GCB 2.5 g/ml。陶瓷均質子：2 cm（長）×1 cm（外徑）。有機相微孔濾膜：13 mm×0.22 μm。

2 儀器和設備

液相色譜—三重四極桿質譜聯用儀：配有電噴霧離子源（ESI）Waters TQD。分析天平：感量0.1 mg和0.01 g。

3 試樣制備

3.1 試樣制備

食用菌、熱帶和亞熱帶水果（皮可食）隨機取樣1 kg，水生蔬菜、莖菜類蔬菜豆類蔬菜、核果類水果熱帶和亞熱帶水果（皮不可食）隨機取樣2 kg，瓜類蔬菜和水果取4～6個個體（取樣量不少于1 kg），其他蔬菜和水果隨機取樣3 kg。取后的樣品將其切碎，充分混勻，用四分法取一部分或全部用組織搗碎機勻漿后，放入樣品儲存瓶中。

3.2 樣品的儲存

將樣品按照測試和備用分開存放，于-18℃冰柜中保存。

4 分析步驟

稱取10 g（精確至0.01 g）試樣（蔬菜、水果、食用菌）于50 ml塑料離心管中，加入10 ml乙腈及1顆陶瓷均質子，劇烈振蕩1 min，加入4 g無水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉二水合物、0.5 g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物，劇烈振蕩1 min后4 200 r/min離心5 min。定量吸取上清液至內含除水劑和凈化材料的塑料離心管中（提取液使用無水硫酸鎂150 mg/ml、PSA 25 mg/ml）；對于顏色較深的試樣，離心管中另加入GCB（提取液使用2.5 mg/ml），渦旋混勻1 min。4 200 r/min離心 5 min，吸取上清液過微孔濾膜。

5 測定

5.1 標準曲線繪制

取空白試樣按樣品處理方法制備空白基質溶液，然后準確量取適量20種農藥混標溶液，用空白基質溶液稀釋配制成濃度為20μg/L、40μg/L、60μg/L、100μg/L、150μg/L、200μg/L的系列基質匹配標準溶液，供Waters TQD測定。分別以20種農藥的定量離子質量色譜峰面積為縱坐標，對應的基質匹配標液濃度為橫坐標，繪制標曲。

5.2 液相色譜—串聯質譜參考條件

5.2.1 液相色譜參考條件。色譜柱：C182.1×50 mm，1.7 μm。流速：0.4 mL/min。流動相：A為0.1%甲酸水溶液，C為乙腈溶液。進樣量：2 μL。流動相梯度洗脫程序（圖1）。

圖1 流動相梯度洗脫程序

5.2.2 質譜參考條件。Waters TQD的離子源：電噴霧離子源（ESI）。Waters TQD的掃描方式：正離子掃描。Waters TQD的質譜掃描方式：多反應監測掃描（MRM）。Waters TQD的離子源溫度：150℃。參考監測離子參數情況（表1）。

表1 監測離子參數

6 定性及定量

6.1 保留時間

被測樣品中目標農藥色譜峰的RT與相應標準色譜峰的RT相比較，相對誤差應在±2.5%之內。

6.2 離子豐度比

在相同實驗條件下進行樣品測定時，如果檢出的色譜峰的保留時間與標準樣品相一致，并且在扣除背景后的樣品質譜圖中，目標化合物選擇的子離子均出現，而且同一檢測批次，對同一化合物，樣品中目標化合物的離子豐度比與質量濃度相當的基質標準溶液相比，其允許偏差不超過規定的范圍（表1），則可判斷樣品中存在目標農藥[1]。

6.3 定量

采用外標（標準曲線法）定量。

7 結果計算

ω=（ρ×V）/m

式中，ω為試樣中被測物殘留量的數值（mg/kg）；

ρ為從基質匹配標準工作曲線中得到的試樣溶液中被測物質量的濃度（mg/L）；

V為提取液體積（mL）；

m為試樣的質量（g）。

8 結論

經多次反復試驗，發現對色素復雜的樣品過兩次含除水劑和凈化材料的塑料離心管，精密度和回收率都好于一次過濾的樣品。綜上所述，農藥殘留檢測工作在整體開展的過程當中，需要用到液質聯用技術，以此可以有效保證檢測結果的真實性和科學性，從而提升檢測結果的質量[2]。